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金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysK的表达及其多克隆抗体的制备被引量：4: 2014年; 将噬菌体与细菌孵育25min提取噬菌体感染细菌的总RNA,通过逆转录的方法获得cDNA,以此为模板进行PCR扩增得到目的片段,以pET-15b为载体构建重组质粒pET-15b-lysK并转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达金黄色葡萄球菌噬菌体K裂解酶基因lysK,表达产物蛋白经镍柱纯化后,测定LysK的裂解活性、裂解谱,并免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明,成功诱导表达可溶性LysK并获得重组蛋白,酶谱试验证明LysK对金黄色葡萄球菌具有裂解活性,LysK比噬菌体K裂解谱广。制备的兔多克隆抗体能够与LysK发生特异性反应且具有较高效价,为后续进行LysK体内治疗研究打下了基础。; 李跃宫鹏娟夏斐斐宋军顾敬敏张蕾杨梅孙长江冯新韩文瑜; 关键词：金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶多克隆抗体

金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶的表达与活性检测: 本试验通过重组表达的方法获得具有生物学活性的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LyK。以噬菌体cDNA为模板，通过PCR扩增获得编码LyK的DNA，将其定向克隆至表达载体pET-15b中，构建重组表达载体pET-1 5b-LyK...; 宋军李跃冯新孙长江雷连成韩文瑜; 关键词：金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶抗菌活性

应用噬菌体GH15和K治疗金黄色葡萄球菌感染被引量：8: 2013年; 【目的】研究金黄色葡萄球菌噬菌体GH15和K的生物学特性及联合用于治疗金黄色葡萄球菌感染的潜力。【方法】通过透射电镜观察噬菌体GH15和K的形态;测定二者的裂解谱和一步生长曲线;通过体外裂解实验和体内治疗实验分别测定单独使用GH15、K及二者混合使用时的裂解能力和对菌血症小鼠的保护效果。【结果】通过电镜观察发现两个噬菌体的外形相似,但GH15的尾部比K的长。GH15裂解谱较宽,可以裂解28株金葡菌,而K仅能裂解7株金葡菌。通过对两株噬菌体感染7株共同宿主菌形成的一步生长曲线进行拟合曲线分析,表明二者对不同宿主菌的增殖趋势是不同的。在体外,混合噬菌体与单个噬菌体的抑菌活性无明显差别;在体内实验中,混合噬菌体表现出优于单个噬菌体的治疗效果,用较低的剂量即可以达到高剂量单个噬菌体的治疗效果。【结论】GH15和K所形成的混合噬菌体在治疗金黄色葡萄球菌感染具有更大的应用潜力。; 刘晓贺顾敬敏韩文瑜李跃韩东张庆明路荣宋军冯新雷连成; 关键词：噬菌体鸡尾酒疗法

噬菌体治疗:曲折但前进: 人们在很久之前就应用噬菌体进行治疗，但由于其在剂量和药效及副作用等方面的不可估量，并没有被广泛的应用。随着耐药性细菌的不断产生，以及噬菌体改造技术的成熟，噬菌体治疗又展示出了强大的生命力。; 李跃韩文瑜顾敬敏宋军刘晓贺路荣韩东; 关键词：耐药机制抗生素免疫系统内毒素

NDM-1肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体的分离鉴定及其对小鼠菌血症的治疗研究被引量：9: 2012年; 噬菌体疗法在对抗多重耐药病原菌引起的感染方面具有很大的应用潜力。本研究从污水中分离到一株新的噬菌体，命名为NKP-1，并对噬菌体NKP-1的主要生物学特性进行研究。通过电镜观察确定NKP-1为短尾噬菌体，裂解试验表明该噬菌体为烈性噬菌体，具有很高的增值效率。体外试验表明它能够快速感染超强耐药的肺炎克雷伯菌株BAA-2146（NDM-1）并将其裂解。通过腹腔注射单一剂量的NKP-1（2×10^7pfu／mL）就可以有效地保护BAA-2146（4×10^9cfu／mL）感染引起的小鼠菌血症模型。在肺炎克雷伯菌BAA-2146与噬菌体NKP-1体外共同培养的过程中，我们分离到对该噬菌体具有抗性的突变菌株，通过动物试验确定该突变株表现为极低的毒力，且不影响NKP-1的治疗效果。本研究为利用噬菌体治疗多重耐药菌感染提供了理论基础与试验依据。; 路荣顾敬敏刘晓贺李跃韩东宋军冯新韩文瑜; 关键词：NDM-1 多重耐药性肺炎克雷伯菌噬菌体

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李跃