蒋雅丽
- 作品数:5 被引量:3H指数:1
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- pEGFP-N1-ZIP2真核表达载体的构建及对人T淋巴和单核细胞系锌转运体基因表达的影响被引量:1
- 2012年
- 目的构建pEGFP-N1-ZIP2真核表达载体,观察其在人T淋巴细胞系Jurkat-E6-1和人单核细胞细胞系THP-1中的表达,并检测ZIP2在两种细胞系中过表达及其对其他锌转运体的影响。方法利用外周血经RT-PCR扩增获得人ZIP2 cDNA序列,将其与pEGFP-N1定向连接,构建完成转染细胞48 h后,通过RT-PCR检测ZIP2过表达情况,并检测ZIP1、ZIP6、ZIP8、ZIP10、ZnT1、ZnT5等锌转运体表达变化。结果经过双酶切鉴定以及测序结果显示目的基因大小、插入方向均正确。在Jurkat-E6-1细胞中,ZIP2过表达使ZnT-1表达显著降低(P<0.05),但在THP-1细胞中,ZIP2过表达对其他锌转运体表达没有显著影响。结论成功构建pEGFP-N1-ZIP2真核表达载体,瞬时转染Jurkat-E6-1细胞和THP-1细胞,Jurkat-E6-1细胞中ZIP2过表达使ZnT1表达下调,而THP-1细胞中ZIP2过表达并未对选定的其他锌转运体产生显著影响,两种不同的免疫细胞系中ZIP2过表达对锌转运体家族其他成员影响表现出差异。
- 蒋雅丽陶艳婷胡晓燕徐春晓张莲英
- 关键词:锌转运体过表达聚合酶链反应
- 真核表达载体pEGFP-N1-ZIP10的构建及其对人乳腺癌细胞中其他锌转运体基因表达的影响被引量:2
- 2010年
- 目的构建pEGFP-N1-ZIP10表达载体,观察其在乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中的表达,并检测ZIP10过表达对其他锌转运体的影响。方法从外周血经RT-PCR扩增ZIP10cDNA序列,并将其定向克隆至真核表达质粒pEGFP-N1中,pEGFP-N1-ZIP10经酶切及测序鉴定后,转染乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞,RT-PCR检测ZIP10的表达及其他锌转运体ZnT1、ZIP1、ZIP6等表达的变化。结果酶切和测序证实目的基因片段大小、方向均正确,转染MCF-7和MDA-MB-231细胞,RT-PCR检测到ZIP10在mRNA水平过表达,并发现使ZIP1的表达显著降低。结论成功构建真核表达载体pEGFP-N1-ZIP10,并在乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞瞬时表达成功,转染后使细胞中ZIP1的表达明显降低,为进一步研究ZIP10在乳腺癌发生发展中的作用奠定基础。
- 郭鲁胡晓燕蒋雅丽徐同福王品李铭张莲英
- 关键词:乳腺癌细胞
- ZIP2基因过表达对人单核细胞系THP-1的影响及肺结核外周血单个核细胞中ZIP2的初步研究
- 研究背景: 锌是生命有机体维持正常生命活动所必需的微量营养元素之一,它作为多种金属酶和蛋白的关键组分或辅助因子而广泛参与生命体中许多种重要的生物化学反应,在机体的生长、发育以及代谢过程中发挥重要作用。哺乳动物中,两...
- 蒋雅丽
- 关键词:锌转运体INF-Γ肺结核外周血单个核细胞
- 文献传递
- 锌转运体ZIP10过表达对乳腺癌细胞侵袭能力的影响
- 2012年
- 目的:将ZIP10基因真核表达载体转染乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7细胞,研究ZIP10过表达对乳腺癌细胞侵袭能力的影响。方法:经双酶切后凝胶电泳鉴定ZIP10基因表达载体pEGFP-N1-ZIP10,利用脂质体转染法将pEGFP-N1-ZIP10及其相应空载体分别转染乳腺癌细胞MDA-MB-231(ER-)及MCF-7(ER+)。RT-PCR检测乳腺癌细胞中MMP-2、MMP-9的mRNA水平,Western blot技术检测细胞中ZIP10蛋白质的表达水平,MTT法观察转染pEGFP-N1-ZIP10前后乳腺癌细胞增殖活性,Transwell实验观察转染pEGFP-N1-ZIP10前后乳腺癌细胞侵袭能力的改变。结果:乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞瞬时转染成功后,MMP-2、MMP-9的mRNA水平没有显著差异,MTT检测结果显示,pEGFP-N1-ZIP10转染乳腺癌细胞后对其增殖活性没有明显影响;Transwell肿瘤细胞侵袭实验显示,ZIP10过表达可显著增加乳腺癌细胞的侵袭能力。结论:ZIP10真核表达载体转染乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231使ZIP10过表达,对细胞增殖活性没有明显影响,但可明显增加肿瘤细胞的侵袭能力。
- 陶艳亭郭鲁孙平蒋雅丽黄庆王晓蕾张莲英
- 关键词:锌转运体乳腺癌基因转染肿瘤侵袭
- ZIP2基因过表达对人单核细胞体系THP-1的影响及肺结核外周血单个核细胞中ZIP2的初步研究
- 研究背景:
锌是生命有机体维持正常生命活动所必需的微量营养元素之一,它作为多种金属酶和蛋白的关键组分或辅助因子而广泛参与生命体中许多种重要的生物化学反应,在机体的生长、发育以及代谢过程中发挥重要作用。哺乳动物中,两...
- 蒋雅丽
- 关键词:肺结核锌转运体