许丽媛
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：湖北工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省教育厅优秀中青年人才项目湖北省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 利用五碳糖产高纯度L-乳酸的大肠杆菌基因工程菌的构建被引量：9
- 2013年
- 【目的】本研究以已敲除多个产杂酸酶基因的大肠杆菌(Escherichia coli)乙醇工程菌SZ470(ΔfrdBCΔldhAΔackAΔfocA-pBΔpdhR::pBp6-pBrbs-aceEF-lpd)为起始菌株,进一步敲除其乙醇脱氢酶(alcoholdehydrogenase,ADH)基因,同时插入带有自身启动子的乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)的L-乳酸脱氢酶(L-lactate dehydrogenase,LLDH)基因,构建可利用五碳糖同型发酵L-乳酸重组大肠杆菌。【方法】利用λ噬菌体Red重组系统构建乙醇脱氢酶基因(adhE)缺失菌株Escherichia coli JH01,并克隆P.acidilactici的ldhL基因,利用染色体插入技术将其整合到JH01基因组,构建产L-乳酸大肠杆菌基因工程菌Escherichia coliJH12,利用无氧发酵15 L发酵罐测定重组菌株L-乳酸产量。【结果】工程菌JH12在15 L发酵罐中以6%的葡萄糖为碳源进行发酵,发酵到36 h的过程中葡萄糖的消耗速率为1.46 g/(L.h),乳酸生产强度为1.14 g/(L.h),乳酸的产量达到41.13 g/L。发酵产物中未检测到琥珀酸、甲酸的生成,仅有少量乙酸生成,L-乳酸纯度达95.69%(L-乳酸在总发酵产物的比率)。工程菌JH12以6%的木糖为碳源进行发酵,发酵到36 h的过程中葡萄糖的消耗速率为0.88 g/(L.h),乳酸生产强度为0.60 g/(L.h),乳酸的产量达到34.73 g/L。发酵产物中杂酸少,乳酸的纯度高达98%。【结论】本研究通过基因敲除、染色体插入及无氧进化筛选获得一株产L-乳酸的大肠杆菌工程菌JH12,该菌株不需利用外源质粒,稳定性好,可利用五碳糖进行发酵,发酵产物中杂酸少,L-乳酸的纯度高。本研究为L-乳酸大肠杆菌工程菌的构建提供一定的技术支持,同时也为大肠杆菌L-乳酸的工业化生产提供了参考依据。
- 赵锦芳许丽媛王永泽赵筱王金华
- 关键词：大肠杆菌工程菌L-乳酸同源重组
- 重组大肠杆菌利用木糖产高纯度L-乳酸的研究
- L-乳酸是一种重要的有机酸,广泛应用于食品、医药和化工领域。近年来,随着可生物降解聚乳酸(poly-lactic acid, PL A)的广泛应用,国内外L-乳酸的需求呈逐年上升。微生物发酵法生产乳酸由于生产成本低、产品...
- 许丽媛
- 关键词：重组大肠杆菌L-乳酸木糖
- 文献传递
- 乳酸片球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在重组大肠杆菌JH12中的过量表达被引量：1
- 2014年
- 以工程菌Escherichia coli SZ85基因组为模板,克隆得到乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)的L-乳酸脱氢酶基因(ldhL),连接到pUcm-T载体后,双酶切然后将其连接到表达载体pET-28a上,重组质粒经筛选后转入染色体上含有ldhL基因(来源P.acidilactici)的工程菌Escherichia coli JH12。P.acidilactici的ldhL基因过量表达体系E.coli JH12(pET-28a-ldhL)能利用浓度7%的木糖为碳源进行厌氧发酵,过量表达ldhL使L-乳酸产量提高了10 g/L,达64.86 g/L,糖酸转化率高达96%。
- 罗璇许丽媛王永泽赵锦芳赵筱王金华
- 关键词：重组大肠杆菌L-乳酸
- 重组大肠杆菌利用木糖发酵产高纯度L-乳酸被引量：2
- 2013年
- 对重组大肠杆菌JH16利用木糖产高纯度的L-乳酸进行研究。通过无氧管驯化Escherichia coli JH12菌株得到E.coli JH16,驯化后的菌株菌体浓度提高了31%,乙酸积累减少了43%;在摇瓶中考察不同Mg2+浓度对E.coli JH16产L-乳酸的影响,确定最适Mg2+质量浓度为0.25 g/L;E.coli JH16以60 g/L木糖为C源,在7 L全自动发酵罐中添加0.25 g/L Mg2+,乳酸积累量提高了18%,达38.18 g/L,乳酸纯度高达95%;E.coli JH16在30 g/L木糖和30 g/L葡萄糖混合C源中,优先利用葡萄糖,当葡萄糖质量浓度低于1.56 g/L后,菌体开始利用木糖进行乳酸发酵,最终得到39 g/L乳酸。
- 许丽媛赵锦芳王永泽赵筱王金华
- 关键词：重组大肠杆菌L-乳酸木糖
