贾海丽
- 作品数：8 被引量：3H指数：1
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- 绵羊Granulysin在大肠杆菌中的表达与鉴定
- 2007年
- 根据GenBank中公布的绵羊Granulysin基因序列设计引物,用PCR法从重组质粒中扩增出含BamHI/XhoI酶切位点的Granulysin片段,双酶切后克隆至pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达质粒pGEX-Granulysin,转化宿主菌大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导进行表达,SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白分子量约为41 kDa,并以包含体形式存在。
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- 关键词：绵羊原核表达大肠杆菌
- 兔CCR10基因的克隆与序列分析
- 2008年
- 克隆并分析兔CCR10基因。基于电子延伸序列,设计1对克隆引物,兔盲肠黏膜组织提取总RNA,进行RT-PCR,将PCR产物与pMD19-T载体连接后转化E.coli JM109感受态细胞、检测阳性克隆、测序并进行序列分析。克隆的兔CCR10基因长为723bp,编码由241个氨基酸残基组成的CCR10前体蛋白,三级结构预测表明CCR10具有一个多克隆免疫球蛋白区(PIG-X)。克隆的兔CCR10基因与绵羊、人的同源性分别为89.6%、89.9%,推导的氨基酸序列与绵羊、人的同源性分别为94.2%、93.8%,结构特征与绵羊、人的相一致。克隆了兔CCR10基因并注册GenBank(登录号:EU348829)。
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- 关键词：克隆
- 兔CCL28基因的克隆与序列分析
- 2009年
- 克隆并分析兔CCL28基因。基于电子延伸序列,设计1对克隆引物,兔盲肠黏膜组织提取总RNA,进行RT-PCR,将PCR产物与pMD19-T载体连接后转化E.coliJM109感受态细胞、检测阳性克隆、测序并进行序列分析。克隆的兔CCL28基因片段长为133 bp,编码由44个氨基酸残基组成的CCL28前体蛋白,克隆的兔CCL28基因与绵羊、野猪的同源性分别为76.7%、77.4%,推导的氨基酸序列与绵羊、野猪的同源性分别为56.8%、56.8%,结构特征与绵羊、野猪的相一致。并注册GenBank(Accession.EU727201)。
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- 关键词：克隆
- CD147基因在家兔肠道的克隆与结构预测被引量：2
- 2009年
- 基于电子延伸序列，克隆并分析兔CD147基因。采用兔十二指肠黏膜组织提取总RNA，进行RT-PCR反应，测序并进行结构预测。克隆的兔CD147基因包含一个完整的开放阅读框架，全长为810bp，编码由270个氨基酸残基组成的CD147前体蛋白，推导的氨基酸序列信号肽为1～16个氨基酸。氨基酸序列与牛、人、褐鼠、野猪的同源性分别为62．5％，65．9％，59．5％和66．3％，三级结构预测表明CD147具有2个免疫球蛋白类似区。试验成功克隆了兔CD147基因，注册到GenBank（Accession．EU650668），并预测其三级结构，为进一步研究其生物学功能奠定基础。
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- 关键词：CD147克隆
- 家兔CD147基因的克隆与原核表达
- CD147是免疫球蛋白超家族（IgSF）的一个成员，是一种新发现的细胞表面黏附因子。作为一种跨膜蛋白，CD147广泛表达于上皮细胞，内皮细胞，参与到许多的生理和病理过程，与肿瘤细胞的表达、精子发育，神经系统功能调节等密切...
- 贾海丽
- 关键词：家兔基因克隆原核表达
- 文献传递
- 乳汁中RNA提取方法的建立被引量：1
- 2008年
- 用牛初乳作为试验材料,进行乳汁体细胞的提取及RNA的提取与扩增。结果显示:牛初乳中含有大量的体细胞(SCC约为20万/ml,活力约为60%),从体细胞中提取RNA,所提取的RNA完整性和纯度可以用来合成cDNA,管家基因GAPDH扩增条带正确,表明可以用合成的cDNA作为模板进行其它基因的扩增,为奶牛在基因工程方面的研究提供分子生物学技术平台。
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- 关键词：牛初乳RNA提取
- 兔CCR9基因的克隆与序列分析
- 2008年
- 设计1对克隆引物,从兔十二指肠黏膜组织提取总RNA,进行RT-PCR,将PCR产物与pMD19-T载体连接后转化E.coliJM109感受态细胞,检测阳性克隆、测序并进行序列分析。结果表明:克隆的兔CCR9基因长为624 bp,编码由208个氨基酸残基组成的CCR9前体蛋白,预测CCR9具有多个跨膜区。克隆的兔CCR9基因与绵羊、人的同源性分别为82.9%、82.7%;推导的兔CCR9氨基酸序列与绵羊、人的同源性分别为80.1%、82.2%,其结构特征与绵羊、人的相一致。
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- 关键词：克隆
- 小鼠不同组织中催乳素释放肽受体基因表达的研究
- 2009年
- 克隆并研究小鼠催乳素释放肽受体基因在妊娠期小鼠不同组织的表达;提取小鼠不同组织总RNA,进行RT-PCR,PCR产物与pMD-19T连接后转化E.coli DH5a,检测阳性克隆并测序;测序结果表明,所得序列与小鼠催乳素释放肽编码区序列的相似性为99.49%;克隆所得序列为小鼠催乳素释放肽受体基因片段,催乳素释放肽基因在妊娠期小鼠不同组织中均有表达。
- 刘涛朱河水李海霞贾海丽王艳玲
- 关键词：小鼠克隆
