徐霞
- 作品数：21 被引量：68H指数：4
- 供职机构：广州医科大学金域检验学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目人才培养模式创新实验区项目更多>>
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- TAT-Apoptin对肿瘤细胞的促凋亡作用
- 2017年
- 目的构建TAT-Apoptin的原核表达载体,表达并纯化凋亡素蛋白,检测其对多种肿瘤细胞的抑制作用。方法利用PCR合成TAT-Apoptin序列,并将序列连接到pET-28b(+)原核表达载体的多克隆位点上,构建pET-28b-Apoptin载体,然后将重组载体转入E.coli BL21宿主菌,IPTG诱导表达,利用Ni-NTA亲和柱进行纯化获得目的蛋白。将TAT-Apoptin加入到肿瘤细胞中,用CCK8法检测TAT-Apoptin对肿瘤细胞的抑制作用。结果成功构建pET-28b-Apoptin质粒,IPTG诱导宿主菌表达TAT-Apoptin,经SDS-PAGE分析,在15×10~3Mr处发现目的蛋白条带,与预期一致。镜检、CCK8法检测发现纯化的TAT-Apoptin对肿瘤细胞A549、MDA-MB-231、SKB-R3均具有一定的促凋亡作用。结论 TAT-Apoptin原核表达载体构建完成,表达的TAT-Apoptin对肿瘤细胞生长有促凋亡作用。
- 周城波刘安琪杜晶春徐霞
- 关键词：凋亡素原核表达肿瘤凋亡
- 铜绿假单胞菌耐药性分析及其超广谱β-内酰胺酶的流行分布被引量：4
- 2016年
- 目的研究临床分离的铜绿假单胞菌的耐药性及其超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行分布情况。方法收集2011年1月至2012年6月广州医科大学附属第一医院微生物室分离出的头孢他啶耐药(MIC≥16)的铜绿假单胞菌111株,分析其对11种抗生素的耐药性特点和多重耐药情况,采用表型确证试验筛选产ESBLs的菌株,并对表型试验阳性菌株进行相关耐药基因的多重PCR检测。结果 111株头孢他啶耐药的铜绿假单胞菌对11种抗生素的不敏感率如下:哌拉西林94.4%、哌拉西林/他唑巴坦90.8%、头孢吡肟81.1%、氨曲南91.9%、美罗培南72.7%、亚胺培南72.9%、庆大霉素55.9%、妥布霉素41.4%、阿米卡星31.5%、环丙沙星73.0%、左旋氧氟沙星66.7%;ESBLs表型确证试验阳性菌株共23株,阳性率为20.7%;用多重PCR对23株表型试验阳性菌株进行检测,发现20株β-内酰胺酶基因检测阳性,其中19株为PER型,5株为TEM型,4株同时携带PER型和TEM型耐药基因。结论头孢他啶耐药的铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物不敏感率高,对氨基糖苷类和喹诺酮类抗菌药物不敏感率则稍低,多重耐药现象普遍;其ESBLs基因可表现为不同的耐药基因型,不同的ESBLs基因型可出现在同一株细菌中;本院铜绿假单胞菌ESBLs基因以PER型最常见。
- 向波陈定强徐霞
- 关键词：铜绿假单胞菌超广谱Β-内酰胺酶耐药基因
- 乙型肝炎病毒B、C基因型与临床表现被引量：11
- 2015年
- 目的:研究广东地区乙型肝炎病毒基因型分布情况,B、C基因型与乙型肝炎患者临床表现之间的关系。方法:回顾性分析172例慢性乙型肝炎病毒患者[慢性乙型病毒性肝炎(CHB)、乙型肝炎后肝硬化(LC)、原发性肝癌(HCC)]的乙型肝炎病毒基因分型结果,并根据基因分型结果进行分组,比较B、C基因型患者的临床表现、HBe Ag定性、HBV-DNA定量、ALT及AST结果。结果:172例患者的乙肝病毒型分别为B型94例(54.7%)、C型69例(40.1%)、D型3例(1.7%)、未分型6例(3.5%);C型在LC组、HCC组中的比例与CHB组比较,差异有统计学意义(P<0.05);C型的HBe Ag阳性率高于B型(P<0.05);B、C型两组的ALT、AST差异有显著统计学意义(P<0.01);两组基因型间HBV-DNA水平的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:广东地区HBV感染以B、C基因型为主,以B型居高;C基因型肝功能损害更严重,发展为肝硬化、肝癌的可能性更大,感染不同HBV基因型与HBV-DNA水平无明显相关。
- 曾华张智贤梁倩文陈梅徐霞
- 关键词：乙型肝炎病毒基因分型HBV-DNAHBEAG
- 登革2型病毒NS2B_H-NS3蛋白酶复合物的原核表达及活性研究被引量：2
- 2016年
- 目的通过原核表达获得登革2型病毒NS2B_H-NS3pro重组蛋白,并对其蛋白酶活性进行初步研究。方法通过引入G4TG4连接臂,利用重叠PCR扩增登革2型病毒NS2B_H和NS3pro基因序列,构建p ET-28b-NS2B_HG4TG4-NS3pro蛋白酶复合物原核表达载体,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS技术对纯化后重组蛋白进行鉴定,FRET技术检测其蛋白酶活性。结果成功构建p ET-28b-NS2B_H-G4TG4-NS3pro原核表达载体,获得与预期分子量大小相符且纯度较高的可溶性蛋白,质谱分析表明重组蛋白为登革2型病毒NS2B_HNS3pro蛋白酶复合物,具有较高的蛋白酶活性。结论基因工程技术获得的NS2B_H-G4TG4-NS3pro重组蛋白为后续登革病毒蛋白酶适配体抑制剂的筛选奠定了基础。
- 林卫虹林勇平杨笑涵徐霞
- 关键词：登革2型病毒原核表达蛋白酶活性
- 扁蒴藤素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用被引量：3
- 2016年
- 目的:研究扁蒴藤素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞MCF-7/TAX生长的作用。方法:以乳腺癌细胞株MCF-7为对照,同时制作紫杉醇耐药乳腺癌细胞MCF-7/TAX;在两组细胞中分别给与7种浓度(0.25、0.5、1、2.5、5、10和20μmol/L)扁蒴藤素或紫杉醇培养48 h,用MTT法检测药物对MCF-7和MCF-7/TAX细胞作用的半数抑制浓度(IC50)值,并计算MCF-7/TAX细胞对紫杉醇或扁蒴藤素的耐药指数(RI);同时用Annexin VFITC/PI染色观察扁蒴藤素作用后MCF-7/TAX凋亡细胞比例。结果:MCF-7/TAX对紫杉醇RI达19.39,而扁蒴藤素对MCF-7/TAX细胞的生长有高效抑制作用,且呈现明显的剂量依赖性,对其作用48 h的IC50为0.52μmol/L,MCF-7/TAX对扁蒴藤素的RI仅为0.88;扁蒴藤素作用后,Annexin V染色阳性的MCF-7/TAX细胞比例较对照明显升高。结论:扁蒴藤素能抵抗紫杉醇耐药乳腺癌细胞的耐药性,激活MCF-7/TAX细胞凋亡,对其生长发挥高效抑制作用。
- 谢闺娥杜晶春董桂兰徐霞
- 关键词：紫杉醇耐药凋亡
- JNJ-7706621对阿霉素耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用研究
- 2017年
- 目的研究JNJ-7706621对人阿霉素耐药MCF-7/ADR乳腺癌细胞生长的作用。方法采用MTT试验检测JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞生长的影响;采用TUNEL染色试验分析JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞凋亡的激活作用;Caspase酶活性检测分析JNJ-7706621处理后,MCF-7/ADR细胞中Caspase-8、Caspase-9活化程度;应用流式细胞周期分析检测JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞周期的影响。结果 JNJ-7706621能有效抑制阿霉素耐药细胞MCF-7/ADR的生长,并呈现明显的浓度依赖性,作用48 h的IC50仅为0.83μmol/L。2μmol/L JNJ-7706621作用24 h后,TUNEL染色阳性的MCF-7/ADR细胞比率较对照组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);MCF-7/ADR细胞中Caspase-8、-9酶活性均显著升高,差异亦具有统计学意义(P<0.05)。在1μmol/L JNJ-7706621作用24 h后,G2/M期细胞比率由对照(7.1±1.3)%升高至(23.8±3.1)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 JNJ-7706621能同时激活内外源性凋亡途径,诱导MCF-7/ADR细胞凋亡的发生,并将MCF-7/ADR细胞周期阻滞在G2/M期,从而对阿霉素耐药MCF-7/ADR细胞的生长发挥有效抑制作用。
- 谢闺娥杜晶春徐霞
- 关键词：乳腺癌细胞阿霉素耐药MCF-7/ADR凋亡细胞周期
- 雷公藤红素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用被引量：4
- 2016年
- 目的研究雷公藤红素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的作用及其机制。方法用MTT法检测雷公藤红素对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞生长的影响;Annexin V-FITC/PI染色检测雷公藤红素对MCF-7/TAX凋亡的诱导作用;Caspase酶活性测定分析雷公藤红素作用后,MCF-7/TAX细胞中Caspase-8、-9活化程度。结果 MCF-7/TAX对紫杉醇耐药指数达19.39;而雷公藤红素对MCF-7/TAX细胞的生长有高效抑制作用,且呈现明显的剂量依赖性,对其作用48 h的IC50为0.92μmol/L,MCF-7/TAX对雷公藤红素的敏感性高于MCF-7,耐药指数仅为0.77。雷公藤红素作用后,Annexin V染色阳性的MCF-7/TAX细胞较对照明显升高。Caspase酶活性测定结果显示,雷公藤红素作用24 h后,MCF-7/TAX细胞中Caspase-8、-9酶活性均显著升高。结论雷公藤红素能同时激活内外源性凋亡途径,诱导MCF-7/TAX细胞凋亡的发生,从而高效抑制紫杉醇耐药MCF-7/TAX乳腺癌细胞的生长。
- 谢闺娥杜晶春徐霞
- 关键词：紫杉醇耐药雷公藤红素凋亡
- 高尔基体蛋白73在肝细胞癌早期诊断及进展中的应用价值被引量：2
- 2014年
- 目的 分析高尔基体蛋白73（GP73）并与甲胎蛋白（AFP）比较在肝细胞癌（HCC）中的临床诊断价值.方法 分别采用酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫分析定量测定77例HCC、21例肝硬化、20例肝炎以及59例健康对照组血清GP73和AFP的水平,并进行分析比较.结果 HCC组血清GP73和AFP均显著高于肝硬化、肝炎及健康对照组（均为P＜0.05）;早期HCC组血清GP73显著高于肝硬化组（P＜0.05）,而血清AFP在两组中无明显差异（P＞0.05）.GP73对HCC的诊断敏感度明显高于AFP（85.7％vs 62.3％,P＜0.05）,两者联合检测可提高其诊断敏感度到90.9％.结论 GP73是一项很好的诊断和鉴别早期HCC的血清标志物,且可能对HCC进展的监测具有作用.AFP联合GP73检测可显著提高对HCC的临床诊断价值.
- 吴玉徐霞
- 关键词：甲胎蛋白类高尔基体蛋白73
- SNS-032对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用研究
- 2017年
- 目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂SNS-032对人紫杉醇耐药MCF-7/TAX乳腺癌细胞生长的作用。方法采用MTT试验检测MCF-7/TAX细胞对紫杉醇的耐药情况以及SNS-032对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞生长的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染试验检测SNS-032对MCF-7/TAX耐药细胞凋亡的诱导作用。结果 MCF-7/TAX细胞对紫杉醇耐药指数达19.39;而SNS-032能显著抑制MCF-7/TAX耐药细胞的增殖,且具有明显的浓度依赖性,对其作用48 h的IC50为164.5 nmol/L,MCF-7/TAX对SNS-032的耐药指数仅为0.89。SNS-032作用后,Annexin V染色阳性的MCF-7/TAX细胞比例较对照明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SNS-032能激活MCF-7/TAX耐药细胞凋亡的发生,从而对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞的生长发挥高效抑制作用。
- 谢闺娥杜晶春董桂兰徐霞
- 关键词：紫杉醇耐药
- 校企协同育人平台促进医学检验技术专业发展的探索被引量：14
- 2016年
- 以国务院及教育部推行校企合作协同育人的教育理念为指引,以广州医科大学与广州金域医学检验中心共建金域检验学院为实例,围绕校企协同育人平台搭建、教师团队组建、特色培育方案制定等方面,探索和实践校企协同育人模式促进医学检验教育发展的作用。
- 徐霞周志锋汤郡申子喻林勇平吴晓蔓梁耀铭
