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甘蓝型油菜几丁质酶基因BnCHB4环境信号响应分析被引量：2: 2012年; 为了揭示植物激素及环境胁迫对甘蓝型油菜(Brassica napus)几丁质酶基因(BnCHB4)表达的影响。用化学物质苯丙噻重氮(BTH)、甲基茉莉酸(MeJA)、1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)以及核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和机械伤害分别处理油菜品种中双9号,采用荧光定量PCR方法测定BnCHB4在各诱导或处理后的相对表达量,结果表明,BTH、MeJA、ACC、S.sclerotiorum和机械伤害都能够快速诱导该基因的表达。表明,BnCHB4是各种环境信号的响应基因。; 王政姚银安张志燕顾守来李冠英; 关键词：油菜几丁质酶基因

甘蓝型油菜WRKY基因家族碱基组成及密码子使用特性分析被引量：6: 2013年; WRKY转录因子广泛地参与植物的抗逆防卫反应。通过对甘蓝型油菜WRKY基因家族碱基组成和密码子用法的分析,发现其碱基组成不仅对密码子的偏好性选择有重要影响,而且与基因的表达水平参数(Nc、CAI、CBI等)显著相关。通过对密码子RSCU值的分析,得到了TTA、CTT、AGA等29个偏好密码子,且多以碱基A或T结尾。ENc-plot分析表明,除了碱基组成之外,自然选择等其它因素对密码子偏好性也有影响。; 李冠英王政张志燕方和娣谭小力; 关键词：甘蓝型油菜碱基组成密码子

甘蓝型油菜BnMKS1基因的克隆、亚细胞定位及其诱导表达: 2013年; 为了从油菜中克隆BnMKS1基因并且了解其诱导表达情况,以甘蓝型油菜品种中双9号为材料,采用同源克隆法克隆获得甘蓝型油菜MKS1(BnMKS1)的cDNA序列。BnMKS1编码的蛋白质含有217个氨基酸残基,与AtMKS1有82%的相似性。序列分析结果表明BnMKS1含有1个VQ结构域和8个潜在的MAP kinase磷酸化位点。农杆菌介导的烟草瞬时表达分析结果显示,BnMKS1是一个细胞核定位蛋白质。定量RT-PCR分析结果显示,菌核病菌(核盘菌)、甲基茉莉酸以及苯丙噻重氮强烈诱导BnMKS1的表达,而脱落酸对其表达没有影响。说明BnMKS1在油菜对菌核病菌Sclerotinia.sclerotiorum的防卫反应中起作用。这些结果将为进一步深入研究BnMKS1在油菜与核盘菌相互作用中的功能提供有用的信息。; 王政方和娣陈宇李冠英谭小力; 关键词：油菜基因克隆亚细胞定位

甘蓝型油菜BnMPK3的序列分析及其对环境信号的响应: 2016年; 为了分析油菜MAP激酶3对各种环境胁迫信号的表达响应,以甘蓝型油菜中双9号为试材,采用同源克隆法克隆了甘蓝型油菜MAP激酶3基因(Bn MPK3)的c DNA序列。序列分析表明,Bn MPK3编码一条370个氨基酸残基的蛋白序列,这个序列含有1个高度保守的TEY磷酸化位点和一个CD锚定区域,与At MPK3的序列相似性达到94%。烟草瞬时表达分析显示,Bn MPK3是1个细胞核定位蛋白;荧光定量PCR分析显示,Bn MPK3在茎以及花和叶组织器官中特异性表达,并且对Na Cl溶液、4℃低温、PEG溶液和K2Cr2O7溶液以及甲基茉莉酸(Me JA)和乙烯前体(ACC)等的处理显著上调表达。结果表明,Bn MPK3是高盐、低温、干旱、重金属以及JA和ET等各种环境胁迫因子的响应基因,建议Bn MPK3可能在调控油菜对各种环境胁迫防御的过程中位于JA和ET相关的信号网络中,数据将为进一步研究Bn MPK3在油菜抗逆中的功能及其机制提供理论线索。; 陈婷方和娣李霄李冠英谭小力张志燕王政; 关键词：甘蓝型油菜环境胁迫

甘蓝型油菜表皮特异硫蛋白(ESP)的序列分析及其诱导表达被引量：1: 2012年; 为了揭示植物激素及环境胁迫对甘蓝型油菜(Brassica napus)表皮特异硫蛋白(ESP)表达的影响,以中双9号品种为材料,采用同源克隆法获得一编码甘蓝型油菜表皮特异硫蛋白(BnESP)的cDNA,序列分析表明其编码蛋白BnESP含有343个氨基酸,与青花菜(Brassica napus)ESP有99%的相似性,与拟南芥腈特异性蛋白、类黑芥子酶结合蛋白、茉莉酸诱导蛋白有较高的同源性。荧光定量RT-PCR分析显示,甲基茉莉酸和机械伤害快速激活BnESP的表达,苯丙噻重氮和核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)抑制其表达。研究证明BnESP是茉莉酸诱导蛋白,可能在水杨酸和茉莉酸信号的互作及油菜对S.sclerotiorum的反应网络中起作用。; 王政谭小力张志燕顾守来李冠英; 关键词：油菜基因克隆

甘蓝型油菜BnCOP9基因的克隆及其环境信号响应分析被引量：3: 2012年; 植物COP9(Constitutively photomorphogenic 9)信号体(CSN)是一个多亚基复合体,而CSN8是这个复合体必不可少的亚基。为了克隆油菜CSN8基因并分析其在各种环境信号下的表达变化,以甘蓝型油菜中双9号为材料,采用同源克隆法克隆油菜CSN8(BnCOP9)cDNA。序列分析表明,BnCOP9编码的蛋白含有197个氨基酸残基,在其蛋白质中部含有1个PCI结构域,与Arabidopsis thaliana CSN8(AtCOP9)有92%的相似性。定量RT-PCR分析显示,Scle-rotinia sclerotiorum、伤处理以及甲基茉莉酸快速激活BnCOP9的表达,苯丙噻重氮抑制其表达,表明BnCOP9作为各种环境信号的响应基因在水杨酸和茉莉酸信号的交叉谈话中及油菜对S.sclerotiorum和机械伤害反应的网络中起作用,这些结果为研究BnCOP9在油菜抗逆中的作用提供线索。; 王政谭小力张志燕顾守来李冠英陈宇; 关键词：油菜基因克隆

农杆菌介导的油菜子叶瞬时表达被引量：7: 2012年; 实验以甘蓝型油菜宁油16为材料,绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,建立了农杆菌介导的油菜子叶瞬时表达系统。我们构建了GFP表达载体pB2GW7.0-gfp,并成功转化农杆菌。实验中通过添加P19来提高GFP在油菜子叶中的瞬时表达量。并提取了注射有P19和pB2GW7.0-gfp农杆菌混合液的油菜子叶RNA,经RT-PCR鉴定,发现在4～8 d GFP均能表达。激光共聚焦显微镜分析表明农杆菌介导的油菜子叶瞬时表达系统能够转化油菜子叶的表皮细胞和保卫细胞。甘蓝型油菜子叶瞬时表达方法简便、快速、可靠,从种子播种到获得荧光蛋白表达,全过程只需要20 d。表明在研究油菜基因的表达和功能方面有潜在的应用前景。; 谭小力诸葛锐军李冠英卢长明王政张志燕; 关键词：甘蓝型油菜子叶农杆菌

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李冠英