刘文
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 日本血吸虫重组蛋白SjGST的表达纯化及单克隆抗体的制备和特性鉴定
- 2010年
- 目的:获取高纯度的日本血吸虫重组GST蛋白(rSjGST),并制备单克隆抗体。方法:纯化rSjGST后,以其作为抗原,免疫Balb/c雌鼠,并用杂交瘤技术制备抗rSjGST的单克隆抗体,以ELISA方法测定抗体的效价,以蛋白质免疫印迹法测定抗体的特异性。结果:纯化出大量的高纯度rSjGST,并且筛选出能够稳定分泌抗rSjGST单抗的杂交瘤细胞株3C12。用试剂盒检测出单抗的亚型为IgG1。结论:依靠大肠埃希菌表达系统,高效表达出rSjGST,成功制备单克隆抗体,为血吸虫病免疫诊断提供了研究基础。
- 刘文游牧饶圣宏徐振山宋礼华
- 关键词：日本血吸虫单克隆抗体
- 抗基质金属蛋白酶-2单克隆抗体的制备、鉴定及其应用被引量：1
- 2012年
- 目的:制备和鉴定基质金属蛋白酶-2(MMP-2)单克隆抗体(mAb),检测其在人卵巢癌组织和裸鼠移植瘤中的表达。方法:利用戊二醛法制备人工抗原MMP-2-BSA和MMP-2-KLH,并免疫小鼠,采用标准杂交瘤技术,亚克隆筛选出单克隆细胞株,制备腹水,采用辛酸-硫酸铵法纯化mAb。以ELISA、Western blot法对抗体进行鉴定。通过免疫组织化学法与商品化多抗进行对比,并联合CA125将自制抗体应用于临床人卵巢癌组织和裸鼠移植瘤的检测。结果:人工抗原MMP-2-BSA和MMP-2-KLH合成成功。获取3株稳定分泌抗MMP-2的杂交瘤细胞株(3G10、4D12、1E8),抗体亚型均为IgG1。其中3G10反应性最强。经间接ELISA法检测纯化后抗体的效价达1∶1×106。自制mAb应用于人卵巢癌组织切片和裸鼠模型检测,卵巢癌组织与正常组织之间表达差异有统计学意义(P<0.01)。卵巢癌患者CA125和MMP-2联合检测阳性率较单一检测高(P<0.01)。自制mAb的染色特性与商品化抗体相似,且检出率较商品化多抗高(P<0.01)。结论:采用人工合成多肽作为免疫原成功制备了与卵巢癌相关的特异性抗MMP-2 mAb。
- 游牧刘文徐振山宋礼华
- 关键词：基质金属蛋白酶-2单克隆抗体卵巢癌裸鼠
- 日本血吸虫GST蛋白和14-3-3蛋白的研究进展被引量：1
- 2011年
- 血吸虫病是严重危害人类健康的人兽共患病之一,在全球范围内,血吸虫病曾在76个国家和地区流行,有超过2亿人感染了血吸虫病。目前,世界上采取了一些人畜同步治疗等综合防治措施,虽取得了一定的成效,但仍面临着成本高、再感染率高等一系列问题。因此,寻找新的治疗药物、疫苗候选分子以及开发高度特异且敏感的标准化免疫诊断试剂是当前日本血吸虫病基础研究的重要内容。主要对WHO提出的最具潜力的疫苗候选分子血吸虫GST蛋白以及参与血吸虫许多生物学功能的14-3-3蛋白的最新研究进展进行一些阐述。
- 刘文徐振山宋礼华
- hGH单克隆抗体的筛选及双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2011年
- 采用杂交瘤法制备单克隆抗体,并用辛酸-硫酸铵法纯化单抗,通过ELISA方法和Western blotting测定抗体的效价与特异性,并进行抗体类型、相对亲和力测定;应用纯化的单抗建立hGH双抗体夹心ELISA检测方法。筛选出两株可以稳定分泌抗hGH单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为3E11、2G9,抗体类型均为IgG1,抗体滴度均可达10-10,特异性好,相对亲和力高,以筛选到的两株单抗建立的双抗夹心ELISA法线性范围为0.09～1.5625ng/mL,R2>0.9,灵敏度为0.09ng/mL。筛选出高效抗hGH的单抗,并建立了hGH双抗体夹心ELISA检测方法。
- 饶圣宏刘文游牧徐振山宋礼华
- 关键词：人生长激素单克隆抗体双抗体夹心ELISA法
- 基质金属蛋白酶-2和p185^(HER-2/neu)蛋白在卵巢癌中的研究进展被引量：6
- 2011年
- 基质金属蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)是基质金属蛋白酶家族的重要成员,能降解明胶蛋白和Ⅳ型、V型胶原,在细胞外基质的降解过程中起着关键作用,能够促进肿瘤细胞发生侵袭和转移。p185HER-2/neu蛋白是一种相对分子质量185×103的跨膜糖蛋白,由HER-2/neu基因编码,属于酪氨酸激酶受体家族,p185HER-2/neu蛋白在人类多种癌症中存在扩增及过量表达,并与肿瘤的侵袭性表型及生存期短密切相关。就基质金属蛋白酶-2和p185HER-2/neu蛋白的生物学特性,与卵巢癌侵袭转移和预后的关系及MMP-2和p185HER-2/neu蛋白的研究情况等予以综述。
- 游牧刘文饶圣宏徐振山宋礼华
- 关键词：基质金属蛋白酶-2卵巢癌预后
- 应用组织芯片技术检测卵巢癌组织中基质金属蛋白酶-2和p185^(HER-2/neu)的表达及其临床意义
- 2011年
- 目的:研究基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和p185HER-2/neu在卵巢癌组织中的表达及临床意义,探讨MMP-2和p185HER-2/neu联合和单一检测对卵巢癌诊断的价值。方法:利用组织芯片技术结合免疫组织化学SP法检测80例卵巢癌组织及30例正常卵巢组织MMP-2和p185HER-2/neu的表达。结果:MMP-2和p185HER-2/neu在卵巢癌中的阳性率均明显高于正常卵巢组织(P<0.01),MMP-2和p185HER-2/neu的阳性率与分化程度、临床分期及淋巴结转移的差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01),而与组织学类型无明显关系。联合MMP-2和p185HER-2/neu诊断卵巢癌的灵敏度、准确性有所上升,阴性似然比下降。结论:MMP-2和p185HER-2/neu在卵巢癌组织中的表达对卵巢癌的生长、浸润及转移起重要作用,与卵巢癌的分化、临床分期及淋巴结转移相关。
- 游牧刘文饶圣宏徐振山宋礼华
- 关键词：卵巢肿瘤基质金属蛋白酶-2组织芯片
