李长福
- 作品数:7 被引量:7H指数:1
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- 一种葛根的快速繁殖方法
- 本发明公开了一种葛根的快速繁殖方法,以葛根的整个幼芽为外植体,其步骤是A、用网纱将葛根幼芽包起放在自来水下冲洗,再用酒精灭菌,无菌水冲洗,再用双氧水灭菌,无菌水冲洗;B、用消毒镊子接种到配制好的培养基上萌动后转接到配制好...
- 李长福章焰生
- 两种影响因子对葫芦巴发根转化率的影响被引量:1
- 2017年
- 葫芦巴(Trigonella foenum-graecum L.)是薯蓣皂素源植物之一,本文以来源于中国山西省的一年生草本植物葫芦巴为实验材料,研究发根农杆菌菌液浓度与超声波辅助处理两个因素对葫芦巴发根转化率的影响。结果显示,随着菌液浓度升高,发根数和发根转化率均逐渐升高,中浓度与低浓度菌液相比,发根数量和转化率分别升高了2.58和3.90倍;利用高浓度菌液侵染获得的发根数量和发根转化率最高,分别是低浓度菌液的7.33和4.32倍。在超声波处理实验中,超声(工作频率40 KHz,超声功率180 W)处理30 s与经未超声处理的对照组相比,发根数量及转化率略有下降;当超声处理60 s时,发根转化率明显上升,为对照组的2.48倍。葫芦巴发根体系的建立可为生产薯蓣皂素以及解析薯蓣皂素合成路径提供一个关键的技术平台。
- 李晓华李长福李长福黎佳章焰生
- 关键词:葫芦巴发根发根农杆菌
- 一种葛根的快速繁殖方法
- 本发明公开了一种葛根的快速繁殖方法,以葛根的整个幼芽为外植体,其步骤是A、用网纱将葛根幼芽包起放在自来水下冲洗,再用酒精灭菌,无菌水冲洗,再用双氧水灭菌,无菌水冲洗;B、用消毒镊子接种到配制好的培养基上萌动后转接到配制好...
- 李长福章焰生
- 文献传递
- 葫芦巴环阿屯醇合酶基因的分离及其对薯蓣皂素合成的影响被引量:5
- 2019年
- 以薯蓣皂素合成植物葫芦巴(Trigonella foenum-graecum L.)为材料,从中分离了环阿屯醇合酶基因Tf CAS,并对其序列特征、基因的表达及其对葫芦巴薯蓣皂素生物合成的影响进行了分析。结果显示,该基因全长2271 bp,共编码756个氨基酸;其氨基酸序列与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula Gaertn.)、豌豆(Pisum sativum L.)及百脉根(Lotus japonicus L.)环阿屯醇合酶氨基酸序列的同源性分别为94%、91%和89%。利用酵母表达系统对Tf CAS蛋白的生物化学功能进行了验证,结果表明该蛋白能够催化环阿屯醇的合成。进一步利用葫芦巴发根遗传转化体系在葫芦巴中过量表达Tf CAS基因,发现该基因的过量表达大幅提高了Tf CAS的表达,且促进了葫芦巴中β-谷甾醇和薯蓣皂素的生物合成,但与对照相比差异不显著。研究结果表明Tf CAS基因参与了葫芦巴薯蓣皂素的生物合成,但其并非为该合成途径中的限速酶。
- 刘梦迪李长福章焰生
- 关键词:薯蓣皂素葫芦巴发根
- 羽扇豆醇C28氧化酶基因及其获得方法与应用
- 本发明公开了一种羽扇豆醇C28氧化酶基因及其获得方法与应用,涉及五环三萜化合物的生物合成技术。羽扇豆醇C28氧化酶基因来源于长春花植物叶片,基因被命名为<I>CYP716AL1</I>,基因序列为①或②:①其核苷酸序列是...
- 章焰生黄莉莉李长福黎佳
- 文献传递
- 羽扇豆醇C28氧化酶基因及其获得方法与应用
- 本发明公开了一种羽扇豆醇C28氧化酶基因及其获得方法与应用,涉及五环三萜化合物的生物合成技术。羽扇豆醇C28氧化酶基因来源于长春花植物叶片,基因被命名为CYP716AL1,基因序列为①或②:①其核苷酸序列是SEQIDNO...
- 章焰生黄莉莉李长福黎佳
- 野葛异黄酮合酶基因的分离与功能验证被引量:1
- 2013年
- 异黄酮是野葛(Pueraria lobata)中的主要活性成分,而异黄酮合酶(IFS)是催化异黄酮生物合成的第一步关键酶,尽管野葛的IFS基因已被分离,但其功能还未得到任何验证。本研究以中国安徽省郎溪县的野葛为材料,利用RT-PCR技术成功克隆到野葛IFS基因,命名为PlIFS,PlIFS开放阅读框大小为1566 bp,编码521个氨基酸,将该基因克隆到GAL1启动子控制下的酵母表达载体pESC-TRP上,得到重组质粒pESC-TRP-PlIFS,通过LiAc/ssDNA/PEG方法将其转化进酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)WAT11中进行异源表达,并在酵母体内对其活性进行验证,结果显示PlIFS能催化甘草素生成大豆苷元,表现出异黄酮合酶活性特征。荧光定量PCR分析显示,PlIFS基因主要在野葛的根中表达,这与活性物质异黄酮主要在野葛根中的积累模式一致。
- 苟君波李长福陈方方李兆波黎佳
- 关键词:野葛甘草素大豆苷元