王永勤
- 作品数：81 被引量：715H指数：15
- 供职机构：北京市农林科学院蔬菜研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市农林科学院科技创新能力建设专项引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 环介导等温扩增技术检测菊花中番茄不孕病毒被引量：15
- 2010年
- 【目的】环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术。本研究拟用该技术建立菊花中番茄不孕病毒(TAV)的检测方法。【方法】设计能识别TAV CP序列6个特定区域的4种LAMP特异引物,对MgCl2、dNTPs、甜菜碱等LAMP反应条件进行优化,利用新建的LAMP法检测TAV,比较LAMP和RT-PCR2种不同方法的检测灵敏度。【结果】建立了检测番茄不孕病毒的LAMP技术;LAMP比RT-PCR具有灵敏度更高、快速、简便等优点。【结论】建立的LAMP技术能快速、准确、简便地检测出菊花中的番茄不孕病毒。
- 刘佳黄丛林吴忠义张秀海王永勤
- 关键词：菊花番茄不孕病毒反转录聚合酶链式反应
- 次氯酸钠用于植物培养基灭菌方法初探被引量：6
- 2012年
- 为了解决培养基高压蒸汽灭菌时间长、能源消耗多等问题,对植物组织培养基的灭菌方法进行了改进,在培养基的配制过程中添加不同浓度次氯酸钠进行灭菌。结果表明,在培养基配制过程中,琼脂加热溶解后,趁热在培养基中添加10mg/L次氯酸钠,未发现污染。以‘神马’菊花为外植体,在培养基配制过程中加入终浓度20mg/L的次氯酸钠时,植株可以正常生长,而且,生长状况好于高压灭菌组;次氯酸钠浓度高于50mg/L时,生长状况差于高压灭菌组,而且会产生伤害。在本试验条件下,利用次氯酸钠代替高压蒸汽灭菌具有一定的可行性;该灭菌方法具有缩短灭菌时间,节约能源等优点。
- 张雨婷王贤王永勤孙继凡
- 关键词：植物培养基次氯酸钠
- 白菜核雄性不育两用系AFLP扩增特异片段的克隆及序列分析被引量：10
- 2004年
- 利用AFLP技术从白菜核不育两用系"矮脚黄"可育系DNA中得到一个特异扩增片段MF-14.Southern杂交结果证实不育系也存在该片段的同源序列;回收该特异扩增片段并将其克隆到pGEM-TEasy载体进行序列测定.测序结果表明,该片段全长289bp,其碱基组成为A+T=46.02%.与白菜RAPD特异片段S107及其他育性相关基因核苷酸序列比较,同源性均低于50%.表明该片段为一新的序列.
- 符庆功余小林曹家树王永勤向珣
- 关键词：白菜核雄性不育AFLP
- 洋葱细胞质雄性不育研究进展被引量：2
- 2012年
- 细胞质雄性不育性在高等植物遗传育种研究中占有重要地位,一直是植物遗传育种和遗传理论研究的热点。通过综述洋葱细胞质雄性不育类型、不育机理、起源关系等方面的研究进展,对洋葱工作的进一步开展及雄性不育的选育提出一些粗浅的建议。
- 周晓娟赵瑞王永勤
- 关键词：洋葱细胞质雄性不育
- 玉米遗传转化方法的研究进展被引量：8
- 2007年
- 综述玉米遗传转化的几种常用方法及转化受体的发展,并且对其利弊进行讨论。
- 孙伟张江丽黄丛林王永勤吴忠义张秀海
- 关键词：玉米受体系统
- 大葱AfCER1基因的克隆及表达分析被引量：5
- 2016年
- 基于大葱RNA-seq转录组数据库中蜡质相关基因Af CER1的序列设计引物,利用RT-PCR(Reverse transcription-polymerase chain reaction)和RACE(Rapid amplification of c DNA ends)技术获得Af CER1(Allium fistulisum CER1)的全长c DNA序列,并通过生物信息学手段分析基因的序列;利用RT-PCR和Real-time PCR分析Af CER1基因在大葱野生型和突变型植株中的空间表达模式。结果表明,Af CER1基因全长为2 144 bp,包含一个1 857 bp完整的开放阅读框(ORF),编码618个氨基酸。蛋白序列比对分析表明,Af CER1与其他物种的CER1具有相似的结构域:脂肪酸羟化酶结构域和WAX2-C结构域。由RT-PCR的结果可知,Af CER1基因在大葱的根、叶鞘、叶片等部位均有表达,且在野生型和突变型植株中的表达量有差异。Real-time PCR分析表明,在大葱的根和叶鞘及刚见光的叶片中,Af CER1在突变型植株中的表达量相对野生型少;而在见光较多的叶片部位,Af CER1在突变型植株中的表达量却比野生型多。研究可为大葱蜡质合成的分子机制提供理论基础。
- 奥娜赵泓裴雁曦王永勤
- 关键词：大葱蜡质AF基因克隆
- 洋葱S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆及分析
- 2016年
- 根据洋葱转录组测序结果设计了S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(Ac SAMS)引物,利用RT-PCR技术和RACE技术克隆了洋葱S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的c DNA全长,命名为Ac SAMS。该c DNA全长1 475 bp,ORF为1 191 bp,编码396个氨基酸的多肽。生物信息学分析表明,Ac SAMS氨基酸序列与紫萼同源性为95%,与短花药野生稻为94%,与桔梗和粳稻为93%。系统发育树结果显示,Ac SAMS与唐菖莆SAMS的亲缘关系最近。该基因的克隆可为进一步研究Ac SAMS在抗旱、抗冻、耐盐等抗逆过程中的作用机理提供理论依据,为开展抗逆基因工程奠定基础。
- 王晶刘恩科王永勤
- 关键词：洋葱克隆
- 菊花的饮食文化
- 菊花起源于中国,是中国的十大名花之一。菊花因含有多种生物活性因子,具有抗衰老、明目、清热、抗病毒、降血压、降血脂等保健作用。在中国传统的饮食文化中,菊花占有一席之地,不仅食用方法多:泡茶、酿酒、制食,而且文化底蕴深厚。
- 黄丛林李春华吴忠义张秀海王永勤梁宏霞
- 关键词：菊花饮食文化
- 文献传递
- 高质量枣树基因组DNA提取方法的研究被引量：39
- 2005年
- 主要针对枣树组织中多糖严重干扰基因组DNA提取质量的问题,本研究比较了常规CTAB法、TE3D法和改良CTAB法3种方法的处理效果。结果表明:常规CTAB法提取DNA难以去除植物组织中的多糖类杂质;TE3D法提取DNA多糖杂质少,但产率低、易降解、褐化严重;而改良CTAB法提取DNA量大(1000ng/滋l左右),产率高,可达120滋gDNA/g新鲜组织,无明显降解,杂质少,A260/A280比值1.80左右,通过基因组DNA-AFLP指纹图谱分析,完全满足实验要求。并进一步对改良CTAB法的关键步骤作出具体分析讨论。
- 李登科黄丛林田建保王永康王永勤
- 关键词：DNA提取方法枣树改良CTAB法基因组DNA提取指纹图谱分析褐化
- 套袋对茄子果实农药残留量及产量和品质的影响被引量：10
- 2010年
- 以京茄20为试材,研究了套袋对茄子农药残留、产量和品质的影响。结果表明:套袋可以显著降低茄子的农药残留,提高茄子的产量,改善茄子的光洁度等外观品质;套袋处理极显著降低茄子的硬度和纤维素含量;套袋处理茄子果实的坐果率、商品率、含水量、可溶性糖、Vc、蛋白质和维生素P含量处理和对照之间差异不显著;不同袋子对花青素含量的影响不同,套紫色聚乙烯塑料薄膜袋的茄子花青素含量与对照无显著差异,其它处理花青素的含量显著低于对照。因此,应选用紫色聚乙烯塑料薄膜作为茄子套袋材料。
- 王仪岚张媛媛梁毅王永勤
- 关键词：茄子套袋农药残留生长发育
