王维旭
- 作品数:6 被引量:19H指数:4
- 供职机构:中南民族大学生命科学学院生物技术国家民委重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金武汉市青年科技晨光计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学理学更多>>
- 籼稻成熟胚愈伤组织继代培养过程中内源多胺含量的测定被引量:5
- 2010年
- 采用高效液相色谱法对诱导产生的籼稻粤泰B(YTB)成熟胚愈伤组织继代培养过程中内源多胺组分和含量进行了测定。结果表明采用XDB-C18柱流动相梯度(从40%甲醇到80%甲醇)洗脱可以使Put、Spd和Spm3种多胺组分得到很好的分离。水稻粤泰B成熟胚愈伤组织继代培养5d后体内Put和Spd的含量明显增加,而Spm的含量基本不变。推测Put和Spd对水稻愈伤组织的生长发育可能有重要的作用,可为优化水稻愈伤组织培养基的组分提供参考。
- 胡文王维旭周杰王春台刘学群谭艳平
- 关键词:成熟胚愈伤组织高效液相色谱多胺
- 微量元素对籼稻品种愈伤组织诱导和褐化的影响被引量:5
- 2010年
- 为了优化籼稻品种的组织培养特性,以N6培养基为基础,分析了微量元素3种不同浓度处理对籼稻品种粤泰B在组织培养中愈伤组织诱导率及褐化率的影响。结果表明:微量元素的浓度对愈伤组织的诱导率影响不大,而对褐化的控制有明显的影响,在1.2倍浓度下愈伤组织的褐化率最低为10.35%,并且愈伤组织致密、状态较好,0.8倍次之,褐化率为26.15%,而一般使用的1.0倍浓度下褐化率为44.55%,褐化情况是最严重的,并且愈伤组织软化,状态很差。
- 王维旭张骥诚刘学群王春台刘新琼
- 关键词:微量元素籼稻褐化
- 籼稻品种Kasalath遗传转化条件研究(摘要)(英文)被引量:4
- 2009年
- [目的]探索籼稻品种Kasalath的遗传转化条件,为针对该品种进一步的分子生物学研究奠定基础。[方法]以籼稻品种Kasalath的愈伤组织为转化受体,应用根癌农杆菌介导法进行遗传转化;从共培养方式、共培养时间、共培养后处理方法等方面优化遗传转化体系。①共培养条件的优化:愈伤组织接入共培养基时分2组,1组加1层灭菌滤纸,1组不加。②共培养时间的优化:分别于农杆菌液侵染愈伤1,2,3,4 d观察。③共培养后处理方式的优化:方式1,将共培养后的愈伤组织用灭菌蒸馏水冲洗多次至水清亮无混浊悬浮物,然后用含有羧苄青霉素的灭菌蒸馏水浸泡30 min,放置在有3层滤纸的灭菌培养皿中短暂干燥。方式2,将共培养后的愈伤组织置于带2层滤纸的灭菌培养皿中干燥,干燥3 d后取出。2种方式干燥后的愈伤组织均接入含40 mg/L潮霉素筛选压的筛选培养基上,筛选2次,每次2~3周。[结果]Kasalath的愈伤组织经农杆菌侵染后,经过共培养,再经筛选培养出抗性愈伤直至分化成转化苗,共培养时问对于转化效率的影响较大。如果共培养时间过长,将导致农杆菌过度生长,随后的筛选培养中即使加入抗菌的羧苄青霉素也无法抑制其生长,愈伤组织褐化死亡率增大。而共培养时间太短,则影响农杆菌Ti质粒T-DNA的转移,影响转化效率。该研究中当愈伤组织与农杆菌共培养时间为2 d时的转化效果最好,抗性愈伤组织获得率达84.1%,转化菌的转化率达到73%,且共培养时愈伤组织是否直接接触培养基对转化无明显影响。利用PMCG161载体引物PMCGF和PMCGR对所获得的部分转化苗进行PCR检测,23株转化苗中有13株扩出了预期的约750 bp条带,且为阳性转化苗,表明外源基因OsMAPK2已整合到水稻品种Kasalath的基因组中。[结论]经愈伤组织的诱导、共培养、筛选、预分化、分化等步骤,最终成功实现了农杆菌介导的OsMAPK2�
- 王维旭张骥诚刘学群王春台刘新琼
- 关键词:愈伤组织农杆菌介导
- 籼稻粤泰B成熟胚愈伤组织继代培养过程中内源多胺含量的变化
- 多胺是植物体内普遍存在的一类低分子量脂肪族含氮碱,主要有腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)等。它们参与一系列的植物生长发育过程的调节,例如刺激细胞生长、分化和增殖,促进体细胞胚胎发生,以及延缓衰老等。本实验...
- 胡文王维旭周杰王春台刘学群
- 关键词:愈伤组织高效液相色谱多胺
- 文献传递
- 水稻稻瘟病抗性基因Pi36抗性机理的初步研究
- 稻瘟病是水稻生产上最具毁灭性的病害之一,分布广、危害大,长期困扰水稻的生产。相对于化学防治法的高成本和高污染,培育和合理利用抗病品种,是对这一病害最经济和最安全的控制手段,发掘具有广谱抗性的新抗源,是抗稻瘟病育种的主要研...
- 王维旭
- 关键词:稻瘟病实时定量RT-PCRMAPK
- 文献传递
- 籼稻品种Kasalath遗传转化条件的研究被引量:6
- 2010年
- [目的]探索籼稻品种Kasalath的遗传转化条件,为该品种进一步的分子生物学研究奠定基础。[方法]以籼稻品种Kasalath的愈伤组织为转化受体,应用根癌农杆菌介导法进行遗传转化;从共培养方式、共培养时间、共培养后处理方法等方面优化遗传转化体系。[结果]当愈伤组织与农杆菌共培养时间为2d时的转化效果最好,抗性愈伤组织获得率达84.1%,转化菌的转化率达到73%,且共培养时愈伤组织是否直接接触培养基对转化无明显影响。[结论]遗传转化成功地将外源基因OsMAPK2整合到水稻基因组中。
- 王维旭张骥诚刘学群王春台刘新琼
- 关键词:愈伤组织农杆菌介导