谢印良
- 作品数：10 被引量：10H指数：2
- 供职机构：内蒙古医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抑制肿瘤血管的新生药物被引量：2
- 2009年
- 血管新生在肿瘤的生长和侵袭过程中起着关键作用，随着肿瘤血管新生机制研究的深入及以肿瘤血管为靶点的药物在临床治疗肿瘤时取得较好的疗效，证实了通过抑制肿瘤血管新生来抑制肿瘤生长的理念。目前，抗血管新生药物基础和临床研究取得了新的进展，详细了解肿瘤血管新生的分子机制和抗血管新生药物的作用机制将有助于肿瘤的治疗，并为开发新型抗肿瘤药物提供科学依据。
- 谢印良许元富
- 关键词：血管新生抑制剂新生血管化病理性内皮生长因子基质金属蛋白酶类
- 肿瘤坏死因子-α小分子抑制剂的设计、筛选及初步活性测定被引量：2
- 2009年
- 目的结合计算机虚拟筛选和实物活性筛选,寻找新的TNF-α的小分子抑制剂,并完成对其生物学活性的测定。方法基于TNF-α受体蛋白的晶体结构和计算机辅助设计,用docking方法对含有约9万个小分子三维数据库进行筛选;选择对接结果较好的50个化合物进行初步的抑制TNF-α细胞毒活性实验;MTT法进一步分析筛选出的小分子化合物的细胞毒性,以及其在不同剂量时抑制TNF-α对L929细胞毒性的作用;采用AnnexinV-FITC检测上述小分子对TNF-α诱导的细胞凋亡的抑制作用。结果确定受体p55蛋白第二结构域的第二loop环中7肽(RKEMGQV)作为docking的配体模板;经计算机虚拟筛选后得到965种结构相似的化合物,综合分析后最终选择并购买了50个代表性化合物做进一步生活性测定;活性筛选结果显示有3个小分子化合物(C-12、C-34、C-35)能抑制TNF-α的细胞毒活性;对其中抑制活性较好的C-12进行了深入研究的结果表明:该化合物具有较低的细胞毒性和较强的抑制TNF-α(1μg.L-1)对L929细胞毒性的作用,表现为剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为10μmol.L-1;该化合物能抑制TNF-α诱导的L929细胞凋亡,并呈剂量依赖性。结论通过计算机虚拟筛选并结合生物活性分析,筛选到一种能直接靶向TNF-α,并能中和TNF-α的细胞毒活性的全新的先导化合物。
- 谷岳郭红星纪庆谢印良黄蕊熊冬生杨纯正刘汉芝许元富
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α小分子抑制剂分子对接细胞凋亡受体
- Flt-1胞外Ⅲ区基因克隆、表达研究及其单克隆抗体的制备
- 肿瘤发生侵袭和转移是临床治疗肿瘤失败的主要原因之一，因此，围绕阻断肿瘤转移的研究已成为肿瘤治疗的基础和临床研究的热点之一。近几十年来，大量研究结果已证实肿瘤的增殖、侵袭和转移依赖于肿瘤的血管新生(angiogenesis...
- 谢印良
- 关键词：VEGF受体基因克隆脐静脉内皮细胞血管新生单克隆抗体
- 文献传递
- 拮抗型抗hTNF-α单克隆抗体的筛选和活性鉴定
- 2010年
- 目的制备和筛选拮抗型人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α)单克隆抗体(McAb)并检测其活性,为临床靶向治疗提供理论依据。方法用经典免疫方法获得抗hTNF-αMcAb,经接种于小鼠腹腔后获得腹水,采用硫酸铵沉淀和蛋白G亲和层析法纯化得到纯度>95%的抗hTNF-αMcAb,采用ELISA方法测定效价、抗体亚型和亲和力,MTT法测定抗体阻断hTNF-α对L929细胞的细胞毒作用和筛选拮抗型抗hTNF-αMcAb,流式细胞仪法测定抗体阻断hTNF-α诱导L929细胞凋亡的作用。结果获得1株能稳定分泌抗hTNF-αMcAb的杂交瘤细胞株XB10,分泌的抗体亚型为IgG2b;该抗体能高亲和性与hTNF-α结合,特异性阻断hTNF-α对L929细胞的细胞毒作用和抑制细胞凋亡,并呈一定剂量依赖性。结论成功制备能稳定分泌拮抗型抗hTNF-α的McAb的杂交瘤细胞株,其分泌的抗体对hTNF-α有特异性拮抗作用,为今后研制临床治疗型抗hTNF-α的基因工程抗体奠定了实验基础。
- 黄蕊马莉谷岳谢印良佘鸣邵晓枫熊冬生刘汉芝许元富
- 关键词：人肿瘤坏死因子-Α单克隆抗体拮抗剂
- 新的肿瘤耐药相关基因ERGIC-53的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:研究ERGIC-53基因表达与肿瘤细胞耐药的关系,寻找肿瘤耐药逆转可能的新靶点。方法:采用Northern Blot检测ERGIC-53基因在K562和K562/A02中的表达差异;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测11种肿瘤敏感及耐药细胞系中ERGIC-53基因的表达;设计合成针对ERGIC-53基因的siRNAs,用脂质体法转染K562和K562/A02细胞,用MTT比色法和流式细胞仪检测其干扰耐药细胞中ERGIC-53基因表达后的细胞对阿霉素的敏感性。结果:ERGIC-53在K562/A02细胞中的表达明显高于亲代K562细胞(P<0.05);6种耐药细胞株中ERGIC-53基因表达的平均值约为亲代敏感细胞的2倍。siRNA转染组与对照组相比,K562/A02细胞对阿霉素的敏感性均有不同程度的提高,且在转染后72h时细胞内阿霉素积累接近其亲代敏感细胞水平。结论:ERGIC-53基因与肿瘤细胞耐药相关,明确该基因参与耐药肿瘤细胞表型的形成。
- 肖瑛许元富周圆邵晓枫谢印良谷岳熊冬生杨纯正
- 关键词：RNA干扰抗肿瘤药基因
- Flt-1胞外Ⅲ区蛋白的可溶性表达、纯化及活性测定被引量：1
- 2009年
- 本研究旨在克隆和表达人血管内皮生长因子受体-1胞外Ⅲ区蛋白,并测定其生物学活性。应用RT-PCR法从人脐静脉内皮细胞中克隆Flt-1胞外Ⅲ区基因片段,经测序鉴定后再克隆到原核表达载体pAYZ中,构建出的表达载体pAYZflt-1Ⅲ转化大肠杆菌16C9后,用低磷培养基诱导表达目的蛋白;采用E-tag亲和层析柱纯化目的蛋白;用SDS-PAGE、Western blotting和BCA法对其进行定性、定量检测鉴定;用ELISA、损伤愈合试验和Transwell法检测靶蛋白生物学活性。克隆的Flt-1胞外Ⅲ区基因经测序鉴定正确。所构建的pAflt-1Ⅲ表达载体经低磷培养基诱导后高表达出可溶性Flt-1胞外Ⅲ区蛋白,产量约为1.1mg/L;ELISA结果显示该蛋白可以结合VEGF165,并表现为剂量依赖性,其与配体结合的解离常数Kd为1.180pmol/L。损伤愈合试验和Transwell结果显示该蛋白可以抑制VEGF165(50ng/ml)和bFGF(100ng/mL)诱导的脐静脉内皮细胞的迁移,并呈剂量依赖性。这将为今后开展人flt-1基因Ⅲ区的功能研究及其单抗研制奠定了实验基础。
- 谢印良谷岳黄蕊李雪霞杜雪王金宏熊冬生杨纯正许元富
- 关键词：血管内皮生长因子受体-1血管新生血管内皮生长因子165
- 人诱导性多潜能干细胞系的建立被引量：3
- 2015年
- 背景:诱导性多潜能干细胞与肿瘤干细胞的发生过程极其相似,而且具有的干细胞特性极其接近人胚胎干细胞。因此,研究诱导性多潜能干细胞有利于人们进一步认识并了解人类发育以及肿瘤的发生过程。目的:掌握建立人诱导性多潜能干细胞系的技术,以便为特异性疾病细胞的重编程建立技术平台,从而利用重编程技术研究疾病的发病机制。方法:将含有Oct4、Sox2、Klf-4和c-Myc 4个转录因子的反转录病毒感染人皮肤成纤维细胞(HS27细胞),在人胚胎干细胞培养条件下诱导产生人胚胎干细胞样的克隆。挑取并进一步扩增,通过克隆形态、碱性磷酸酶活性、免疫荧光检测是否有人胚胎干细胞标记物Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4的表达,悬滴法检测HS27细胞来源的克隆形成畸胎瘤的能力和验证向3个胚层的分化能力。结果与结论:经病毒感染诱导产生的胚胎干细胞样克隆呈绿色荧光蛋白阴性,克隆在细胞形态方面与人胚胎干细胞克隆相似,进一步扩增经碱性磷酸酶检测克隆呈阳性,免疫荧光检测克隆表达Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4,并且HS27细胞来源的克隆注入免疫缺陷小鼠体内可以形成畸胎瘤并经苏木精-伊红染色显示具有向三胚层分化能力。实验成功构建了人诱导性多潜能干细胞系,为下一步开展疾病细胞特异性重编程研究奠定了良好的实验基础。
- 师迎旭韩艳秋谢印良杜华
- 关键词：诱导多功能干细胞胚胎干细胞畸胎瘤干细胞人胚胎干细胞OCT4SOX2
- 抗人Flt-1单克隆抗体的制备和活性鉴定
- Flt-1是白血病细胞表面广泛表达的VEGFⅠ型受体,激活后能促进白血病细胞的增殖和迁移.阻断Flt-1与其配体的结合可以增加骨髓中白血病细胞的凋亡.本实验基于表达的重组人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白,成功建立了1株能够稳定分...
- 马莉谢印良刘鹏曹善楠朱海燕熊冬生许元富
- 关键词：基因治疗单克隆抗体活性鉴定
- 文献传递
- 抗人Flt-1单克隆抗体的制备和活性鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:制备小鼠抗人血管内皮生长因子受体-1(Flt-1)的单克隆抗体(mAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以重组人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白为抗原,通过经典的杂交瘤制备和活性筛选方法建立能稳定分泌抗Flt-1蛋白的mAb杂交瘤细胞株。结果:经传统的小鼠腹水型抗体的制备和纯化方法获得了高纯度的抗人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白的mAb。ELISA方法测定出该抗体的免疫球蛋白亚型为IgG1,轻链为κ链。West-ern blot结果显示该抗体能特异性地识别重组人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白,FACS结果表明该抗体能结合到Flt-1阳性的脐静脉内皮细胞和K562/A02细胞表面,并呈现出抗体浓度依赖性。结论:成功建立了1株能够稳定分泌抗重组人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白的mAb细胞株XA12,为今后进一步开展Flt-1及其胞外Ⅲ区蛋白的生物学功能研究以及基因工程抗体研究奠定了基础。
- 谢印良马莉秦立刘鹏曹善楠朱海燕熊冬生许元富
- 关键词：单克隆抗体血管新生细胞因子
- TGF-β信号通路对人多潜能干细胞来源红系祖细胞分化调节机制研究
- 实验目的：人体内红细胞生成(erythropoiesis)是一个受体内02的调节而产生红细胞的复杂过程。在成年人的体内,红细胞是在骨髓中生成的,但是在早期的胚胎中,红细胞是在卵黄囊的中胚层细胞中生成的。随着老龄化社会的到...
- 谢印良
- 关键词：造血祖细胞红细胞生成
- 文献传递
