李环
- 作品数：7 被引量：32H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院疾病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 双歧杆菌乳杆菌三联活菌片治疗诺如病毒性肠炎的前瞻性临床研究被引量：13
- 2017年
- 目的:观察双歧杆菌乳杆菌三联活菌片(金双歧)治疗诺如病毒性肠炎的疗效及对血清炎性因子和肠道菌群的影响。方法:在诺如病毒流行期间,选取于2015年9月至2016年4月在我院诊治的101例诺如病毒感染患者作为研究对象。将其随机分为2组,对照组采用蒙脱石散等对症治疗,试验组在对症治疗的基础上加用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片。在用药前、用药72 h后分别观察患者的临床症状恢复时间、血清炎性因子和肠道菌群情况。结果:在临床症状方面,试验组在退热、止吐和止泻时间上同对照组相比均明显缩短,具有统计学意义(P<0.05)。用药72 h后,试验组的血清IL-6和TNFα均较对照组明显下降(P<0.05),而试验组双歧杆菌等优势菌株的数量明显高于对照组(P均<0.05)。结论:双歧杆菌乳杆菌三联活菌片可有效缩短诺如病毒性肠炎患者的症状恢复时间,减轻炎症反应,改善肠道微生态,值得临床推广。
- 郑岩贺星李环王晓辉闫志辉弓三东李超崔立红
- 关键词：诺如病毒肠炎
- 环介导恒温扩增技术快速检测幽门螺杆菌方法的建立及评价被引量：6
- 2018年
- 目的建立基于DNA环介导恒温核酸扩增技术(loop-mediated isothermal amplification method,LAMP)的快速检测幽门螺杆菌的方法,并对该方法的灵敏度及特异度加以验证。方法以幽门螺杆菌尿素酶B基因(Ure B基因)为靶序列设计5套特异性引物,通过比较各引物的扩增效率筛选出最佳引物组合用以快速检测幽门螺杆菌;收集临床标本,以13C呼气试验为金标准验证LAMP法检测胃液中幽门螺杆菌的灵敏度及特异度。结果幽门螺杆菌反应最佳引物组合为HPUB3,反应均在60 min内完成;应用LAMP法对80例胃液样本中幽门螺杆菌进行检测,其准确率为98.75%,灵敏度为97.06%,特异度为100%,与13C呼气试验结果无统计学差异(P>0.05)。结论 LAMP法检测幽门螺杆菌用时少且灵敏度、特异度均较高。本研究为实现胃镜下同步、无创、快速检测幽门螺杆菌奠定了基础。
- 齐诗蕊陈俊李环栾哲李丛勇王聪袁静孙刚
- 关键词：幽门螺杆菌
- 长双歧杆菌NCC2705纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白的黏附作用研究被引量：2
- 2014年
- 目的验证功能蛋白烯醇化酶(enolase)和Tuf蛋白是否为长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)NCC2705的黏附因子。方法将长双歧杆菌NCC2705与Caco-2细胞共培养,显微镜观察加入纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白前后细胞黏附细菌数的变化并进行统计学分析。将Caco-2细胞、长双歧杆菌NCC2705、致病菌(弗氏志贺菌或伤寒沙门菌)共培养,检测加入纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白前后上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果加入纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白之后,Caco-2细胞黏附细菌数显著降低(P<0.05)。Caco-2细胞与致病菌共培养时,LDH和TNF-α的水平显著增高(P<0.05);Caco-2细胞与长双歧杆菌NCC2705和致病菌共培养时,LDH和TNF-α的水平显著降低(P<0.05),然而加入纯化蛋白烯醇化酶和Tuf蛋白后,LDH和TNF-α的水平又出现显著增高(P<0.05)。结论长双歧杆菌NCC2705可竞争性抑制致病菌对肠上皮细胞的黏附,而烯醇化酶和Tuf蛋白可竞争性抑制长双歧杆菌对肠上皮细胞黏附作用,是双歧杆菌的黏附因子。
- 王思淼魏晓赵向娜李环王雪松袁静
- 关键词：长双歧杆菌NCC2705乳酸脱氢酶肿瘤坏死因子-ΑCACO-2细胞
- 志贺菌属逃避宿主固有免疫系统的机制研究进展
- 2013年
- 肠黏膜上有多重先天免疫防御系统,当发生细菌感染时,可以向免疫系统传递信号,抵御细菌的入侵,而且使被破坏或衰老的上皮细胞再生;然而肠黏膜致病菌具有的多重致病机制可以适应宿主的炎性反应和免疫反应,能使宿主细胞死亡并操控宿主细胞存留的信号通路。这些特性使致病菌能够适应肠黏膜环境,破坏细胞功能和免疫功能,从而使致病菌对宿主的感染更易发生。本文综述了宿主对细菌感染的抵抗机制和志贺菌属逃避宿主固有免疫系统的机制。
- 杨展王思淼崔茜刘威王雪松邹大阳李雪莲李环王玉飞黄留玉袁静
- 关键词：志贺菌属宿主免疫系统细菌感染
- 用环介导等温扩增技术快速检测粪便样本中的沙门菌被引量：7
- 2014年
- 目的：建立快速检测粪便样本中的沙门菌的环介导等温扩增技术（LAMP），并着重在灵敏度和特异性方面对此方法进行评价。方法：利用LAMP针对沙门菌特定基因invA（靶基因）设计的6条特异引物，通过引物特异性识别特定基因invA上的8个独立区域来快速检测沙门菌；LAMP反应过程中会产生白色沉淀焦磷酸镁，故可以通过监测浊度来判定反应结果。结果：实时浊度仪监测反应结果表明，LAMP反应在60～65℃等温条件下50min内完成；如果在反应前添加羟基萘酚兰，蓝色阳性结果很明显区别于紫色阴性结果；LAMP的最低检出限为6．97pg/μL，PCR为69．7pg/μL，LAMP方法的检测灵敏度是PCR的10倍，且具有良好的特异性。结论：LAMP方法用于快速检测沙门菌，具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果肉眼可辨、灵敏度高、特异性强的特点，对非沙门菌菌株的结果呈阴性，表明引物设计有很好的特异性。对粪便样本进行检测，发现具有同样的敏感性和特异性。这表明LAMP法是潜在的和有价值的在粪便样本中直接检测沙门菌的方法，具有快速、简便、低成本的特点。LAMP法适用于快速临床诊断。
- 刘威李环邹大阳杨展赵向娜李雪莲崔茜王思淼黄思妺闫夏贝魏晓王雪松尹志涛黄留玉袁静
- 关键词：沙门菌环介导等温扩增技术
- GⅡ．4型诺如病毒VP1蛋白基因在毕赤酵母中的分泌表达
- 2017年
- 目的提取GⅡ.4型诺如病毒（norovirus，NoV）RNA构建重组表达载体pPIC9K-VP1，并实现NoV-VP1蛋白基因在毕赤酵母（Pichia pastoris）中的高效分泌表达。方法将GⅡ.4型NoV-VP1蛋白基因插入质粒pPIC9K，得到重组表达载体pPIC9K-VP1，再将酶切后的线性化重组表达载体电击转化进P.pastoris GS115。在发酵的最初阶段分批地向培养基内加入甘油，在甘油耗尽后，通过加入甲醇诱导病毒样颗粒（virus-like particles，VLPs）表达。将摇瓶培养基内的上清液进行超滤浓缩，用透析法脱盐，通过离子交换色谱法纯化，并通过SDS-PAGE、TEM以及Western blot等方法鉴定表达颗粒。结果目的基因NoV-VP1成功克隆入表达载体pPIC9K中，经过发酵后VLPs蛋白分泌至上清液中。在SDS-PAGE凝胶上显示为表达产物VLPs所对应的62 000相对分子质量条带，使用抗NoV血清Western blot也于62 000相对分子质量处显示了阳性条带，确定VP1蛋白的完整表达。发酵上清液内的蛋白质含量为1 g/L，纯化后约600 mg/L。使用透射电子显微镜（TEM）观察产物颗粒的大小及形态特征，证实其为平均直径约40 nm的NoV-VLPs。结论该研究阐明了一种利用P.pastoris表达系统高效生产自我组装的NoV-VLPs的方法，这些生产和纯化系统可以用于大规模生产NoV-VLPs，为研发NoV疫苗奠定了基础。
- 郑岩贺星李环王晓辉闫志辉弓三东李超崔立红
- 关键词：诺如病毒毕赤酵母分泌表达
- 基于颜色判定的DNA环介导恒温扩增法快速检测金黄色葡萄球菌被引量：4
- 2013年
- 目的建立基于颜色判定的DNA环介导恒温核酸扩增法(loop-mediated isothermal amplification of DNA,LAMP)快速检测金黄色葡萄球菌(SAU)技术。方法利用LAMP法针对SAU特异基因nuc基因设计7套引物,通过对7套引物扩增效率进行比较得到最佳引物组合来快速检测SAU,采用两种结果判断方法在50 min内完成反应。结果 LAMP方法检测核酸的最低浓度为7.16 pg/μl,灵敏度为PCR法的10倍(PCR法为71.6 pg/μl),同时采用22种同源或相似菌种进行特异性检测,结果表明具有良好的特异性。结论 LAMP方法检测过程简单,实验装置简便,反应结果肉眼可视化辨别,灵敏度高,特异性强,特别适合基层防疫与检疫部门对SAU的快速检测。
- 李环刘威邹大阳杨展赵向娜李雪莲崔茜王思淼魏晓王雪松黄留玉袁静
- 关键词：金黄色葡萄球菌
