王旭平
- 作品数：9 被引量：41H指数：4
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- 不同炎性标志物对冠状动脉病变的预测价值被引量：15
- 2010年
- 目的探讨可溶性CD40L、单核细胞趋化蛋白1、白细胞介素8和白细胞介素6等炎性标志物对冠状动脉病变严重程度和稳定性的预测价值。方法应用流式细胞术检测129例冠心病患者血浆可溶性CD40L、单核细胞趋化蛋白1、白细胞介素8和白细胞介素6水平,计算各类型冠心病患者冠状动脉病变的Gensini积分,分析上述炎性标志物与Gensini积分的相关关系以及对急性冠状动脉综合征的预测价值。结果四种炎性标志物血浆浓度在冠心病组均显著高于对照组(P均<0.01),其中可溶性CD40L、单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素6的浓度在急性心肌梗死组高于稳定型心绞痛组(P=0.001、P=0.009和P=0.011)。血浆单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素6水平与冠状动脉Gensini积分呈正相关关系(r=0.322,P<0.00001;r=0.203,P=0.026);多因素Logistic回归分析显示白细胞介素6对急性冠状动脉综合征有预测价值(OR=1.275,P=0.037)。结论血浆可溶性CD40L、单核细胞趋化蛋白1、白细胞介素8和白细胞介素6等炎性标志物与冠状动脉粥样硬化病变有关;血浆单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素6能反映冠状动脉病变的严重程度;白细胞介素6对预测冠状动脉病变不稳定的冠心病急性冠状动脉综合征有一定价值。
- 刘淼纪求尚张运王旭平王荣李贵双陈玉国李继福
- 关键词：可溶性CD40L单核细胞趋化蛋白1白细胞介素8GENSINI积分
- 兔外周血内皮祖细胞培养及HTK基因体外修饰被引量：6
- 2007年
- 目的探讨兔外周血来源的内皮祖细胞(EPCs)经体外基因修饰后能否成功表达目的基因。方法分离兔外周血单个核细胞进行定向培养,观察细胞摄取DiI-Ac-LDL的能力,免疫荧光法检测EPCs的细胞表面标记。同时PCR扩增人组织激肽释放酶(HTK)基因,构建以GFP为报告基因的重组真核表达载体,转染体外培养的EPCs后,荧光显微镜下观察HTK-EGFP融合蛋白的表达,通过RT-PCR与ELISA方法检测HTK的表达水平。结果细胞培养5～6d开始出现成簇的短梭形贴壁细胞,15d后形成鹅卵石样细胞层,传代后的细胞能摄取DiI-Ac-LDL,免疫荧光显示vWF和CD133+;pEGFP-HTK重组质粒在EPCs中可以稳定表达,表达的融合蛋白具有HTK和EGFP的双重活性。结论HTK基因修饰兔外周血EPCs对于血管病的治疗可能具有良好的前景。
- 刘春喜李大庆张运姜虹王荣王旭平
- 关键词：激肽释放酶内皮祖细胞动脉损伤血管病
- HDM通过肺泡巨噬细胞TLR4诱导哮喘小鼠气道炎症的机制研究被引量：2
- 2009年
- 目的:研究HDM通过肺泡巨噬细胞(AM)Toll样受体4(TLR4)的高表达及诱导AM的活化,探讨其对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为哮喘模型组(OVA)A,HDM处理组(HDM+OVA)B,对照组(生理盐水)C。用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立小鼠哮喘模型;HE染色观察小鼠气道及肺组织病理变化;光学显微镜下观察小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的含量,实时定量PCR法测定AM的TLR4的表达,流式细胞技术(FCM)检测AM的CD80、CD86的表达。结果:与A组相比,B组BALF上清中IL-4、IL-5和IL-13的水平显著增高(P<0.05),而IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05),与A组相比,AM的TLR4mRNA表达明显增高(P<0.05),CD80的表达差异无统计学意义,CD86的表达水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HDM通过AM的TLR4的高表达诱导AM的活化,加重哮喘的气道炎症。
- 郝俊青李鸿佳李艳丽王荣姜虹王旭平毕文祥董亮
- 关键词：肺泡巨噬细胞HDMTOLL样受体4支气管哮喘
- 骨髓间充质干细胞对INS-1细胞凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对过氧化氢(H2O2)诱导胰岛β细胞凋亡的影响。方法以H2O2作用于大鼠胰岛瘤细胞INS-1细胞构建凋亡模型,通过Transwell装置实现INS-1细胞与BMSCs共培养。实验分为4组:单独INS-1细胞培养组(A组);INS-1+H2O2处理组(B组);BMSC+INS-1Transwell共培养组(C组);BMSC+INS-1+H2O2Transwell共培养组(D组)。MTT法检测细胞存活率,Annexin-V/PI染色流式细胞技术检测细胞凋亡水平。结果 H2O2显著降低INS-1细胞存活率,引起INS-1细胞凋亡,且呈剂量依赖性,通过Tran-swell与BMSCs共培养后,由H2O2诱导的INS-1凋亡细胞比例下降,与单独H2O2刺激组相比,细胞凋亡率下降了约26.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BMSCs通过Transwell共培养显著抑制H2O2诱导的INS-1细胞凋亡,其作用机制可能与BMSCs旁分泌作用有关,为进一步利用BMSCs防治糖尿病提供了理论依据。
- 孙慧环刘福强龚蕾肖芳侯新国孙宇宋君陈丽王旭平
- 关键词：胰岛Β细胞凋亡骨髓间充质干细胞共培养
- TWEAK通过NF-κB途径促进大鼠成纤维细胞表达基质金属蛋白酶9被引量：2
- 2011年
- 目的研究肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)影响大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖和胶原合成的作用机制。方法采用胰酶消化法培养新生Wistar大鼠CFs,加入重组人TWEAK(rhTWEAK)和NF-κB抑制剂PDTC干预,qRT-PCR检测核转录因子NF-κB和金属蛋白酶9(MMP9)mRNA,Western blot检测NF-κB和MMP9蛋白表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖。结果 rhTWEAK作用后NF-κB和MMP9 mRNA表达上调,同时蛋白表达明显增加,PDTC可抑制MMP9蛋白表达和细胞增殖。结论 TWEAK可通过NF-κB途径促进大鼠心肌成纤维细胞表达MMP9。
- 王德金任满意陈慧娜王旭平隋树建
- 关键词：肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂心肌成纤维细胞NF-ΚB基质金属蛋白酶9
- TWEAK促进大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成被引量：5
- 2011年
- 目的探讨肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)对大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖和胶原合成的影响。方法用胰酶消化法培养新生Wistar大鼠CFs,加入重组人TWEAK(rhTWEAK)干预48 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖,qRT-PCR检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA,Western blot检测Ⅰ型胶原蛋白表达。结果 rhTWEAK作用后CFs的细胞数目明显增加,Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA表达上调,同时Ⅰ型胶原蛋白表达显著增强。结论 TWEAK具有促进大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的作用。
- 陈慧娜任满意魏峰涛卢淑霞杨兆瑞徐冬玲王旭平隋树建
- 关键词：肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂心肌成纤维细胞增殖胶原合成
- SIRT3 siRNA对ox-LDL刺激的人主动脉内皮细胞ICAM-1、E-selectin表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨SIRT3基因对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激的人主动脉内皮细胞(HAEC)炎性因子细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、E-选择素(E-selectin)表达的影响。方法将生长状态良好的细胞随机分为空白对照组、转染试剂对照组、阴性对照组及SIRT3 siRNA(1、2、3、4)组。筛选出最佳序列后,细胞分为空白对照组、siRNA组、(20、30、40μg/mL)ox-LDL组、siRNA+(20、30、40μg/mL)ox-LDL组。转染24 h、ox-LDL刺激6 h。qRT-PCR检测SIRT3 mRNA水平,Western blotting检测SIRT3蛋白表达,流式细胞术检测E-selectin、ICAM-1抗体的平均荧光强度值(MFI)。结果 SIRT3 siRNA2序列在mRNA水平的干扰效率为88.62%,蛋白水平为80.37%,干扰效果明显。与空白对照组相比,ox-LDL各组的SIRT3 mRNA相对表达量差异有统计学意义(P均<0.05);随ox-LDL浓度增加,SIRT3 mRNA相对表达量逐渐降低(P均<0.05)。与siRNA组相比,siRNA+ox-LDL各组ICAM-1、E-selectin的MFI差异有统计学意义(P均<0.05);随ox-LDL浓度增加,MFI逐渐升高(P均<0.05)。与空白对照组相比,siRNA组ICAM-1、E-selectin的MFI无统计学差异(P均>0.05)。结论 SIRT3基因与ox-LDL刺激的人主动脉内皮细胞ICAM-1、E-selectin表达升高相关,可能参与并调控动脉内皮细胞损伤的炎症反应。
- 丁玲巩会平杜贻萌王欣张岩王旭平鹿庆华
- 关键词：细胞间黏附分子-1E-选择素氧化型低密度脂蛋白
- 半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C)对于自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化的影响。方法培养16周龄的自发性高血压大鼠心肌成纤维细胞(CFs),将构建成功含cystatin C的腺病毒载体转染SHR的CFs及心室肌中,随机分为空白对照组、Ad-GFP组和Ad-CysC组。通过w estern blot检测cystatin C在CFs和SHR心室肌中的表达情况。用实时定量PCR测定CFs的Ⅰ、Ⅲ胶原mRNA水平。行超声心动检查评定转染后4周SHR的心脏结构和心功能。通过Masson染色分析SHR的心肌纤维化程度。结果 Cystatin C在Ad-CysC组CFs和心室肌中表达较空白对照组和Ad-GFP组明显增强(P均<0.05);与空白对照组和Ad-GFP组相比,Ad-CysC组CFs中Ⅰ、Ⅲ胶原mRNA表达显著增加(P均<0.05);Ad-CysC组LVMI、IVSD、LVPWD、CVF和PVCA明显高于空白对照组和Ad-GFP组,LVEDD较其余两组明显减小(P均<0.05)。上述指标在空白对照组和Ad-GFP组中差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Cystatin C使SHR成纤维细胞胶原合成增多,具有促进心肌纤维化进程的作用。
- 闫莉巩会萍杜贻萌王欣徐冬玲魏峰涛王旭平鹿庆华
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶抑制剂C自发性高血压大鼠心肌成纤维细胞
- TWEAK通过P38MAPK途径促进大鼠心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原和MMP-1的表达被引量：8
- 2012年
- 目的探讨肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)影响心肌成纤维细胞(CFs)中Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶1(MMP-1)表达的作用机制。方法取Wistar新生大鼠CFs,加入重组人TWEAK(rhTWEAK)及P38MAPK抑制剂(SB203580)干预,将实验分为①对照组:不加干预因素;②TWEAK组:加入100 ng/mLTWEAK;③TWEAK+SB203580组:加入100 ng/mLTWEAK+SB203580。采用MTT法检测CFs增殖;Westernblot法检测Ⅰ型胶原蛋白及磷酸化P38MAPK(P-P38MAPK)蛋白表达;qRT-PCR法检测Ⅰ型胶原mRNA表达;ELISA法检测CFs细胞培养液中MMP-1的浓度。结果加入TWEAK干预后,促进了CFs增殖,Ⅰ型胶原蛋白及P-P38MAPK蛋白表达上调,Ⅰ型胶原mRNA和MMP-1表达上调。加入SB203580可抑制CFs增殖,部分抑制Ⅰ型胶原mRNA、Ⅰ型胶原蛋白、P-P38MAPK蛋白及MMP-1的表达。结论 TWEAK可通过P38MAPK途径促进CFs表达Ⅰ型胶原和MMP-1。
- 王其磊任满意王德金徐冬玲杜贻萌王旭平隋树建
- 关键词：肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂心肌成纤维细胞基质金属蛋白酶1
