高路
- 作品数：17 被引量：39H指数：3
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 热休克蛋白22减轻转化生长因子β1诱导的成纤维细胞激活被引量：3
- 2020年
- 目的探讨热休克蛋白22(Hsp22)对TGFβ1刺激的心脏成纤维细胞激活的影响,以及其可能的分子机制。方法分离培养小鼠成体心脏成纤维细胞,采用TGFβ1刺激诱导成纤维细胞激活。采用不同浓度的Hsp22(1,2,4,8,10μg/mL)孵育成纤维细胞24 h,观察其对心脏成纤维细胞活化、增殖和分泌的影响;采用CCK8试剂盒检测细胞增殖活性;采用RT-PCR检测促纤维化因子的转录水平;采用免疫荧光染色检测a-SMA蛋白的表达;采用免疫印迹检测可能的信号蛋白的改变。结果CCK8结果显示,TGFβ1刺激后成纤维细胞增殖明显增加(P<0.05);TGFβ1刺激后成纤维细胞α-SMA表达增多(P<0.05),纤维化相关的基因转录明显增加(P<0.05)。1,2,4,8,10μg/mL的Hsp22均能够显著抑制成纤维细胞的增殖(P<0.05)。8μg/mL和10μg/mL的Hsp22能够抑制α-SMA表达(P<0.05),减少纤维化相关的基因的转录水平(P<0.05)。免疫印迹结果显示TGFβ1刺激后WNT和β-catenin激活水平增加,GSK3β的磷酸化增高,β-catenin的核转位增多(P<0.05);10μg/mL的Hsp22处理能够抑制WNT和β-catenin的激活水平,减少GSK3β的磷酸化表达,减少β-catenin的核转位(P<0.05),减少smad2和smad3的磷酸化水平(P<0.05)。结论Hsp22可以通过抑制WNT/β-catenin信号通路阻断TGFβ1诱导的成纤维细胞活化、增殖和分泌。
- 谷玉雷裴辉徐东姜毓敏张娈娈高路肖莉丽
- 关键词：成纤维细胞心肌纤维化WNTΒ-CATENIN转化生长因子
- miR-22对脂多糖诱导的心肌损伤的研究被引量：2
- 2022年
- 目的探讨miR-22对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞损伤的保护作用及可能机制。方法采用LPS刺激H9c2大鼠心肌细胞诱导心肌细胞损伤模型。采用miR-22模拟物转染心肌细胞,将细胞随机分为4组,即对照组、LPS组、miR-22+LPS组和miR-NC+LPS组。RT-PCR法检测细胞中miR-22表达;MTT法检测细胞活性;TUNEL染色检测细胞凋亡;免疫印迹法检测相关蛋白的表达;通过双荧光素酶报告基因实验证实miR-22对靶基因的调控作用。结果miR-22的表达在LPS组显著低于对照组;MTT试验结果显示LPS组细胞活性明显低于对照组,miR-22+LPS组细胞活性高于LPS组;TUNEL染色显示LPS组细胞凋亡数量明显高于对照组,miR-22+LPS组细胞凋亡数量低于LPS组。与对照组比较,LPS组Bcl-2/Bax比值显著下降;与LPS组比较,miR-22+LPS组Bcl-2/Bax比值明显升高。RT-PCR和Western blot法检测结果表明,上调miR-22表达后,HMGB1蛋白表达和mRNA水平明显降低。双荧光素酶报告实验显示miR-22靶向调控HMGB1的mRNA的3′非编码区(3′UTR)。结论miR-22可能通过负向调控HMGB1的表达减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。
- 姚瑞李亚彭梁翠肖莉丽张彦周高路
- 关键词：脂多糖心肌细胞凋亡HMGB1
- 利拉鲁肽通过NRF2改善高糖诱导的内皮细胞损伤
- 2024年
- 目的探讨利拉鲁肽对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的作用及机制。方法培养脐静脉内皮细胞(HUVECs),将细胞分为4组:对照组、高糖刺激组(HG组)、利拉鲁肽组、利拉鲁肽+HG组。采用ELISA法检测各组炎症细胞因子的分泌,采用试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)的水平;采用试剂盒检测各组超氧化物歧化酶2(SOD2)和Gpx4的活性以及丙二醛(MDA)的水平;采用试剂盒检测一氧化氮(NO)含量;采用免疫印迹和免疫荧光染色法检测NRF2的核转位情况。结果HG组细胞肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白细胞介素(IL-1)和IL-6的水平相比对照组升高;细胞内ROS的水平增加,MDA水平增加,SOD2和Gpx4的活性减少;NO的含量减少;NRF2的核转位也明显减少。与HG组的细胞相比,利拉鲁肽+HG组细胞TNF⁃α、IL-1、IL-6的水平降低,细胞内的ROS水平降低,MDA水平降低,SOD2和Gpx4的活性增加;NO的含量增加;NRF2的核转位也明显增加。结论利拉鲁肽通过增加NRF2的核转位抑制高糖诱导的内皮细胞损伤。
- 孙云龙孟哲王喜甲高路
- 关键词：内皮细胞高血糖利拉鲁肽NF-E2相关因子2
- 溶酶体组织蛋白酶B增加自噬保护缺氧诱导的心脏微血管内皮细胞损伤被引量：3
- 2022年
- 目的探讨CTSB是否参与缺氧诱导的心脏微血管内皮细胞损伤。方法采用缺氧诱导内皮细胞损伤模型;分离CTSB基因敲除小鼠心脏微血管内皮细胞,采用腺病毒过表达CTSB,采用巴弗洛霉素阻断细胞自噬;采用ELISA法检测炎症因子的释放水平;采用TUNEL染色法检测细胞凋亡数量;采用caspase-3试剂盒检测细胞caspase-3的活性;细胞感染LC3-GFP-mCherry双标病毒,检测细胞自噬流的水平。结果CTSB基因敲除可明显加重缺氧诱导的内皮细胞炎症、凋亡,增加细胞自噬。CTSB过表达可减轻缺氧诱导的内皮细胞炎症、凋亡,增加细胞自噬。但是巴弗洛霉素处理可明显抵消CTSB过表达对细胞炎症、凋亡的抑制作用和对细胞自噬的保护作用。结论 CTSB基因敲除加重缺氧诱导的内皮细胞炎症和凋亡,而CTSB基因过表达减轻缺氧诱导的内皮细胞损伤。CTSB通过维持内皮细胞正常的自噬降解发挥作用。
- 高路姚瑞李亚彭梁翠肖莉丽张彦周
- 关键词：内皮细胞损伤自噬炎症
- CTRP9对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞活化和增殖的影响被引量：7
- 2020年
- 目的:探讨CTRP9对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠心肌成纤维细胞活化、增殖的影响。方法:分离培养原代大鼠心肌成纤维细胞,将其分为对照组、AngⅡ(1μmol/L)组和不同浓度(10、25、50、100、200 mg/L)CTRP9组,48 h后采用CCK-8法检测细胞增殖率。细胞分为对照组、AngⅡ(1μmol/L)组、50和200 mg/L CTRP9组,48 h后采用α-SMA染色观察成纤维细胞活化情况,qRT-PCR法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白、结缔组织生长因子mRNA的表达,Western blot法检测AMPKa、P70和mTOR蛋白的磷酸化情况。采用AMPKa抑制剂复合物C处理细胞,将细胞分为对照组、AngⅡ(1μmol/L)组、CTRP9+复合物C(10μmol/L)组和CTRP9(200 mg/L)组,48 h后重复上述检测。结果:AngⅡ组心肌成纤维细胞增殖率高于对照组,各CTRP9组细胞增殖率低于AngⅡ组(P<0.05)。AngⅡ组细胞α-SMA表达高于对照组,50和200 mg/L CTRP9组α-SMA表达低于AngⅡ组。AngⅡ组细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白和结缔组织生长因子mRNA的表达高于对照组,50和200 mg/L CTRP9组细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白和结缔组织生长因子mRNA的表达低于AngⅡ组(P<0.05)。AngⅡ组细胞AMPKa蛋白磷酸化水平低于对照组,P70和mTOR蛋白磷酸化水平高于对照组;200 mg/L CTRP9组AMPKa蛋白磷酸化水平高于AngⅡ组,P70和mTOR蛋白磷酸化水平低于AngⅡ组(P<0.05)。结论:CTRP9通过激活AMPKa信号通路抑制AngⅡ诱导的大鼠心肌成纤维细胞活化、增殖功能。
- 梁翠高路姚瑞李亚彭李鹏程刘源张殿红王铮张彦周
- 关键词：心肌成纤维细胞心肌纤维化
- CRAMP对小鼠心脏成纤维细胞激活、增殖和胶原分泌功能的影响
- 2022年
- 目的:探讨CRAMP对小鼠心脏成纤维细胞激活、增殖和胶原分泌功能的影响。方法:分离培养小鼠心脏成纤维细胞。第一部分实验将细胞分为3组:对照组、转化生长因子β1(TGF-β1)组(10 mg/L 48 h)、CRAMP组(TGF-β1处理后给予CRAMP 0.5 mg/L 24 h),采用MTT法检测细胞增殖活性,采用免疫荧光染色检测α-SMA、Ⅲ型胶原和PCNA蛋白表达水平,采用RT-PCR检测Ⅲ型胶原和α-SMA mRNA表达水平,采用Western blot检测Smad信号通路蛋白表达水平。第二部分实验将细胞分为3组:TGF-β1组(10 mg/L 48 h)、SIS3组(TGF-β1处理后给予SIS310μmol/L 24 h)、CRAMP+SIS3组(TGF-β1处理后给予CRAMP 0.5 mg/L和SIS310μmol/L 24 h),采用免疫荧光染色和RT-PCR检测Ⅲ型胶原和α-SMA蛋白及mRNA表达水平。结果:TGF-β1组成纤维细胞增殖活性,PCNA、Ⅲ型胶原、α-SMA蛋白表达水平,Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA表达水平,p-Smad2、p-Smad3和Smad4蛋白表达水平均高于对照组;而CRAMP组上述指标均低于TGF-β1组(P<0.05)。SIS3组、CRAMP+SIS3组细胞Ⅲ型胶原、α-SMA蛋白及mRNA表达水平均低于TGF-β1组(P<0.05)。结论:CRAMP可通过拮抗Smad3信号通路抑制小鼠心脏成纤维细胞的激活、增殖和胶原分泌。
- 董伟罗强高路肖莉丽
- 关键词：心肌纤维化心脏成纤维细胞SMAD
- PBL教学法在心内科住院医师规范化培训中的应用
- 2024年
- 目的探讨以问题为基础的教学法(problem-based learning,PBL)在心内科住院医师规范化培训中的应用效果。方法选择2020年9月-2022年7月在郑州大学第一附属医院心内科接受培训的100名住培医师,采用随机数字表法分为PBL组和对照组,每组50名。PBL组采用PBL教学法,对照组采用传统授课教学法。采用出科考核及学习积极主动性量表评估2组住培医师的教学成果。结果PBL组现病史、家族史询问不合格率低于对照组(P<0.05);PBL组视诊、触诊、叩诊、听诊不合格率均低于对照组(P<0.05);胸腔穿刺考核中PBL组准备工作、穿刺结果不合格率均低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。PBL组学习积极主动性评分总分为(80.04±12.40)分,高于对照组的(62.50±5.81)分(P<0.05),差异具有统计学意义。结论在心内科住院医师规范化培训中应用PBL教学法有助于提高住培医师的临床实践能力和主观能动性。
- 王小芳肖莉丽上官佳红张文静高路
- 关键词：PBL教学法心内科教学病史采集
- 脂肪因子CTRP9对异丙肾上腺素诱导小鼠心肌重构的影响被引量：12
- 2018年
- 目的本试验旨在探讨CTRP9对ISO诱导的心肌重构的影响。方法雄性C57BL/6J小鼠分为4组（n=10），5mg／kg每12小时1次的方式和剂量皮下注射ISO12d，同时以200μg·kg^-1·d^-1皮下注射的方式给予人重组CTRP912d。免疫组化染色CTRP9的表达和细胞定位；超声心动图比较各组小鼠心室壁厚度以及心功能，评价模型组小鼠心脏结构和心功能；取心脏后比较各组小鼠心脏质量／体质量、肺脏质量／体质量、心脏质量／胫骨长；HE染色比较心肌细胞横截面积；RT-PCR检测比较各组小鼠心肌肥厚标志物和纤维化标志物的转录水平；免疫印迹评价分子蛋白的改变。结果免疫组化结果显示：模型组小鼠CTRP9的表达明显下调（P〈0．05）；超声结果显示：模型组小鼠左室舒张期内径（LVDd，4．00mm比4．67mm）、左室收缩期内径（LVDs，2．60mm比3．12mm）均大于对照组（P〈0．05），而左室射血分数（LVEF，73％比55％）以及短轴缩短率（FS，39％比21％）均小于对照组（P〈0．05）；模型组小鼠心脏质量／体质量、肺脏质量／体质量、心脏质量／胫骨长以及心肌细胞横截面积明显高于对照组（P〈0．05）；RT-PCR结果显示模型组小鼠心肌肥厚标志物（ANP、BNP以及β-MHC）明显增高（P〈0．05）；PSR染色结果显示模型组小鼠心脏纤维化程度加重，且纤维化标志物（Ⅰ型胶原，Ⅲ型胶原和α平滑肌动蛋白）的转录水平均高于对照组（P〈0．05）；而CTRP9处理后心肌肥厚程度明显降低，心脏纤维化程度减轻，心功能明显改善（P〈0．05）。免疫印迹结果显示：模型组小鼠心脏iNOS的表达未见改变，而nNOS和eNOS的表达有所增加，但是CTRP9进一步增加eNOS和nNOS的表达，从而增加一氧化氮的合成。结论CTRP9通过增加eNOS和nNOS来源的一氧化氮保护ISO诱导的心肌重构。
- 梁翠刘源高路刘宇宙姚瑞李亚彭吴磊明张彦周
- 关键词：异丙肾上腺素心肌重构脂肪因子一氧化氮合酶
- 热休克蛋白22减轻苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥大反应被引量：1
- 2019年
- 目的探讨热休克蛋白22(heat shock protein 22, Hsp22)对苯肾上腺素(phenylephrine, PE)诱导的心肌细胞肥大反应的作用。方法在郑州大学附属第一医院心血管实验室分离培养原代大鼠心肌细胞,将培养的心肌细胞随机分为对照组、刺激组、1 μg/mL Hsp22的处理组、10 μg/mL Hsp22的处理组;采用PE刺激诱导心肌细胞肥大反应,用不同浓度的人重组Hsp22孵育心肌细胞,对每组细胞通过MTT法检测细胞存活率;通过α-肌动蛋白免疫荧光检测心肌细胞面积;采用DCFH-DA荧光探针检测活性氧的水平;TUNEL染色检测细胞凋亡数量;应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肥厚标志物的转录;免疫印迹检测信号通路的改变。使用SPSS 13.0进行统计分析,计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示,所有数据均使用单因素方差分析检测各组间的差异,组间两两比较采用LSD-t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果不同浓度的Hsp22对心肌细胞活性没有影响(F=6.622,P>0.05);PE刺激明显增加心肌细胞面积(t=16.01,P<0.05),增加心肌肥厚标志物心房利钠肽(t=44.84,P<0.05),B型利钠肽(BNP)(t=16.85,P<0.05),肌球蛋白重链β(β-MHC)(t=41.53,P<0.05)的转录水平,增加心肌细胞氧化应激水平(t=43.61,P<0.05),增加心肌细胞凋亡数量(t=60.82,P<0.05)。不同浓度的Hsp22处理明显减小心肌细胞面积[PE+1 μg/mL Hsp22组:(3 872±212)μm2,t=4.018,P<0.05;PE+10 μg/mL Hsp22组:(2 563±287)μm2,t=10.80,P<0.05];减少肥厚标志物ANP、BNP、β-MHC的转录水平(均P<0.05),减少心肌细胞氧化应激水平(均P<0.05);减少心肌细胞凋亡数量[PE+1 μg/mL Hsp22组:(21.7±1.2)%,t=20.02,P<0.05;PE+10 μg/mL Hsp22组:(19.8±1.6)%,t=24.70,P<0.05]。免疫印迹结果显示,PE刺激组AMPKα的磷酸化减少(t=7.75,P<0.05),mTOR的磷酸化增加(t=25.22,P<0.05);不同浓度的Hsp22增加AMPKα的磷酸化(均P<0.05),减少mTOR的磷酸化(均P<0.05)。结论Hsp22通过激活AMPKα抑制心肌细胞肥大反应,H
- 肖莉丽谷玉雷高路陈君王小芳李凌
- 关键词：苯肾上腺素心肌细胞肥大氧化应激
- 冠状动脉慢性完全闭塞病变经皮介入治疗术后射血分数改善型心力衰竭的预测因素及预后被引量：1
- 2023年
- 目的:探究冠状动脉(冠脉)慢性完全闭塞病变经皮介入治疗(CTO-PCI)术后射血分数改善型心力衰竭(心衰)的影响因素及其长期预后。方法:回顾性入选CTO-PCI术前左室射血分数(LVEF)≤40%的心衰患者229例,根据术后1年LVEF的变化分为射血分数改善型心衰(HFimpEF)组(71例)和非射血分数改善型心衰(non-HFimpEF)组(158例)。采用logistic回归筛选CTO-PCI术后HFimpEF的影响因素;使用Cox回归探究主要不良心血管事件(MACE)的影响因素,并通过Kaplan-Meier生存分析比较两组的预后差异,同时基于倾向性评分匹配(PSM)进行敏感性分析。结果:Logistic回归结果示,年龄<60岁、左室舒张末期内径(LVEDD)<60 mm、J-CTO评分<3以及应用β受体阻滞剂和钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂(SGLT2i)与CTO-PCI术后射血分数改善相关(P<0.05)。PSM前后的Cox回归结果均表明,HFimpEF是患者CTO-PCI术后发生MACE的独立保护因素(P<0.01)。PSM前后的Kaplan-Meier曲线显示HFimpEF组的无MACE生存率高于non-HFimpEF组(P<0.01)。结论:年龄<60岁、LVEDD<60 mm、J-CTO评分<3以及应用β受体阻滞剂和SGLT2i是CTO-PCI术后HFimpEF的独立影响因素,HFimpEF患者拥有更好的长期预后。
- 杜家琦杨露露高路张彦周
- 关键词：慢性完全闭塞病变预后
