沈洁
- 作品数：34 被引量：73H指数：4
- 供职机构：大连医科大学基础医学院形态学实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部高等学校骨干教师资助计划教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 依赖凝集素的人单核细胞介导的U937和Raji细胞系细胞程序性死亡被引量：1
- 1995年
- 用ＤＮＡ电泳和荧光染色法流式细胞仪分析，发现在依赖美洲商陆凝集素（ＰＷＭ）的单核细胞介导的细胞毒活性中，白血病靶细胞Ｕ９３７和Ｒａｊｉ细胞均呈现以ＤＮＡ断裂为特征的细胞程序性死亡。通过细胞毒试验和荧光染色分析表明：抗肿瘤坏死因子α的单克隆抗体和乙酰基葡萄糖胺单糖可分别阻断单核细胞所诱导的Ｕ９３７细胞或Ｒａｊｉ细胞死亡和ＤＮＡ断裂。试验中还发现ＰＷＭ同时可与单核细胞和这两种肿瘤细胞相结合。提示凝集素在促进效靶细胞相互接近，进而导致肿瘤细胞发生程序性死亡方面具有重要作用。
- 董海东邢嵘沈洁钱振超
- 关键词：单核细胞凝集素细胞程序化死亡
- Hca-F抗原-HSP70BCG疫苗免疫对小鼠肝癌Hca-F的免疫保护效应
- 热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)不仅是参与蛋白质装配、折叠转运与修复的重要分子伴侣与应激蛋白,还具有提呈抗原和活化树突状细胞等多种免疫学功能。从肿瘤细胞中提取的HSP-肽复合物可作为肿瘤抗原诱...
- 施广霞高志红郭连英沈洁钱振超
- 文献传递
- β-榄香烯综合瘤苗主动免疫治疗临床试验研究-40例癌症患者的疗效分析被引量：1
- 1995年
- 在过去瘤苗主动免疫治疗实验研究和初步临床试验的基础上，进一步扩大临床试验，进行应用评价。用本室申报的发明专利——以β-榄香烯为主的复合因素制备的自体瘤苗或异体瘤苗主动免疫疗法，治疗40例直肠癌，结肠癌及胃癌等术后患者,制备瘤苗的肿瘤组织取自癌症患者术后切下之肿瘤标本，在无菌条件下选取新鲜肿瘤组织，
- 金成刚沈洁刘金友邢嵘钱振超张可薛玉门邓兆滨王晓辉庄桂英
- 关键词：瘤苗Β-榄香烯主动免疫治疗癌症患者肿瘤组织无菌
- 体外构建的H_(TA)-HSP70_(BCG)冲激的树突状细胞疫苗的抗肿瘤作用
- 2007年
- 目的观察体外构建的榄香烯复合瘤苗抗原-卡介苗热休克蛋白70复合物(HTA-HSP70BCG)诱导的树突状细胞疫苗的抗肿瘤效应。方法来源于小鼠的肝癌Hca-F榄香烯复合疫苗的抗原(HTA)与卡介苗来源的HSP70(HSP70BCG)在体外构建成HTA-HSP70BCG复合物,用GM-CSF和IL-4诱导树突状细胞(DCs),分别用HTA-HSP70BCG、HTA和HSP70BCG对其冲激。用MTT法检测该DCs刺激的全脾细胞的增殖活性及被刺激的脾细胞的细胞毒活性。用流式细胞仪检测DCs表面CD86和CD40的表达。结果体外构建HTA-HSP70BCG可以诱导DCs成熟,表现为DCs表达CD86和CD40上调,该DCs可以刺激全脾细胞增殖并使其产生特异性杀瘤活性,其强度明显大于HTA。结论体外构建HTA-HSP70BCG复合物可以诱导DCs成熟,该DCs可以激活脾细胞产生较强的特异性抗瘤效应。
- 孙光郭连英沈洁刘丹丹施广霞钱振超
- 关键词：热休克蛋白70树突状细胞抗瘤效应
- 新基因TMBP-1的全长cDNA克隆被引量：2
- 2000年
- 目的 :克隆胸腺细胞发育相关新基因。方法 :本研究建立了抑制性差减杂交技术 (SSH) ,构建了胸腺基质细胞系cDNA差减杂交文库。应用cDNA末端快速扩增方法 (RACE)进一步克隆新基因的cDNA全长序列。结果 :筛选两个不同胸腺基质细胞系的差异表达基因 ,获得了新基因cDNA片段C 91,应用RACE成功克隆新基因TMBP - 1cDNA全长序列。它拥有一个 969bp的开放读码框架 ,编码 32 3个氨基酸。同源序列比较发现 ,它编码一个未知功能的膜结合蛋白。Northem杂交分析显示 ,mRNA转录本长度为 1 5kb ;在两种胸腺基质细胞系中均有表达。新基因的cDNA全长序列 ,已被GenBank所接受。结论 :抑制性差减杂交技术是克隆新基因片的有效方法 ;成功克隆新基因TMBP - 1的cDNA全长序列。
- 沈洁郭连英金成刚
- 关键词：抑制性差减杂交RACECDNA克隆新基因
- PPARγ激活剂rosiglitazone对大鼠慢性阻塞性肺疾患的防治作用被引量：9
- 2006年
- 目的:评价高亲和力过氧化物酶体增生物激活的受体γ(PPARγ)激动剂rosiglitazone对大鼠慢性阻塞性肺疾患(COPD)的防治作用。方法:在第1和14d每只大鼠气管内滴入大肠杆菌脂多糖(LPS)200μg(0.2mL),第2-28d(第14d除外)每天烟熏40min,每只经食管灌入rosiglitazone0.02mg。第29d处死大鼠,取肺组织检查形态学改变;取血清测血糖、血脂变化;取脾细胞测对LPS的反应。结果:模型组大鼠肺泡明显扩张、有的肺泡融合形成较大囊腔。Rosiglitazone处理的大鼠肺体积较小,显微镜下可见肺泡扩张不明显,肺泡间隔较完整,肺泡直径为(134.997±17.568)×10-3μm,低于模型组大鼠(308.362±111.913)×10-3μm,高于正常对照大鼠(5.116±1.673)×10-3μm(P<0.01)。血糖、甘油三酯、胆固醇和低密度脂蛋白含量均无明显变化。Rosiglitazone抑制正常大鼠、模型大鼠和rosiglitazone处理的大鼠脾细胞对LPS的增殖反应。结论:Rosiglitazone可减轻熏烟和气管内滴入LPS诱导的肺气肿。
- 贾宇锋郭连英沈洁施广霞
- 关键词：ROSIGLITAZONE
- ETB复合瘤苗对Hca-F的免疫保护效应及其机制
- 肿瘤疫苗(tumor vaccine,TV)免疫是最常用的肿瘤主动免疫疗法,新的肿瘤疫苗制备方法及其作用机理的研究是肿瘤疫苗研究的重要领域。本论文研究连接富含热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)...
- 王宁沈洁郭连英施广霞钱振超
- 文献传递
- 盐霉素通过下调miR-221抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的实验观察被引量：3
- 2018年
- 目的探讨盐霉素抑制乳腺癌细胞和乳腺癌干细胞增殖与microRNA-221(miR-221)及其调控的PTEN/PI3K/Akt信号通路的关系。方法脂质体转染miR-221模拟物至乳腺癌MCF-7细胞,盐霉素(1μmol/L)处理后检测细胞增殖能力和乳腺球形成能力。筛选miR-221稳转MCF-7细胞,构建裸鼠荷瘤模型,给予盐霉素腹腔注射治疗。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测细胞和皮下瘤组织中miR-221和PTEN mRNA水平,Western blot法检测PTEN、p-Akt以及ALDH1蛋白表达。结果 RT-qPCR结果显示盐霉素(1μmol/L)可明显降低MCF-7细胞中内源性miR-221表达水平(P <0. 05)。与miR-221组相比,Sal-miR-221组乳腺球体积明显变小,数量明显减少(117±9. 4 vs 180±15. 6,P <0. 05);RT-qPCR显示miR-221表达水平明显降低(P <0. 05),PTEN mRNA水平则显著升高(P <0. 05);Western blot结果显示PTEN蛋白表达增高,p-Akt和ALDH1蛋白表达降低。Sal-miR-221组裸鼠异体移植瘤体积呈明显减小趋势;瘤组织内miR-221表达明显低于对照组(P <0. 05),而PTEN mRNA表达明显高于对照组(P <0. 05);PTEN蛋白表达亦明显升高,p-Akt和ALDH1蛋白则降低。结论体内外实验结果表明盐霉素抑制乳腺癌细胞和乳腺癌干细胞增殖,可能是通过下调miR-221促进PTEN表达,抑制PI3K/Akt信号通路实现的。
- 韩晓翠李百隆于立辉卢颖毛俊王波沈洁毛利民宋波
- 关键词：MIR-221盐霉素
- 原代海马神经元兴奋毒性模型的建立及存活率的检测与意义被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨和观察药物对神经元的损伤及保护作用。方法 在体外进行海马神经元原代培养并建立谷氨酸兴奋毒作用模型 ;采用台盼蓝染色法、乳酸脱氢酶检测和程序性细胞死检测技术进行原代培养海马神经元存活率检测。结果 神经元的损伤程度与谷氨酸浓度相关 ,NMDA受体拮抗剂MK 80 1对谷氨酸引起神经元死亡有明显的保护作用。结论 谷氨酸通过NMDA受体引起细胞损伤 。
- 沈洁孙长凯范明马辉林平佟玉英施广霞
- 关键词：海马神经元谷氨酸兴奋毒性毒作用存活率原代培养
- 榄香烯复合瘤苗HSP70与HSP70_(BCG)对巨噬细胞功能影响的比较被引量：6
- 2004年
- 目的 :比较Hca F榄香烯复合瘤苗HSP70 (HSP70 HTCV)和卡介苗HSP70 (HSP70 BCG)对小鼠腹腔或脾脏巨噬细胞功能的影响 ,分析HSP70 HTCV诱导抗瘤免疫作用的机制。方法 :给正常BALB C小鼠腹腔注射HSP70 HTCV 或HSP70 BCG ,共 3次 ,并用多聚甲醛固定的Hca F细胞体内冲击。收集腹腔和脾脏的巨噬细胞 ,并用HSP70 HTCV或HSP70 BCG 体外再致敏 ,用MTT法测细胞毒活性、细胞的增殖和分泌TNF的能力 ,用中性红吞噬试验测巨噬细胞的吞噬能力。结果 :用HSP70 HTCV 免疫小鼠的腹腔巨噬细胞对Hca F的细胞毒活性强于用HSP70 BCG 免疫小鼠的腹腔巨噬细胞 (4 2 7%VS 31 0 % ,P <0 0 5 ) ;用HPS70 HTCV 免疫小鼠的脾脏巨噬细胞分泌TNF的能力高于用HSP70 BCG免疫小鼠的脾脏巨噬细胞 ,细胞培养上清对L92 9的细胞毒活性分别为 5 7 4 %和 35 9% (P <0 0 5 ) ,脾脏巨噬细胞吞噬中性红的能力的变化两组之间无明显差别 ;免疫巨噬细胞的上述功能均高于未经免疫的对照小鼠的巨噬细胞 (P <0 0 1) ,而三组巨噬细胞的增殖改变无明显差别 (P >0 0 5 )。结论 :HSP70 HTCV 或HSP70 BCG 免疫都能增强巨噬细胞功能 ,但HSP70
- 邢嵘康晓楠高志红郭连英沈洁施广霞钱振超
- 关键词：HSP70榄香烯复合瘤苗BCG肿瘤疫苗巨噬细胞
