- 一种大肠杆菌冷休克助溶型表达质粒的构建方法及其应用
- 本发明涉及一种大肠杆菌助溶型表达质粒的构建方案及应用其制备水溶性异源多肽的方法。所述利用无缝克隆技术构建一类由冷休克基因的启动子控制小分子泛素相关修饰蛋白(SUMO)与外源基因融合表达的冷休克助溶型表达质粒。将一种嵌合型...
- 庞一林谭国强吕建新李江辉杜璟张涛孙倩倩韩琴霞
- 幽门螺杆菌感染相关miRNA-148b在胃癌细胞增殖及侵袭中的分子机制研究被引量：8
- 2017年
- 目的研究幽门螺杆菌相关miRNA-148b在胃癌中过表达与幽门螺杆菌(H.pylori)感染的相关性及其在胃癌细胞增殖及侵袭中的分子机制。方法本研究首先建立稳定的H.pylori感染人胃上皮细胞模型;检测H.pylori感染前后胃上皮细胞的miRNAs表达谱变化,筛选出感染后miRNA-148b表达显著上调的为研究对象。选择胃癌细胞系AGS、HGC-27、SGC-7901及人正常胃上皮细胞GES-1为研究对象。设计合成miRNA-148b特异性siRNA及miRNA-148b的过表达质粒,抑制或过表达miRNA-148b的表达水平,通过细胞凋亡实验,Transwell小室细胞侵袭等实验,研究miRNA-148b在胃癌细胞增殖及侵袭中的作用。探讨miRNA-148b在胃癌细胞增殖侵袭中的分子作用机制。结果 realtime PCR检测,H.pylori在感染胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞株AGS、HGC-27、SGC-7901后miR-148b表达升高,不同胃癌细胞株较正常胃黏膜miR-148b表达下降,在体外,发现miR-148b可以促进胃癌细胞株AGS、HGC-27、SGC-7901细胞的增殖,抑制胃癌细胞株SGC-7901细胞的凋亡;证实抑癌基因TP53INP1和癌基因PAI-1为miR-148b的靶基因,在胃癌细胞株和胃癌组织中miR-148b和PAI-1的表达水平呈显著负相关。结论通过H.pylori感染胃上皮细胞株前后miR-148b的表达检测,验证了先前的miRNAs芯片检测结果,在体外,过表达miR-148b促进胃癌细胞株增殖,抑制其凋亡,提示机体可能以这种方式减缓在H.pylori感染早期所诱导的胃上皮细胞的过度凋亡进程,从而发挥了相应的保护作用;相对于正常胃黏膜组织,在不同胃癌细胞株中miR-148b都表达下调暗示,在胃癌的发生发展过程中,miR-148b可能作为一个抑癌基因而被抑制,证实抑癌基因TP53INP1和癌基因PAI-1为miR-148b的靶基因,提示miR-148b在H.pylori感染和胃癌发生的不同时期功能不同。
- 张亚琼孙倩倩娄欣欣金冲章月桃
- 关键词：幽门螺杆菌胃癌
- 一种大肠杆菌冷休克助溶型表达质粒的构建方法及其应用
- 本发明涉及一种大肠杆菌助溶型表达质粒的构建方案及应用其制备水溶性异源多肽的方法。所述利用无缝克隆技术构建一类由冷休克基因的启动子控制小分子泛素相关修饰蛋白(SUMO)与外源基因融合表达的冷休克助溶型表达质粒。将一种嵌合型...
- 庞一林谭国强吕建新李江辉杜璟张涛孙倩倩韩琴霞
- IscU2对非小细胞肺癌增殖、迁移、侵袭能力的影响及其作用机制的研究
- 2020年
- 该文通过shRNA干扰技术敲低IscU2干扰细胞IscU2的表达,研究了干扰IscU2对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞NCI-H520增殖、迁移及侵袭能力的影响。构建了稳定低表达IscU2的非小细胞肺癌细胞系NCI-H520;采用CCK-8和平板克隆实验检测细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期、凋亡、ROS、线粒体膜电位变化情况;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;Western blot检测相关蛋白的表达。结果表明,干扰IscU2后,非小细胞肺癌细胞的增殖及克隆形成能力降低;细胞周期停滞在G1/G0期,同时伴随有p-AKT和Cyclin D1蛋白含量的下降;细胞晚期凋亡率明显增加,凋亡蛋白Cleaved-caspase3和Cleaved-PARP表达上调;细胞迁移和侵袭能力降低,上皮标志物E-Cadherin表达上调,间质标志物N-Cadherin和Snail表达下调;细胞ROS积累和线粒体膜电位下降。该研究结果表明,干扰IscU2显著抑制非小细胞肺癌的增殖、迁移、侵袭能力和上皮–间质转化,这为非小细胞肺癌的诊断和治疗提供了新的潜在靶点和视角。
- 韩琴霞孙倩倩孙倩倩周怀彬周怀彬
- 关键词：非小细胞肺癌增殖迁移
- IscU对非小细胞肺癌发生发展的作用及机制研究
- 目的： 近些年来，全世界很多国家和地区的肺癌发病率和死亡率呈明显的上升趋势，肺癌的发病率与死亡率在我国男性中居于所有恶性肿瘤的首位，在女性中居于第二位，其侵袭力和转移能力是引起患者死亡和肿瘤复发的主要原因。所以对肺癌的...
- 孙倩倩
- 关键词：非小细胞肺癌线粒体蛋白水平分子机制
- 一种基于无缝克隆技术的克隆载体制备方法以及试剂盒
- 本发明提供一种基于无缝克隆技术的快速克隆载体、该载体的制备方法以及含有该载体的试剂盒。所述克隆载体的制备方法包括：PCR扩增获得目的基因，PCR产物的特征在于其两末端从外到里依次为任意大肠杆菌表达载体的多克隆位点中单一限...
- 庞一林谭国强吕建新李江辉李唐张涛孙倩倩韩琴霞
- 文献传递
