冯凡
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：江苏大学附属四院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利福平通过促进自噬保护帕金森病模型细胞损伤被引量：1
- 2018年
- 目的:探讨利福平对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)多聚体水平的影响及其与细胞自噬的关系。方法:用不同浓度鱼藤酮、利福平、自噬抑制剂氯喹和自噬促进剂雷帕霉素处理SH-SY5Y细胞,MTT法检测细胞存活率,筛选最佳实验浓度;蛋白质印迹法检测氯喹和雷帕霉素处理后不同时间点细胞内Beclin-1表达水平,确定最佳作用时间;蛋白质印迹法检测鱼藤酮、氯喹和雷帕霉素处理后Beclin-1和α-syn多聚体的表达;将SH-SY5Y细胞分为对照组、鱼藤酮组、利福平+鱼藤酮组和利福平组,流式细胞术检测4组细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测α-syn多聚体及自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62的表达;在上述分组基础上,蛋白质印迹法检测氯喹和雷帕霉素预处理后各组细胞α-syn多聚体的表达。结果:利福平浓度为150μmol/L时细胞存活率最高;氯喹、雷帕霉素调节自噬的最佳处理条件分别为10μmol/L(1 h)、10 nmol/L(2 h);与对照组相比,鱼藤酮、氯喹均能显著增加细胞内α-syn多聚体表达(P均<0. 01),降低Beclin-1表达(P均<0. 05),雷帕霉素能显著提高Beclin-1表达(P <0. 01);与对照组比较,鱼藤酮组细胞凋亡率明显上升(P <0. 05),p62和α-syn多聚体表达增加,Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ表达明显降低(P均<0. 01);与鱼藤酮组相比,利福平+鱼藤酮组细胞凋亡率明显降低(P <0. 05),p62和α-syn多聚体表达明显减少,Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ表达明显升高(P均<0. 01);与利福平+鱼藤酮组比较,氯喹预处理后α-syn多聚体表达明显增加(P <0. 01)。结论:利福平能减少鱼藤酮诱导的多巴胺能神经元凋亡,可能通过促进细胞自噬降低α-syn多聚体表达。
- 王春燕冯凡冯凡巩企霞万晟霞赵晶赵晶徐平
- 关键词：利福平帕金森病Α-突触核蛋白自噬
