夏颖
- 作品数：9 被引量：117H指数：5
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家社会公益研究专项计划更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程更多>>
- 耐盐细菌的渗透保护剂及其调渗机制被引量：5
- 2002年
- 高渗环境下的细菌常在体内积累一些小分子物质 (如糖类、醇类、氨基酸及其衍生物等 )作为渗透保护剂 ,以对抗高渗环境。编码这些物质吸收和合成的基因统称为渗透调节基因 ( Osm gene)。目前已有一些耐渗基因被克隆。
- 夏颖闵航吕正兵张林普
- 一株多环芳烃降解菌的鉴定及GST基因克隆和序列分析被引量：15
- 2003年
- 由石油污染土壤中分离到一株能以多环芳烃 (菲、芴、萘 )为唯一碳源的细菌 ,经形态观察、生理生化 (Biolog GN)和G +Cmol%分析 ,鉴定该菌为少动鞘氨醇单胞菌 (Sphingomonaspaucimobilis)。与 1 6SrDNA序列同源性的比较进一步确证了鉴定结果。经菲诱导后的细菌谷胱甘肽S 转移酶 (GlutathioneS transferase ,GST)酶活明显高于未诱导前 ,表明谷胱甘肽S 转移酶可能与多环芳烃的降解有关。根据该酶基因的同源性序列设计引物 ,PCR扩增出编码谷胱甘肽S 转移酶基因片段 ,进一步证实在该菌中有GST的存在。测序后基于编码GST的基因所进行的系统发育分析表明 ,该多环芳烃降解菌与其它多环芳烃降解菌在进化上亲缘关系较近。
- 夏颖闵航
- 关键词：鞘氨醇单胞菌谷胱甘肽S-转移酶系统发育基因克隆多环芳烃降解菌
- 多环芳烃菲降解基因的克隆表达研究
- 多环芳烃(PAHs)在环境中分布广泛,普遍存在于大气、土壤、食品及水体中,并且极易在环境中累积并可通过食物链传递,对人类健康和生态环境具有很大危害性.菲因独特的化学结构,成为PAHs降解研究中的模式化合物,菲污染的研究不...
- 夏颖闵航
- 关键词：多环芳烃菲降解基因克隆表达降解特性
- 文献传递
- 真养雷氏菌DKC1菌株镉抗性czcC基因的克隆与表达被引量：4
- 2004年
- 利用PCR技术从真养雷氏菌 (Ralstoniaeutropha)菌株质粒中扩增出 1 2kb的镉抗性系统结构修饰蛋白的编码基因czcC ,然后将其克隆到pGEM T easy载体上 ,构建重组质粒 ,经EcoRⅠ酶切分析和核苷酸序列分析 ,与Gen Bank中登录的czcC基因序列相似性高达 98% ,显示其具有正确的czcC基因核苷酸序列 ,并利用pET 30a(+)Vector在E .coliBL2 1中进行了成功表达。
- 段学军闵航吕文平夏颖
- 关键词：镉抗性基因克隆
- 产顺式环氧琥珀酸水解酶的红球菌M1菌株的分离鉴定及其产酶条件优化被引量：11
- 2004年
- 从土壤中筛选到一株产顺式环氧琥珀酸水解酶 (ESH)的菌株 ,经生理生化、Biolog碳源利用试验和 1 6SrDNA序列分析系统发育研究 ,菌株可能为赤红球菌 (Rhodococcusruber)M1。摇瓶试验确定了最佳碳源、氮源、顺式环氧琥珀酸二钠添加时间和添加量。正交优化试验的最佳培养基和培养时间为 :葡萄糖 1 2 % ,硫酸铵 0 6 % ,酵母膏0 5 % ;顺式环氧琥珀酸二钠投加时间为 30h ,投加量为 3 5 8% ;菌体培养时间 70h。摇瓶试验ESH酶活达 75 0U g湿细胞。目前该菌株已经应用于固定化细胞连续生产L(+)
- 潘克侠闵航夏颖徐晓宇阮爱东
- 关键词：红球菌顺式环氧琥珀酸水解酶L(+)酒石酸
- 两株菲降解菌株的特性及其系统发育分析被引量：19
- 2003年
- 从石油污染土壤中分离到两株可以菲为唯一碳源的细菌菌株，经形态和生理生化特性分析，脂肪酸含量分析和16SrDHA序列同源性鉴定，两菌均属鞘氨醉单肥菌属(Sphingomonas)，菌株ZX4为少动鞘氨醉单胞菌(Sphingomonas paucimobills)，而菌株EVAl7与该属内己知菌的序列同源性在93％—98％之间，推测可能为一新种历菌株在不同碳源培养基上的生长曲线表明菲对细菌生长有明显的延滞作用．菌株EVAl7全细胞蛋白质电泳图谱揭示该细菌在菲诱导下可出现诱导性蛋白，推测可能为一些解毒酶或降解酶．菲降解细菌在以结晶态菲为碳源时生长速率明显低于以粉末态菲为碳源时的生长速率，表明细菌与菲问的接触面积是限制其利用菲的一个重要因素．分离菌株谷肮甘肽S—转移酶(GST酶)具有可与1—氯—2，4—二硝基苯（CDNB)结合的活性．添加表面活性剂吐温—80可促进细菌对菲的利用。
- 夏颖闵航周德平韩如旸
- 关键词：菲降解菌生理特性系统发育分析
- 一种新型内切-β-葡聚糖酶基因在里氏木霉中的重组与表达被引量：3
- 2016年
- 刺糙青霉(Penicillium echinulatum)可产生一种耐热、耐碱的新型内切-β-葡聚糖酶(EGL1),具有重要的工业应用价值。鉴于野生型刺糙青霉的产酶水平低,将该菌的内切-β-葡聚糖酶基因经过密码子优化后,在里氏木霉(Trichoderma reesei)中进行重组与表达,采用里氏木霉强启动子Pcbh1(纤维二糖水解酶Ⅰ)及其信号肽,以pCAMBIA1300为载体骨架构建重组质粒pCB-PET,并采用根瘤农杆菌介导转化技术将重组质粒pCB-PET导入里氏木霉的分生孢子中,在潮霉素抗性平板上筛选获得5个优良的重组转化子。将5个转化子重复传代培养10个批次后,分别提取染色体DNA进行PCR验证,均可检测到目的基因Egl1n(密码子优化后的Egl1)条带,说明该基因已稳定地整合到里氏木霉基因组中。采用SDS-PAGE蛋白电泳对转化子培养液进行检测,获得了与目的基因表达产物相符的蛋白条带(约41 kDa),表明Egl1n已在重组里氏木霉中成功实现了胞外表达。重组转化子在30℃,摇瓶转速200 r×min^(-1)条件下培养48 h,取发酵上清液在pH 8.0,60℃条件下,测得内切-β-葡聚糖酶活力为382.6 U×mL^(-1),是出发菌株的22.5倍。酶学性质研究结果表明:该酶耐热性能较好,在70℃以下性能稳定,其最适催化温度为60℃;该酶在pH 5.0~10.5稳定性较好、具有明显的催化活性,其最适pH为8.0,属于碱性纤维素酶。从而成功地实现了刺糙青霉内切-β-葡聚糖酶基因在里氏木霉中的重组与胞外表达,有关研究结果在里氏木霉纤维素酶的定向进化及其工业化应用中具有重要的促进作用。
- 夏颖赵杰夏黎明
- 关键词：碱性纤维素酶里氏木霉基因重组
- 三株菲降解细菌的分离、鉴定及降解特性的研究被引量：61
- 2003年
- 从石油污染土壤中分离纯化到 3株能以菲为唯一碳源和能源生长的革兰氏阴性杆菌、好氧、不形成芽孢、端生或侧生单根鞭毛 ,分别命名为菌株ZX4、ZX6和EVA17.据部分片段长度的 16SrDNA序列比对分析和生理生化试验结果 ,确认此 3株菌均为鞘氨醇单胞菌属 (Sphingomonas)细菌 ,菌株ZX4为少动鞘氨醇单胞菌 (S .paucimobilis) ,菌株ZX6为溶芳烃鞘氨醇单胞菌 (S .aromaticivorans) ,菌株EVA17尚不能确定 .分析了各菌株在系统发育中的分类地位 .菌株ZX4在 14d内对含量为 10 0 0mg·L-1的菲降解率可达 98 74%.不同底物实验结果表明 ,菌株EVA17可能同时拥有两条菲降解途径 .
- 周德平夏颖韩如旸闵航
- 关键词：降解特性DNA序列菌株分离菌株鉴定
