罗俊鹏
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南京农业大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 拟南芥DNA去甲基化基因RLL4的定位与功能分析
- 2017年
- 该研究以携带2×35S:LUC报告基因的转基因拟南芥Col-LUC为亲本系,将其种子进行甲基磺酸乙酯(EMS)诱变,在M2代筛选出1株低荧光的候选突变体,命名为rll4(reduced LUC luminescence 4)。遗传学分析表明,rll4突变位点包含1个核基因隐性突变。图位克隆技术定位结果显示,突变基因的位点位于4号染色体2个分子标记CL417-B10M1和CL418-B2M2之间,这2个分子标记分别位于F20D10和F20M13BAC(bacterial artificial chromosome)克隆。酶切PCR(Chop-PCR)结果显示,rll4突变体中基因组DNA的部分位点甲基化显著升高。反转录PCR(RT-PCR)结果显示,rll4突变体中ROS1(REPRESSOR OF SILENCING 1)的表达量并没有明显变化,而一些RNA介导的DNA甲基化(RdDM)过程靶位点的基因表达量有明显下降。研究表明,RLL4位点很可能参与了拟南芥DNA去甲基化过程。
- 郭倩丽罗俊鹏芮琪腊红桂
- 关键词：拟南芥
- 一个参与拟南芥DNA去甲基化过程候选基因的定位与功能分析被引量：1
- 2017年
- 以转基因拟南芥(Arabidopsis thaliana)Col-LUC为亲本材料,把它的种子进行甲基磺酸乙酯(EMS)诱变,在M2代幼苗中筛选出一株荧光降低的候选突变体,命名为rll1(reduced LUC luminescence 1),此突变基因对应的野生型基因位点因此被命名为At RLL1位点。该突变体在生长发育方面表现出明显矮化、角果较短、叶片较小的发育缺陷表型。遗传学分析表明该突变属于细胞核单基因隐性突变。通过图位克隆技术把At RLL1位点定位于2号染色体T3K9克隆。酶切PCR(chop-PCR)结果表明该突变体中35S启动子和基因组DNA上的多个位点均表现出甲基化升高的现象。反转录PCR(RT-PCR)结果表明rll1中一些RNA介导的DNA甲基化(Rd DM)途径的内源靶基因的表达量明显下降。综上所述,这些研究结果表明At RLL1位点很可能参与了拟南芥DNA去甲基化过程。
- 罗俊鹏王敏腊红桂
- 关键词：拟南芥图位克隆
