李月华 作品数:34 被引量:186 H指数:9 供职机构: 中国动物卫生与流行病学中心 更多>> 发文基金: 留学人员科技活动项目择优资助经费 现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金 科技基础性工作专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 环境科学与工程 轻工技术与工程 更多>>
欧盟、美国及国内畜禽屠宰环节沙门氏菌监控现状 被引量:8 2021年 沙门氏菌引发的食品安全问题一直是世界各国面临的重大公共卫生问题。屠宰环节是肉品沙门氏菌污染的关键风险点之一,欧盟及美国等均对畜禽屠宰环节中的沙门氏菌污染采取了系统、科学的风险监控措施,业已取得显著成效。这些组织/国家对屠宰环节畜禽胴体的取样计划、限量标准、检测方法等做了详细规定,并提出了检测不合格所对应的纠偏措施,并将沙门氏菌基底监测和风险评估作为制定控制技术规范的基础。鉴于我国生鲜肉品致病微生物监测、风险评估以及限量标准和法规的缺乏,屠宰环节沙门氏菌污染率较高,建议进一步优化畜禽屠宰环节病原危害监控措施,持续开展微生物例行监测和风险评估,研究制定适合我国现阶段的畜禽屠宰环节沙门氏菌限量标准和监测控制技术规范。本文旨在通过借鉴国际先进经验,为更好地保障国内畜禽产品质量安全提供参考。 李月华 赵格 赵建梅 刘俊辉 王君玮关键词:畜禽 屠宰 沙门氏菌 猪禽源大肠埃希菌和沙门菌对黏菌素的耐药性及MCR-1耐药基因检测 被引量:6 2018年 为了解猪禽源大肠埃希菌和沙门菌对黏菌素的耐药性以及MCR-1基因的流行情况,选取2008年-2015年采集的18 203株大肠埃希菌和2009年-2015年采集的1 729株沙门菌为研究对象,使用WPS Office 2016软件对菌株的MIC值分布和耐药结果进行统计分析,用PCR对部分菌株进行MCR-1基因检测。统计发现,在MIC≥4μg/mL时,大肠埃希菌和沙门菌所占比例分别为17.97%和29.38%;而EUCAST的结果分别为1.84%和5.63%,在耐药浓度范围内,大肠埃希菌和沙门菌均在MIC值为4μg/mL时所占比例最高,分别为15.93%和21.86%。自2013年两种菌开始出现MIC>16μg/mL的菌株。大肠埃希菌和沙门菌对黏菌素的耐药率分别为17.97%和29.38%,猪禽源大肠埃希菌和沙门菌耐药率分别为24.25%、12.3%和17.26%、38.94%。MCR-1基因检出率为11.73%,大肠埃希菌检出率比沙门菌高15.39%,MIC值为4μg/mL时阳性菌株分布最多(72.18%),2008年-2015年阳性菌株比例分别为0.19%、5.26%、4.68%、30.99%、12.28%、12.67%、14.81%、19.10%。大肠埃希菌和沙门菌对黏菌素耐药率相对不高,多数为MIC=4μg/mL的低水平耐药且逐渐出现了MIC>16μg/mL的高水平耐药菌,与EUCAST相比,其MIC值分布相对后移。沙门菌对黏菌素的耐药率高于大肠埃希菌,但后者耐药日趋严重,不同动物源菌株对黏菌素的耐药程度存在差异,猪源大肠埃希菌和禽源沙门菌耐药程度相对严重。MCR-1检出率较低,但呈现增长趋势,该基因主要引起MIC=4μg/mL的低水平耐药且主要在大肠埃希菌中被检出。 李振斌 姜雯 宋传周 赵建梅 李月华 迟良 刘焕奇 曲志娜关键词:大肠埃希菌 沙门菌 不同来源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药调查与优势基因型分析 被引量:1 2021年 为了解国内不同来源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的流行分布及耐药特征,分析其优势基因型,为有效控制MRSA流行与传播提供依据。利用常规细菌分离培养、PCR方法、微量肉汤稀释法进行MRSA的分离鉴定、药敏试验与多位点序列分型(MLST)。结果显示:(1)10省4755份样品共分离到1442株金黄色葡萄球菌,其中239株为MRSA,包括猪源MRSA 203株(18.78%),牛源27株(14.44%),鸡源9株(5.17%)。(2)多省猪源MRSA对青霉素耐药率100%,对氟喹诺酮类和头孢菌素类耐药率在80%以上,其余药物均在20%~60%;牛源/鸡源MRSA对青霉素、红霉素、克林霉素和头孢菌素类耐药率100%,但普遍对磺胺类敏感,牛源未检测到利奈唑胺耐药菌株。(3)各省份ST型分布存在差异,检测的179株MRSA共分为4个序列型,ST 9最多,在3种动物源中均有分布,其次是ST 59;ST 398和ST 1376仅出现在猪源菌株。(4)ST 9和ST 1376的亲缘关系在85%左右,同一地区、同一ST型菌株可产生不同的耐药谱。表明MRSA在我国不同地区不同动物中均有分布,猪源样品检出率最高,ST 9仍为优势型别;不同来源MRSA分离菌株存在耐药差异,且菌株基因型和耐药表型之间无相关性。 许弘仪 辛宇航 刘娜 张青青 王娟 李月华 黄秀梅 王龙光 曲志娜 刘焕奇关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药性 多位点序列分型 木犀草素四甲醚在制备抗猪塞内卡病毒的制剂中的应用 本发明提供木犀草素四甲醚的一种用途,是用于制备预防和/或治疗SVA感染的制品;本发明再一个方面还提供一种用于预防和/或治疗SVA感染的制品,所述的制品中包含有药理有效浓度的木犀草素四甲醚。本发明提供了木犀草素四甲醚在制备... 尼博 蒙英雯 沙洲 李月华 郑辉 迟田英 崔进 房琳琳 张慧 董雅琴 戈胜强 刘爽 魏荣不同来源沙门氏菌的毒力基因检测与耐药性分析 被引量:22 2017年 [目的]了解不同畜禽中沙门氏菌的携带状况及其毒力和耐药性,为动物源沙门氏菌的流行病学分析和防控提供数据和依据。[方法]从山东、吉林、江西、新疆和云南等地区采集样本,用国标法分离鉴定沙门氏菌,用沙门氏菌血清型试剂盒检测血清型,用PCR方法检测毒力基因,最后用微量肉汤稀释法(MIC)对分离菌株进行耐药性分析。[结果]健康畜禽和发病畜禽样本中的沙门氏菌分离率分别为20.67%(141/682)、6.13%(45/734)。发现4种沙门氏菌优势血清型,分别为德尔卑(42.6%)、印第安纳(26.2%)、肠炎(17.7%)和汤普森(17%)。对分离菌株进行毒力基因分析,检测SPI-1~SPI-5上的5个核心蛋白基因和spv A、B、C、D和R毒力质粒基因,其中健康畜禽样本中沙门氏菌毒力岛上的基因携带率与发病畜禽样本中的携带率基本一致,但发病畜禽中的菌株毒力质粒基因携带率明显高于健康畜禽。耐药性检测结果表明,除多西环素和庆大霉素外,发病动物中的沙门氏菌对抗生素的耐药率均比健康动物中的高。猪源与鸡源沙门氏菌对庆大霉素、头孢噻呋、氧氟沙星、粘杆菌素的耐药率差异显著,对其他抗菌药物略有差异,但不显著。健康畜禽中的多数沙门氏菌株耐药1~2种,占分离菌株总数的55.32%;发病畜禽中耐药10种以上的沙门氏菌占分离株总数的44.44%。[结论]发病畜禽中的沙门氏菌分离率比健康畜禽中的低,但其毒力质粒基因的携带率较健康畜禽中的高,且耐药情况较严重,多重耐药率高。该分析结果可为沙门氏菌的危害评估和防控措施制定提供依据。 宋雪 赵格 刘文化 孙婷婷 王娟 赵建梅 洪军 李月华 黄秀梅 刘娜 张林波 王君玮关键词:沙门氏菌 毒力 耐药性 A型塞尼卡病毒检测方法及疫苗研究进展 被引量:5 2022年 A型塞尼卡病毒(Senecavirus A,SVA)也称为塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV),属于小RNA病毒科塞尼卡病毒属成员。SVA主要引起猪的水泡性疾病,与口蹄疫、水泡性口炎、猪水泡病等临床症状相似,可导致新生仔猪急性死亡,严重影响养猪业发展。自2015年广东省发生SVA感染以来,中国多省份陆续有该病发生的报道。当前,中国因猪群缺乏针对SVA的免疫屏障,加之该病传染性较强,存在大范围暴发的潜在风险。如何有效防控SVA感染是迫切需要解决的问题。目前已开发出多种SVA诊断方法用于进行实验室及现场条件下早期的鉴别诊断。SVA的分离鉴定、原位杂交和免疫组化可用于检测病原体的存在及其与组织内形态学变化关系;血清学诊断方法包括基于不同结构蛋白的间接ELISA方法、竞争ELISA方法、均相光激化学发光免疫技术和病毒中和试验,用免疫学方法检测抗体有助于了解SVA感染进程,是临床诊断的主要手段;病毒核酸检测方法主要有PCR技术、等温扩增技术、基因组测序等分子生物学技术,在病毒感染的早期快速检测及检测新发病毒中具有重要作用。目前仍无商品化疫苗预防SVA感染,但科研人员已研发出了灭活疫苗、弱毒疫苗、核酸疫苗和亚单位疫苗等多种具有潜力的候选疫苗。笔者系统总结了SVA检测方法及疫苗研发的最新进展,以期为SVA感染的防控提供参考依据。 王迁迁 于永乐 李月华 董雅琴 尼博 刘拂晓关键词:疫苗 一种多重耐药基因检测的液态芯片引物组及其应用 本发明涉及分子鉴定领域,特别是涉及一种多重耐药基因检测的液态芯片引物组及其应用。本发明利用所述引物组进行多重PCR同时检测9种耐药基因时,9组引物对之间无交叉反应,特异性好、灵敏度高,具有高通量、高速度、低成本、灵敏度高... 曲志娜 韩天飞 赵建梅 王君玮 刘俊辉 王娟 赵格 刘娜 王琳 张喜悦 李月华 黄秀梅 张青青 高玉斌大型肉鸡屠宰场沙门氏菌污染关键控制点的研究 被引量:2 2020年 构建肉鸡屠宰环节沙门氏菌定量风险评估模型,明确肉鸡屠宰过程中沙门氏菌污染的关键风险防控点,可有效防控鸡肉产品中沙门氏菌污染。本研究基于大型肉鸡屠宰场沙门氏菌污染监测数据,通过@RISK7.0软件构建了以烫洗煺毛为起点,包括净膛、清洗预冷和分割传送环节过程的定量评估模型,并通过过程各参数敏感性分析确定该肉鸡屠宰场屠宰过程中沙门氏菌污染的风险关键点。模型模拟结果表明,肉鸡屠宰后100 g鸡肉中沙门氏菌污染量90%的可能分布在0.2~47.1 MPN,实际监测数据拟合结果为0~7.95 MPN,说明模型可信。通过消长变化分析发现,预冷后沙门氏菌污染量从2.31×10^6 MPN骤然升高至25.76×10^6 MPN,同时通过拟合模型相关参数敏感性分析,进一步明确了预冷池水中沙门氏菌浓度是影响鸡肉产品中沙门氏菌污染的关键风险点。研究结果为肉鸡屠宰企业管控沙门氏菌污染和进行卫生监管提供了理论依据。 赵建梅 李月华 王琳 刘娜 黄秀梅 韩天飞 曲志娜 王娟 刘俊辉 赵格 王君玮关键词:肉鸡 沙门氏菌 风险评估 关键控制点 PCR鉴定沙门氏菌血清分型方法的建立与应用 被引量:13 2018年 为建立快速有效、经济适用的沙门氏菌血清型鉴定方法,利用Primer Plex软件设计畜禽中常见沙门氏菌的菌体(O)抗原和鞭毛抗原(H)的引物,优化引物比例和退火温度等反应条件,建立沙门氏菌血清型鉴定的PCR法,并对46株沙门氏菌分离株进行血清型鉴定,同时与传统玻片凝集法和美国CDC的液相芯片(Luminex-x MAP)法进行比较。优化后获得了O抗原中B、C1、D和E1群的多重PCR引物,以及鞭毛抗原H1相抗原基因(fli C)和H2相抗原基因(flj B)的2对引物;建立了一套基于沙门氏菌O和H抗原的多重PCR血清型鉴定法;PCR法和Luminex-x MAP法鉴定出7种沙门氏菌血清型,传统玻片凝集法鉴定出6种血清型;PCR法与传统玻片凝集法和Luminex-x MAP鉴定结果的符合率均为95.65%。本研究建立的PCR沙门氏菌血清型鉴定法简便、快速,预期可在沙门氏菌的血清分型研究中发挥作用。 赵建梅 李月华 宋传周 赵格 曲志娜关键词:沙门氏菌 血清型 PCR 符合率 市售猪肉中沙门氏菌耐药基因与毒力基因筛查及PFGE分型研究 被引量:11 2018年 为了解市售猪肉中沙门氏菌耐药基因和毒力基因携带状况,以及PFGE分子分型情况,用PCR方法对分离的22株沙门氏菌携带的耐药基因和毒力基因进行检测,并运用XbaⅠ酶进行酶切后完成PFGE分析,再利用BioNumerics软件对分离菌株的指纹图谱进行聚类分析。结果显示:分离菌株对氨苄西林的耐药性最严重,耐药率为72.73%,其次是对氟苯尼考,耐药率为68.18%;在10种耐药基因检测中,共检出9种;除喹诺酮类药物外,分离菌株耐药基因与耐药表型的符合率为95%,其中88%的分离菌株携带酰胺醇类耐药基因(catI)和β-内酰胺类耐药基因(blatem-1/blapsE-1/blaCMY-1/blaoxA-1)。在14种毒力基因检测中,共检出13种;所有分离菌株均携带mgt C和bcfA毒力基因,其次是mogA、araB、stn、fimA毒力基因,携带率均为95.45%;22株沙门氏菌共分为10个群,包括8个带型,菌株相似度为60%~100%。结果表明:市售猪肉中的沙门氏菌携带多种耐药基因和毒力基因,须采取措施防止沙门氏菌污染猪肉产品。 黄秀梅 盖文燕 曲志娜 赵思俊 李月华 王玉东 王君玮 王娟关键词:沙门氏菌 耐药基因 毒力基因 PFGE分型