吴刚
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 供职机构：第三军医大学高原军事医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及机制研究
- 2022年
- 目的 探讨DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells, RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法 培养原代RPASMCs,采用3%O;缺氧处理细胞构建缺氧诱导细胞增殖模型。采用小干扰RNA(small interfering RNA sequence, siRNA)敲低Dnase2a的表达,采用质粒过表达上调细胞中Dnase2a和Hif1a的表达。采用外源性加入线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)诱导细胞增殖,使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA作为HIF-1α激动剂上调细胞中HIF-1α的表达。采用MTS法检测各组细胞增殖能力,实时荧光定量PCR法检测Dnase2a的mRNA表达,Western blot法检测DNase 2α、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和细胞周期蛋白(cell cycle protein D1,Cyclin D1)的表达。结果 缺氧可诱导RPASMCs增殖,并上调DNase 2α的表达(P<0.05)。siRNA可显著降低RPASMCs中Dnase2a的表达(P<0.05),并显著增强缺氧诱导的RPASMCs增殖(P<0.05),同时显著上调PCNA和Cyclin D1的蛋白表达(P<0.05)。过表达Dnase2a可显著上调RPASMCs中DNase 2α的表达(P<0.05),并显著抑制缺氧诱导RPASMCs增殖(P<0.05)。外源性加入mtDNA可诱导RPASMCs增殖,而过表达Dnase2a可显著抑制mtDNA诱导的RPASMCs增殖(P<0.05)。过表达Hif1a或使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA可显著上调HIF-1α表达,并显著上调DNase 2α的蛋白表达(P<0.05)。结论 DNase 2α可抑制缺氧或线粒体DNA诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,缺氧诱导的DNase 2α表达上调与HIF-1α有关。
- 耿建慧陈建张二龙阳一栋陈德伟吴刚王羽赵文琦高钰琪
- 关键词：线粒体DNA大鼠肺动脉平滑肌细胞缺氧
- 热习服对大鼠高原脑水肿的预防效应及其机制研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨热习服对大鼠高原脑水肿的预防效应及其机制。方法雄性成年SD大鼠按随机数字表法分为正常对照(C)组、热习服(HA)组(34℃,30 d)、缺氧(H)组(7 600 m,1 d)、热习服+缺氧(HHA)组(34℃30 d+7 600 m 1 d)。各组处理结束后,取脑组织比较其湿干质量比,对脑组织HE染色、FJB染色后观察病理形态学改变,透射电镜观察脑组织超微结构改变,取血液标本检测血常规、血气分析和血红蛋白氧解离曲线,同时检测脑组织中丙二醛(MDA)含量和热休克蛋白70(HSP70)及水通道蛋白4(AQP4)蛋白的表达。结果与C组(4.50±0.07)相比,H组脑组织湿干质量比(4.62±0.08)显著升高(P<0.05);HHA组脑组织湿干质量比(4.52±0.06)显著低于H组(P<0.05)。与C组相比,H组脑组织HE染色和透射电镜结果显示细胞肿胀,胞质疏松,染色质分布不均匀,核明显固缩、破裂、溶解,细胞空泡化明显,FJB染色提示神经元变性增多;与H组相比,HHA组细胞损伤、神经元变性和凋亡程度显著改善。与C组相比,H组血红蛋白、红细胞计数、红细胞压积和中性粒细胞百分比显著升高,血氧饱和度、血氧分压显著降低(P<0.05);与H组相比,HHA组血红蛋白、红细胞和红细胞压积进一步升高,但中性粒细胞百分比显著降低,血氧饱和度、血氧分压显著升高(P<0.05)。与C组相比,H组氧解离曲线发生右移;与H组相比,HHA组氧解离曲线发生右移。与C组相比,H组脑组织MDA含量和AQP4蛋白表达显著升高(P<0.05);与H组相比,HHA组MDA含量和AQP4蛋白表达显著降低,HSP70蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论热习服可以有效预防大鼠高原脑水肿的发生,其机制与提高氧气供应、减轻氧化应激、改善细胞损伤等有关。
- 柯贤锋何根林董华平吴刚吴刚吴刚徐刚徐刚张二龙陈建
- 关键词：热习服高原脑水肿
- HIF-1α介导低氧诱导的内皮细胞Brm表达上调的机制研究被引量：6
- 2017年
- 目的:本研究拟探讨低氧诱导因子1α(HIF-1α)在低氧诱导的血管内皮细胞Brm表达上调中的作用及机制,为低氧性肺动脉高压的防治提供理论依据。方法:在内皮细胞中过表达或siRNA干扰HIF-1α的表达,并给予1%低氧处理24 h后,运用萤光素酶报告基因检测方法检测Brm启动子的转录活性,运用RT-qPCR检测Brm的mRNA表达水平,运用Western blot检测Brm的蛋白表达水平。运用ChIP技术检测低氧条件下HIF-1α与Brm启动子区域的结合变化情况。结果:过表达HIF-1α可显著上调Brm的启动子活性、mRNA及蛋白表达,而siRNA干扰HIF-1α可显著抑制Brm的启动子活性、mRNA及蛋白表达,ChIP实验揭示低氧可显著增强HIF-1α与Brm启动子的结合。结论:低氧上调内皮细胞中Brm的表达依赖HIF-1α的转录调控作用。
- 王授衔陈德伟高文祥徐刚吴刚陈建高钰琪
- 关键词：低氧性肺动脉高压低氧诱导因子1Α内皮细胞
- 移居高原青年男性血尿酸水平变化特点及影响因素分析
- 为探讨移居高原青年男性血尿酸水平特点及其影响因素.采集平原(＜500m)青年男性移居高原前及其移居海拔3658m高原一周后(45例,年龄20-23岁),平原(＜500m)青年男性移居高原前及其移居海拔5300m高原一周后...
- 刘宝谢慎威陈建吴刚唐中伟高钰琪
- 关键词：青年男性血尿酸水平种族差异性高原低氧环境
- 文献传递
- 急进高原后男性官兵心功能的变化及其与AMS的关系被引量：5
- 2017年
- 目的:评价驻平原官兵急进高原前后心功能的变化情况并探讨其与急性高山病(AMS)的关系。方法:采用超声心动图评价42名健康青年男性官兵进入高原前及快速进入高原后(3 658 m,3 d)的心脏功能,同时观察心率、血压和血氧饱和度等生理指标的变化,以及进入高原后AMS的发病情况。结果:与进入高原前相比,青年男性官兵急进高原后,左房收缩末期内径和左室舒张末期内径显著减小,右房收缩末期内径显著减小,右室流出道和肺动脉内径显著增宽,射血分数显著增大,心输出量显著增多,肺动脉收缩压及平均肺动脉压显著增高,二尖瓣E峰流速显著降低(P<0.05)。进入高原后,42人中有15人发生AMS(AMS组),27人未发病(non-AMS组)。比较2组官兵在平原的心功能发现,AMS组的主动脉窦部内径和左室舒张末期内径显著小于non-AMS组,肺动脉收缩压显著高于non-AMS组。比较2组官兵进入高原后的心功能发现,AMS组左房收缩末期内径显著小于nonAMS组(P<0.05)。AMS评分与进入高原前的心输出量呈显著负相关性(r=-0.3814,P<0.05)。结论:青年男性官兵从平原快速进入高原后,右心功能受损合并左心功能代偿;在平原运用超声心动图进行肺动脉收缩压及心输出量的检查有助于AMS易感人群的筛选。
- 易元月刘宝吴刚高钰琪
- 关键词：急性高山病左心室代偿
- 高原肺水肿大鼠肺组织基因表达谱分析
- 2024年
- 目的利用基因芯片技术分析高原肺水肿(high altitude pulmonary edema,HAPE)大鼠模型肺组织差异表达基因,为深入探讨HAPE发生的分子机制提供新线索。方法将8周龄健康雄性SD大鼠[体质量(200±20)g]按随机数字表法分为常氧对照(NC)组、脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)组、低压低氧(Hypoxia)组和低压低氧复合低剂量LPS(HL)组。LPS组和HL组按照每100 g体质量尾静脉注射0.1 mL浓度为0.05%的LPS溶液,NC组和Hypoxia组给予等量生理盐水;Hypoxia组和HL组进行模拟海拔5000 m低压低氧处理6 h,NC组和LPS组于舱外同时饲养。检测肺组织的湿/干质量比(wet/dry mass ratio,WDR)、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)蛋白含量,HE染色观察肺组织病理改变。提取肺组织总RNA,采用Affymetrix基因芯片检测mRNA表达谱,采用Metascape在线基因注释和分析系统(http://metascape.org)对差异表达基因进行基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路聚类分析。结果HL组大鼠肺组织表现出明显的充血、水肿、肺泡间隔增宽。与NC组比较,HL组大鼠肺WDR显著增加(P<0.01),BALF蛋白含量显著升高(P<0.05)。基因表达检测发现,相对NC组,Hypoxia组有79个基因表达上调,59个基因表达下调,LPS组473个基因表达上调,695个基因表达下调,HL组669个基因表达上调,1253个基因表达下调。GO和KEGG信号通路聚类分析显示:HL组差异表达上调基因主要富集于细胞因子介导的信号通路、对IL-1的反应、炎症反应调节等生物学过程,以及细胞因子-细胞因子受体相互作用、TNF、NF-κB、IL-17、补体和凝血级联反应等信号通路;表达下调的基因主要富集到细胞外基质组织、内皮细胞迁移调控、细胞-基质黏附等生物学过程,以及黏着斑、Wnt、cGMP-PKG、PI3K-Akt、Rap1等信号通路。HL组大鼠肺组织中NF-κB、TNF-α、IL-1β以及IL-6的mRNA
- 徐刚吴刚孙滨达刘宝高志奇陈建高钰琪高文祥陈德伟
- 关键词：高原肺水肿低氧基因表达谱基因芯片
- 青年男性急进高原前后脑弥散张量成像(DTI)的比较研究
- 目的:探讨平原人进入高原早期脑形态结构、功能的变化及其与急性高原病的关系.方法:健康青年男性志愿者(22～27岁),分别在平原(300 m)和乘火车进入高原(3 658 m)后第3 天,进行脑部MRI 检查.同时,观察记...
- 吴刚刘宝邹利光张静娜孙滨达邱明国高钰琪
