王小飞
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：南通大学附属医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- HDAC1-11 mRNA在出生后大鼠坐骨神经发育过程中的表达变化
- 2013年
- 目的:研究组蛋白去乙酰化酶HDAC1-11 mRNA在大鼠出生后坐骨神经发育过程的变化。方法:RT-PCR法分析坐骨神经发育成熟过程是HDAC1-11mRNA的表达水平。结果:HDAC1-11 mRNA持续表达于大鼠坐骨神经发育成熟的过程中,在大鼠60 d时表达水平显著的低于初生时的表达水平。结论:HDAC1-11 mRNA参与大鼠坐骨神经发育成熟的过程,且其表达水平随着大鼠年龄的增加呈现由高到低的动态变化,提示其与坐骨神经髓鞘的发育成熟以及维持神经的正常功能密切相关。
- 王亚洲鞠少卿王小飞
- 关键词：坐骨神经发育
- 大鼠脊髓神经干细胞的分离培养与鉴定被引量：1
- 2006年
- 探讨胚胎大鼠神经干细胞(N SC s)的分离培养和鉴定方法。采用无血清培养液,从胚胎大鼠脊髓分离和培养N SC s,应用3H-T dR掺入技术和免疫荧光技术进行细胞自我更新能力、巢蛋白表达和多向分化潜能的鉴定。结果表明,从E 16胚胎大鼠脊髓分离培养的细胞具有N SC s特征,可在体外增殖存活,经1%胎牛血清诱导可分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。认为从胚胎大鼠脊髓成功分离培养的N SC s可在体外稳定地培养和传代,是研究细胞移植和基因治疗的理想细胞来源。
- 王小飞富赛里王惠民陈建陆佩华
- 关键词：脊髓神经系统干细胞细胞培养
- 神经干细胞移植治疗创伤性脊髓损伤的免疫排异研究
- ＜正＞本实验旨在从免疫学的角度,阐明用同种异体神经干细胞治疗脊髓损伤的可行性和可能存在的问题,以期为将来用神经干细胞移植治疗脊髓损伤疾病的临床应用提供实验依据。实验中采用流式细胞术、RT-PCR和免疫组化等方法,检测体外...
- 尹岚富赛里李莹王小飞邹健杭勤陆佩华
- 关键词：神经干细胞MHC排斥反应
- 文献传递
- NRSE与NRSF及其对神经元特异性基因表达的调控作用被引量：5
- 2005年
- 神经限制性沉默元件(NRSE)是一段长度为21￣23bp的保守DNA序列,存在于许多神经元特异表达基因的转录调控区中,神经限制性沉默因子(NRSF)能特异性结合到NRSEdsDNA上,并通过其N端和C端阻遏结构域分别连接共阻遏蛋白Sin3A/B和CoREST,Sin3A招募HDAC对组蛋白进行去乙酰基化修饰,CoREST则作为平台蛋白招募特异的“沉默组件”,以此维持基因沉默.最近的研究显示,NRSEdsRNA能在转录水平与NRSF蛋白直接作用,而不是作为siRNA或miRNA在转录后水平启动神经元特异性基因的表达.
- 王小飞于盼盼陆佩华
- 关键词：神经元NRSF特异表达基因转录后水平阻遏蛋白F蛋白
- 白细胞介素-1对神经干细胞的增殖具有抑制作用
- ＜正＞神经干细胞（NSCs）移植治疗中枢神经系统损伤是神经科学研究的一个热点。但中枢神经系统损伤能导致损伤区及其附近组织强烈的炎症反应,内源性胶质细胞和浸入的免疫细胞因此产生多种细胞因子,如白细胞介素-1（IL-1）等。...
- 王小飞于盼盼黄立东朱慧琴虞志华陆佩华
- 关键词：白细胞介素-1神经干细胞细胞增殖
- 文献传递
- SYBR greenⅠ结合熔解曲线分析快速检测GSTM1基因多态性被引量：5
- 2006年
- 目的建立一种快速检测人类谷胱甘肽S转移酶(GST)基因多态性的方法并初步应用。方法反应体系中加入新型荧光染料SYBR greenⅠ,应用多重PCR同时扩增GSTM1基因及内参照CYP1A1基因。PCR反应结束后,以0.1℃/s的速度从65℃到95℃检测并记录反应管荧光的变化,根据得到的熔解曲线分析GSTM1基因型。结果GSTM1基因携带型(GSTM1+)熔解曲线出现两个峰带,GSTM1基因空白型(GSTM1-)只出现一个峰带,两峰峰尖所对应的温度值与预期值相同,琼脂糖凝胶电泳显示PCR产物分子量与预期分子量一致。DNA抽提后整个检测在L ightCyc ler扩增仪上1 h内完成。结论SYBR greenⅠ结合熔解曲线分析是一种简单、快速、准确的分析GSTM1基因多态性的方法。
- 王小飞王惠民王跃国施英娟张冬雷
- 关键词：SYBR熔解曲线分析基因多态性
- 大鼠脊髓Ⅰ型白细胞介素1受体mRNA定量检测方法的建立
- 2005年
- 目的:建立一种方便可靠的方法定量检测大鼠脊髓Ⅰ型白细胞介素1 受体mRNA。方法:实验于2004-09／2005-01在南通大学基因诊断实验室和上海第二医科大学神经生物学实验室完成。雌性SD大鼠15只。随机分为5组, 正常对照组3只,脊髓损伤4 h组3只,脊髓损伤4 h假手术组3只,脊髓损伤24 h组3只,脊髓损伤24 h假手术组3只。利用LightcCycler荧光定量聚合酶链反应仪和荧光染料SYBR green Ⅰ对聚合酶链反应条件进行优化后,对用重物坠落诱导的脊髓损伤模型大鼠的脊髓组织中Ⅰ型白细胞介素1受体mRNA进行实时荧光聚合酶链反应,通过标准曲线法进行绝对定量分析或通过比较Ct(△△Ct)法进行相对定量分析。结果:15只大鼠均进入结果分析。①聚合酶链反应特异性:熔点曲线分析和琼脂糖凝胶电泳表明每个聚合酶链反应都获得了特异性的扩增产物。②聚合酶链反应扩增线形与效率:该方法能够检测到最低100个拷贝的模板,对含有1 000或更多拷贝模板的常规检测可获得较好的定量数据。Ⅰ型白细胞介素1受体和次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶的扩增效率分别是0．962,0．973。③定量计算公式的有效性:以cDNA稀释倍数对数值为X轴,以相应目的基因和看家基因的ΔCt为Y轴得到直线的斜率为0．084,可以应用公式2-ΔΔQ。④初步应用:脊髓损伤4 h,24 h后其Ⅰ型白细胞介素1受体mRNA表达水平分别有2．6倍(P<0．05)和 7．8倍的增加(P<0．01)。结论:应用SYBRgreen Ⅰ实时荧光定量方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点,非常适合于对表达低水平Ⅰ型白细胞介素1受体mRNA的组织进行定量分析。
- 王小飞王惠民陈建孙承龙王跃国
- 关键词：脊髓逆转录聚合酶链反应
