- 一种改良大鼠海马神经元原代培养的方法被引量:4
- 2016年
- 目的为缺血性脑损伤模型的制备及研究建立一种更好的体外培养海马神经元的方法。方法实验组取出生24h内的Wistar新生鼠海马,用木瓜酶和DNA酶消化,以1×108/L的密度接种于含体积分数0.20胎牛血清的DMEM-F12培养液中,24h后更换无血清培养液,每隔3d半量换液。对照组采用传统的培养方法培养细胞。培养期间用倒置显微镜观察细胞形态及数量变化。采用免疫荧光法测定神经元特异性烯醇化酶表达,判断海马神经元培养是否成功。结果实验组的海马神经元培养12h,可见大部分细胞贴壁;培养24h,大部分细胞可见3-4个突起,突起长度为(25.0±2.5)μm;培养3d,神经元胞体增大,可见明显光晕;之后神经元分化逐渐成熟,胞体透亮,呈锥形或多极形,光晕明显,神经元之间的突起联系更加紧密,形成密集的神经细胞网络;培养13d后,神经元细胞开始退化、变性,胞体萎缩,神经细胞网络开始老化。随着培养天数的增加,神经元可出现少量凋亡,但实验组培养1、3、5、8d时的神经元数量明显高于对照组(t=11.5-49.5,P〈0.05)。免疫荧光法鉴定显示,实验组神经元细胞阳性率为(93.53±1.67)%。结论用上述改良方法培养得到的海马神经元细胞生长状态良好,可用于后续实验研究。
- 吴秀云凌勇张殿隆李瑜王士雷徐祯
- 关键词:海马神经元原代细胞培养荧光免疫测定
- 氟马西尼对丙泊酚复合舒芬太尼全麻患者血浆中食欲素A的影响被引量:4
- 2017年
- 目的观察氟马西尼对丙泊酚复合舒芬太尼全身麻醉患者在麻醉恢复期血浆中食欲素A(orexin-A)水平的影响,探讨氟马西尼的促进麻醉苏醒作用是否与orexin-A相关。方法选择全身麻醉下行腹腔镜下子宫肌瘤剥除术或全子宫切除术患者40例,ASA均Ⅰ~Ⅱ级,随机分为氟马西尼组(F组)和生理盐水组(N组),每组20例。全身麻醉后,采用丙泊酚镇静,脑电双频指数(BIS)值维持55~65,术后分别给予静脉注射氟马西尼0.008 mg/kg(F组),或同等剂量的生理盐水(N组)。抽取给药(氟马西尼或生理盐水)前(T0)、给药后5 min(T1)、给药后15 min(T2)、给药后30 min(T3)的桡动脉血3.0 ml,离心后采用ELISA法检测血浆中orexin-A水平,并记录患者呼唤时睁眼时间、拔出气管插管时间。结果两组平均动脉压(MAP)、心率(HR)、BIS在T1、T2、T3时点与T0比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。在T1、T2时点F组与N组MAP、HR比较差异有统计学意义(P均<0.05),在T1、T2、T3时点两组BIS值比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。两组orexin-A水平在T1、T2、T3时点与T0比较差异均有统计学意义(P均<0.05),在T1、T2、T3时点两组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。两组睁眼时间、拔出气管插管时间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。两组术后并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论氟马西尼可提高丙泊酚复合舒芬太尼全麻患者血浆中orexin-A水平,使麻醉恢复时间缩短。
- 李洪涛吴秀云赵芹曲晓燕王士雷
- 关键词:氟马西尼丙泊酚舒芬太尼食欲素A脑电双频指数