孙澎
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 7TD1细胞及其克隆对IL-6的反应性和依赖性被引量：1
- 1996年
- 比较了基础所和北医大提供的两株7TD1细胞。选择北医大细胞株进行克隆,筛选出对IL-6增殖反应性和依赖性较强的3株细胞(7TD1 MC1、7TD1 MC4、7TD1MC5)。其中,7TD1 MC5细胞的反应曲线呈典型的“倒S”形,对IL-6有很好的反应性和依赖性。MTT比色法显示了与~3H-TdR掺入法一致的结果,采用7TD1 MC5细胞及MTT比色法测定IL-6生物活性,可减少仪器测试的费用和避免放射性污染。确定了培养基中IL-6的最适浓度(2ng/ml)。细胞传代培养和冻存6个月,7TD1 MC5细胞对IL-6的反应性和依赖性均无明显变化。
- 巩新边疆薛冲陶好霞孙澎
- 关键词：克隆IL-6反应性
- 重组人白细胞介素6 部分理化生物学性质的鉴定
- 1999年
- 目的：对 Ｎ 端缺失 ５ 个氨基酸的重组人白细胞介素 ６（ｒｅｃｏｍ ｂｉｎａｎｔ ｈｕｍ ａｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ｒｈ Ｉ Ｌ６）纯品的理化生物学性质进行分析鉴定。方法：用蛋白序列自动分析仪、紫外及可见光扫描仪、 Ｓ Ｄ Ｓ聚丙烯酰胺凝胶电泳、溴化氰裂解、等电聚焦电泳、蛋白质印迹法和 Ｍ Ｔ Ｔ 比色法分别对ｒｈ Ｉ Ｌ６ 缺失体 Ｎ 端氨基酸序列、紫外及可见光吸收光谱、相对分子质量、肽图、等电点（ｐ Ｉ）、抗原特异性及生物学活性进行了分析鉴定。结果：与天然 Ｉ Ｌ６ 相比，ｒｈ Ｉ Ｌ６ Ｎ 端缺失了 ５ 个氨基酸；在２７６ ｎｍ 波长处有一个特异的蛋白吸收峰；相对分子质量为 ２１ ４８７ ；裂解的肽段分布在理论值的肽段分布范围之内；ｐ Ｉ为６．１；能与兔抗人 Ｉ Ｌ６ 抗体特异性结合；比活性达２．０５×１０１１ Ｉ Ｕ／ｇ。结论：缺失 ５ 个氨基酸的 ｒｈ Ｉ Ｌ６ 生物学活性与天然 Ｉ Ｌ６
- 陶好霞边疆孙澎巩新薛冲
- 关键词：白细胞介素6分子量等电点免疫印迹RHIL-6
- 7TD1细胞及其克隆对IL-6的反应性和依赖性
- 1997年
- 比较了本院基础医学研究所和北京医科大学提供的两株７ＴＤ１细胞。选择北京医科大学提供的细胞株进行克隆，筛选出对ＩＬ－６增殖反应性和依赖性较强的３株细胞（７ＴＤ１ＭＣ１、７ＴＤ１ＭＣ４、７ＴＤ１ＭＣ５）。其中７ＴＤ１ＭＣ５细胞的反应曲线呈典型的“倒Ｓ”形，对ＩＬ－６的反应性和依赖性很好。ＭＴＴ比色法显示了与３Ｈ－ＴｄＲ掺入法一致的结果，采用７ＴＤ１ＭＣ５细胞及ＭＴＴ比色法测定ＩＬ－６生物活性，可减少测试的费用和避免放射性污染。确定了培养基中ＩＬ－６的最适浓度（２ｎｇ／ｍｌ）。细胞传代培养和冻存６个月。
- 巩新边疆薛冲陶好霞孙澎
- 关键词：克隆白细胞介素6反应性
- 重组人表皮生长因子的中试工艺研究
- 1994年
- 人表皮生长因子(hEGF)是最早发现最早应用于临床的多肽生长因子之一,由53个氨基酸组成,分子量约为6200Da。它具有多种生物学功能,能促进表皮和上皮细胞的增殖,刺激多种培养细胞的生长,增强蛋白质及DNA合成等。在临床上主要用于创烧伤救治。
- 朱厚础汤国营王勇波胥照平戴红梅孙澎马清钧
- 关键词：中试工艺烧伤救治人表皮生长因子多肽生长因子
- 重组人表皮生长因子的纯化及体内活性检定
- 1996年
- 人表皮生长因子(Human Epidermal Growth Fac-tor,hEGF)是一个由53个氨基酸残基所组成的单链多聚肽,分子量为6200D左右,等电点为pH4.6。它具有多种生物学功能,是发现较早并且具有广泛的潜在应用价值的细胞因子之一。hEGF存在于多种体液中,由于它的含量很低,对于它的研究及应用起了限制作用。本实验室利用含有hEGF基因质粒的重组大肠杆菌,经过发酵得到了大量高效分泌表达的rhEGF,在此基础上,我们对它进行了分离纯化的研究,得到了纯度大于95％具有明显活性的rhEGF,为EGF的进一步研究与应用打下了基础。
- 王勇波胥照平孙澎戴红梅汤国营孟庆东朱厚础马清钧
- 关键词：重组人表皮生长因子体内活性RHEGF重组大肠杆菌新生小鼠3T3细胞
- 重组人白细胞介素6部分生化物理学性质的鉴定被引量：1
- 1999年
- 采用工程菌 E.coli DH5 α(p IB- h IL- 6 ) ,经过发酵培养、表达和包含体的分离纯化等步骤 ,获得了 N端缺失 5个氨基酸的 rh IL- 6纯品。对其理化生物学性质进行分析。结果表明 ,纯品 N-端氨基酸序列为 MEDSKD… ;在 2 76 nm波长处有一个特异的蛋白吸收峰 ;分子量为 2 1 487.2 ;裂解的肽段分布在理论值的肽段分布范围之内 ;p I为 6 .1 ;能与兔抗人 IL- 6抗体特异性结合 ;比活性达2 .0 5× 1 0 8IU/mg。
- 陶好霞边疆孙澎巩新薛冲
- 关键词：RHIL-6分子量等电点免疫印迹
- E.coli HB101(pBV-IL-6)的流加分批培养及其产物纯化被引量：2
- 1996年
- E.coli HB101(pBV-IL-6)工程菌株的表达产物为N端缺失25个氨基酸残基的IL-6衍生物。通过摇瓶试验选定了培养基配方及pH值的控制范围,在5L发酵罐的半连续培养中确定了培养和诱导时间。在此基础上放大到30L发酵罐进行培养,结果表明,菌密度达到5.15g/L(干重),rIL-6衍生物占菌体总蛋白的34.8％。表达产物经过纯化和复性,纯度达95％以上(SDS-PAGE分析),采用依赖IL-6的小鼠杂交瘤细胞株7TD-1和~3H-TdR掺入法测定生物活性,rIL-6衍生物比活性为7.71×10~6U/mg。
- 薛冲边疆陶好霞巩新孙澎
- 关键词：纯化
