金萍
- 作品数:6 被引量:47H指数:3
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- 同型半胱氨酸通过干扰胆固醇逆向转运促进巨噬细胞泡沫化被引量:2
- 2015年
- 目的阐明同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对人类急性单核细胞白血病细胞株(THP-1)源性巨噬细胞泡沫化的影响;探讨肝X受体α(liver X receptorα,LXRα)在同型半胱氨酸所致脂代谢紊乱中的作用。方法以THP-1为研究对象,先后与佛波酯(phorbool-1-myristate-13-acetate,PMA)、氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)共同培养,成功复制泡沫细胞模型,分别加入50、100、200μmol·L-1的Hcy,培养24h,对照组不加入Hcy。利用油红O染色(oil red O,ORO)检测泡沫细胞中性脂滴蓄积情况;利用酶终点法测定细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)、游离胆固醇(free cholesterol,FC)、胆固醇酯(cholesterol ester,CE)的含量,观察Hcy对巨噬细胞内脂质含量的影响;利用免疫细胞化学检测泡沫细胞LXRα蛋白表达,利用实时定量聚合酶链反应(real time-polymerase chain reaction,RT-PCR)测定LXRαmRNA表达,观察Hcy对巨噬细胞LXRα表达的影响。结果 ORO染色结果显示,与对照组比较,Hcy浓度越高巨噬细胞内胆固醇的聚集越明显;实验组(Hcy 50、100、200μmol·L^(-1))泡沫细胞计数阳性百分率均较对照组升高(P均<0.05),其中以Hcy 100μmol·L-1组升高明显;在不同浓度Hcy干预下,巨噬细胞内TC、FC及CE含量均高于对照组(P均<0.05);免疫细胞化学结果显示,实验组LXRα蛋白表达均低于对照组(P均<0.05),其中以Hcy 100μmol·L^(-1)组降低最为明显;RT-PCR结果显示,与对照组比较,实验组LXRαmRNA表达下调(P<0.05)。结论同型半胱氨酸能够引起THP-1源性巨噬细胞泡沫化程度增加,使LXRαmRNA低表达导致胆固醇逆向转运障碍是其引起脂代谢紊乱的可能机制之一。
- 张华杨立波金萍严宁魏宁贾绍斌
- 关键词:同型半胱氨酸巨噬细胞泡沫细胞胆固醇逆向转运肝X受体Α
- 同型半胱氨酸对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇流出的影响被引量:2
- 2015年
- 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞的形成及细胞内胆固醇流出的影响。方法首先以160 nmol·L-1的佛波酯(PMA)刺激THP-1单核细胞48 h使其分化为巨噬细胞,继之用含0、50、100、200μmol·L-1的Hcy和100 mg·L-1的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)共孵育24 h,使其转化为泡沫细胞。采用油红O染色进行泡沫细胞定性分析,泡沫细胞面积计数法进行半定量分析,总胆固醇和游离胆固醇测定法进行定量分析。结果经PMA处理48 h后,呈簇集状悬浮状态的单核细胞分化为形态不规则、有伪足并贴壁的巨噬细胞,继之经Hcy和ox-LDL处理后的细胞中出现了大量红染的脂滴,细胞呈现泡沫化改变;细胞面积计数法显示实验组较对照组而言泡沫细胞阳性率升高(P<0.05),以100μmol·L-1Hcy组最明显(P<0.05);酶终点法测定胆固醇流出结果显示,实验组的胆固醇酯相对值明显高于对照组(P<0.05)。结论成功建立THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,Hcy减少了细胞内胆固醇的流出,在动脉粥样硬化的发生发展中扮演重要作用。
- 金萍张华丛广志贾绍斌
- 关键词:动脉粥样硬化同型半胱氨酸巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出
- 同型半胱氨酸对泡沫细胞中LXRα-ABCA1信号通路的影响被引量:3
- 2016年
- 目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)通过影响脂代谢调控基因LXRα及其下游靶基因ABCA1和ABCG1的表达致人类急性单核细胞白血病细胞株(THP-1)源性巨噬细胞泡沫化在脂代谢紊乱中的作用。方法:培养THP-1单核细胞,佛波酯、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)共同诱导,采用中性红对巨噬细胞染色,并应用流式细胞技术检测巨噬细胞表面CD14的表达,测定巨噬细胞的含量。分为5组,分别加入0、10、50、100、200μmol/L的Hcy培养24h;采用RT-PCR法检测LXRα、ABCA1、ABCG1的mRNA表达;采用Western Blot法检测LXRα、ABCA1、ABCG1的蛋白表达。结果:实验组(Hcy 10、50、100、200μmol/L)泡沫细胞计数阳性百分率均较对照组升高(均P<0.05),其中以Hcy 100μmol/L组升高明显。在Hcy诱导浓度50μmol/L时巨噬细胞51.26%,CD14表达阳性率53.36%;诱导浓度100μmol/L时巨噬细胞98.5%,CD14表达阳性率73.37%。在不同浓度Hcy干预下,泡沫细胞内LXRα、ABCA1、ABCG1的mRNA及蛋白表达均低于对照组(均P<0.05)。结论:Hcy可降低THP-1源性泡沫细胞内LXRα、ABCA1、ABCG1mRNA及蛋白水平的表达,LXRα可能是Hcy影响脂代谢LXRα-ABCA1信号通路中的靶基因。
- 王义勇麻芳黄晖沙勇何琳金萍崔莹贾绍斌
- 关键词:同型半胱氨酸泡沫细胞胆固醇逆向转运ATP结合盒转运子A1
- 良性及恶性原发性肌骨肿瘤血管生成的差异分析被引量:3
- 2016年
- 目的探讨肿瘤血管生成参数在原发性良恶性肌骨肿瘤鉴别方面的应用价值。方法回顾性收集全身各部位原发性肌骨肿瘤68例,术后对肿瘤病理切片进行SP法免疫组织化学染色,检测肿瘤组织的微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况。结果良性肿瘤微血管数量相对较少,血管形态多且较规则,恶性肿瘤微血管数量较多且具有异质性,其血管形态多不规则,恶性肿瘤组MVD值(22.46±5.77)支/高倍镜视野高于良性肿瘤组的(13.4±4.16)支/高倍镜视野,差异有统计学意义(P<0.05);恶性肿瘤VEGF表达多数呈阳性或强阳性,良性肿瘤多呈阴性或弱阳性,恶性肿瘤组VEGF表达程度高于良性肿瘤组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同性质肿瘤的血管生成情况不同,血管生成参数可以用来评价肿瘤的良恶性,为临床诊疗工作及预后评估提供有价值的信息。
- 卞益同金萍王贝贝马烨白峥嵘金国宏
- 关键词:微血管密度血管内皮生长因子良恶性鉴别
- 冠心病患者血浆同型半胱氨酸水平与冠状动脉病变SYNTAX积分的相关性研究被引量:37
- 2017年
- 目的探讨冠心病患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与冠状动脉病变SYNTAX积分的相关性。方法选取2014年7—12月在宁夏医科大学总医院心内科就诊并经冠状动脉造影术(CAG)明确诊断为冠心病的患者225例为冠心病组,同时选取CAG阴性的患者51例为对照组。根据SYNTAX积分将冠心病组患者进一步分为低危组(n=74)、中危组(n=72)和高危组(n=79)。收集患者的一般资料[包括性别、年龄、BMI、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、吸烟史、饮酒史、既往史、既往用药情况等]、实验室检查结果 [包括空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血尿酸(SUA)、血肌酐(SCr)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、Hcy等]及心脏彩超检查结果 [包括左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)]。结果 4组年龄、SBP、DBP间差异无统计学意义(P>0.05),而BMI间差异有统计学意义(P<0.05)。4组男性比例、饮酒率及降糖药物、他汀类药物、抗血小板药物使用率间差异无统计学意义(P>0.05),而吸烟率和高血压、糖尿病、高脂血症发生率及降压药物使用率间差异有统计学意义(P<0.05)。4组FPG、TC、SUA、hs-CRP水平间差异无统计学意义(P>0.05),而Hb A1c、TG、LDL-C、HDL-C、SCr、Hcy水平及LVEDD、LVEF间差异有统计学意义(P<0.05)。Hcy水平与BMI、吸烟、高血压和Hb A1c、TC、LDL-C、SUA、SCr、hs-CRP水平及LVEDD呈正相关(P<0.05),与HDL-C水平及LVEF呈负相关(P<0.05);而与其他指标无明显相关(P>0.05)。SYNTAX积分与高血压和SCr、Hcy水平及LVEDD呈正相关(P<0.05),与TG、HDL-C水平及LVEF呈负相关(P<0.05);而与其他指标无明显相关(P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,吸烟、高血压和LDL-C、HDL-C、Hcy水平及LVEF是SYNTAX积分的独立影响因素(P<0.05)。结论冠心病患者血浆Hcy水平与SYNTAX积分呈正相关,测定�
- 黄晖严宁王义勇杨生平金萍王玉玲崔莹何琳张科静张杰丛广志沙勇贾绍斌
- 关键词:冠心病高半胱氨酸冠状动脉疾病SYNTAX积分
- LXRα在同型半胱氨酸促进THP-1源性泡沫细胞形成中的作用
- 2017年
- 目的探讨肝核受体X(LXRα)在同型半胱氨酸(Hcy)促进THP-1单核细胞源性泡沫细胞形成中的作用。方法体外培养THP-1单核细胞,用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导分化为泡沫细胞,并加入不同浓度(0、50、100、200μmol·L-1)的Hcy,另在100μmol·L-1 Hcy基础上加入5μg·mL^(-1) LXRα激动剂T0901317干预24h。油红O染色观察泡沫细胞形成;免疫荧光及Western blot检测泡沫细胞中LXRα及其下游三磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)、A1(ABCA1)的表达。结果油红O染色显示,Hcy加剧泡沫细胞的形成,T0901317干预后泡沫细胞形成减少(P均<0.05);细胞免疫荧光及Western blot显示Hcy下调THP-1源性泡沫细胞LXRα及ABCG1、ABCA1表达(P均<0.05)。结论 LXRα可能在Hcy促进泡沫细胞形成中起重要作用。
- 王凯燕茹金萍杜海林杨绍兵丛广志贾绍斌
- 关键词:同型半胱氨酸泡沫细胞