张婷婷 作品数:7 被引量:17 H指数:3 供职机构: 北京协和医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 卫生部卫生公益性行业科研专项 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
hsa-mir-615过表达胰腺癌稳定细胞亚系的构建及功能初步验证 2014年 慢病毒(Lentivirus)载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达[1].本实验在对胰腺癌差异表达的microRNA进行研究时发现hsa-mir-615在胰腺癌组织和胰腺正常导管上皮组织中呈现差异表达[2],异常表达的microRNA可能具有生物学功能.因此,本实验构建hsa-mir-615过表达慢病毒载体并包装成慢病毒,感染人胰腺癌细胞MIA PaCa-2,建立hsa-mir-615过表达稳定细胞系,使用CCK-8法观察hsa-mir-615对胰腺癌细胞系生长的影响,为进一步研究hsa-mir-615的生物功能构建细胞模型. 孙洋 张婷婷 王翠萍 陈杰 赵红关键词:胰腺癌组织 过表达 细胞亚系 细胞系生长 微小RNA在肿瘤干细胞中的作用 2012年 肿瘤干细胞是肿瘤中具有干细胞特征的细胞群,其具有自我更新能力、无限增殖能力和形成肿瘤中各种组分的多向分化潜能,在肿瘤的形成、发展、转移和复发中发挥重要作用。微小RNA是一种内源性非编码小分子RNA,通过与靶基因的互补配对调控基因表达,广泛参与多种肿瘤的进程。本文主要综述微小RNA在肿瘤干细胞中的作用。 张婷婷 卢朝辉 陈杰关键词:微小RNA 肿瘤干细胞 细胞信号通路 miR-125a-5p对胰腺癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响 被引量:6 2016年 目的探讨miR-125a-5p对胰腺癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法荧光定量PCR检测胰腺癌组织中miR-125a-5p的表达水平,细胞计数试剂盒-8检测下调miR-125a-5p水平对胰腺癌细胞生长的影响,流式细胞术检测下调miR-125a-5p表达水平对胰腺癌细胞周期和凋亡的影响,软琼脂集落形成实验评价miR-125a-5p在胰腺癌细胞恶性转化过程中的作用。结果 miR-125a-5p在胰腺癌组织的表达高于癌旁正常组织(P<0.05)。下调miR-125a-5p表达水平后,胰腺癌细胞系Panc-1和MIA Pa Ca-2的生长受到抑制(P<0.05),早期凋亡率分别增加13.6%和11.0%(P<0.05),细胞集落数目分别下降27.3%和27.8%(P<0.05),Panc-1细胞S期细胞百分比降低11.8%(P<0.05)。结论 miR-125a-5p在胰腺癌组织中高表达,下调miR-125a-5p表达水平使胰腺癌细胞生长受到抑制,集落形成能力下降,细胞周期受到阻滞,凋亡比例增加,提示miR-125a-5p在胰腺癌中发挥癌基因的作用。 贾丛伟 孙洋 张婷婷 卢朝辉 陈杰关键词:胰腺癌 癌基因 胰腺癌中miR-27a靶基因PSMA1的预测及鉴定 被引量:2 2013年 目的 软件预测并筛选miR-27a可能的靶基因,结合胰腺癌比较蛋白质组学结果中表达下调的蛋白,进一步检测胰腺癌中miR-27a的靶基因并进行验证.方法 采用生物信息学预测软件TargetScan、PicTar以及miranda预测miR-27a的靶基因,结合前期比较蛋白质组学的结果,筛选出miR-27a的可能靶基因;构建靶基因3'非翻译区(UTR)的表达载体,双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-27a对靶基因的靶向作用;胰腺癌肿瘤细胞系PANC-1和BxPC-3中转染miR-27a mimics或微小RNA阴性对照序列,Western blot检测靶蛋白的表达情况.结果 软件预测与蛋白质组学分析结合筛选出miR-27a的靶基因为PSMAl.双荧光素酶报告基因检测系统显示,与对照组相比miR-27a对野生型PSMA1的3'UTR具有靶向作用,实验组较阴性对照组相对活性值下降19.14%,差异具有统计学意义(P=0.016);而对突变型PSMA1 3'UTR的靶向作用消失,实验组与阴性对照组相比差异无统计学意义(P=0.249).Western blot分析显示转染miR-27a mimics组PSMA1蛋白的相对表达量明显低于阴性对照组,PANC-1细胞实验组的PSMA1相对表达量为0.71±0.01;BxPC-3细胞实验组的PSMA1相对表达量为0.58±.0.04,P值均<0.01.结论 胰腺癌中PSMA1是miR-27a的直接靶基因. 张婷婷 孙洋 贾丛伟 于双妮 卢朝辉 陈杰关键词:胰腺肿瘤 微RNAS miR-150—5p抑制胰腺癌细胞生长 被引量:4 2013年 目的探讨miR-150-5p对胰腺癌细胞生长及凋亡的影响。方法即时定量PCR(qRT-PCR)法检On.011例胰腺癌及对应癌旁正常组织和4个胰腺癌细胞系中miR-150-5p的表达,脂质体介导的化学合成miR-150-5p类似物转染PANC-1、MIAPaCa-2、BxPC-3和AsPC-1细胞系,并采用qRT-PCR法在PANC-1、MIAPaCa-2细胞系中检测转染效率;采用CCK-8检测miR-150-5p对胰腺癌细胞生长的影响;在PANC-1和MIAPaCa-2中分别使用PI/FITC双染法和PI单染,流式细胞术检测miR-150-5p对细胞周期和凋亡的影响。结果miR-150-5p在11例胰腺癌组织中的表达低于癌旁正常胰腺组织,在4种细胞系中的表达低于正常胰腺组织(均P〈0.05)。转染miR-150-5pmimics可有效提高4种胰腺癌细胞中miR-150-5pRNA量(P〈0.01)。转染72h后miR-150-5p可显著抑制AsPC-1、BxPC-3、MIAPaCa-2和PANC-1细胞生长,与正常对照组相比,抑制率分别为50.7%、48.6%、30.8%和42.3%(P〈0.01)。与对照组比miR-150-5p能够促进胰腺癌细胞凋亡(P〈0.01)。MIAPaCa-2中与对照组比miR-150-5p能够显著升高G1期细胞百分比(P〈0.01),MIAPaCa-2和PANC-1中与对照组比miR-150-5p能够显著降低s期细胞百分比(均P〈0.01)。结论miR-150-5p在胰腺癌中表达下调,过表达miR-150-5p可以抑制胰腺癌细胞生长,阻断细胞周期,促进细胞凋亡。 孙洋 金香兰 张婷婷 贾从伟 陈杰关键词:胰腺肿瘤 微RNAS 肿瘤细胞 乳腺癌HER2与IGF-IR和PTEN表达的相关性 被引量:4 2011年 目的探讨中国人乳腺癌中HER2与IGF-IR和PTEN之间的相关性。方法分别在65例HER2(+)和108例HER2(-)的乳腺浸润性导管癌中,用免疫组化EnVision法检测IGF-IR和PTEN蛋白的表达。结果 HER2(+)组中,IGF-IR和PTEN阳性率分别为78.5%(51/65)和52.3%(34/65);HER2(-)组中,IGF-IR和PTEN阳性率分别为71.3%(77/108)和68.5%(74/108)。阳性组IGF-IR过表达率高于阴性组,但差异不显著(P>0.05);阳性组PTEN表达低于HER2阴性组,差异显著(P<0.05)。HER2阳性和阴性组中,IGF-IR过表达与各临床病理参数间均无相关性(P>0.05);但阳性组中,IGF-IR高表达与淋巴结转移密切相关(P<0.05)。对全部乳腺癌标本分析显示,PTEN表达与癌的组织学分级和淋巴结转移呈负相关(P<0.05),与ER表达呈正相关(P<0.05),与其他临床指标间无相关性(P>0.05)。PTEN表达与IGF-IR和HER2表达呈负相关(P<0.05)。结论 PTEN表达丢失与乳腺癌进展密切相关;HER2阳性的乳腺癌中常见PTEN蛋白表达丢失,且IGF-IR可能参与促进了癌细胞的转移过程。PTEN蛋白缺失与IGF-IR蛋白过表达均与乳腺癌进展相关联,其分子机制和相关意义有待于进一步研究。 孙丽君 张婷婷 高洁 武莎斐 梁智勇 曾瑄关键词:乳腺癌 IGF-IR PTEN 微小RNA与肿瘤关系研究新进展 被引量:2 2013年 微小RNA(microRNA,miRNA)是一类非编码小分子RNA,20世纪90年代初被发现,随后不断有新的miRNA分子被发现,并且诸多的研究提示,miRNA广泛参与了细胞的生长、分化、增殖和凋亡以及代谢、免疫反应等过程。肿瘤的发生发展是细胞功能紊乱、正常生命活动调节受阻,导致细胞恶性增长的结果。对肿瘤中miRNA表达谱的分析揭示,多数类型肿瘤中都存在miRNA表达谱的改变,并且有学者研究报道miRNA基因多位于肿瘤相关的染色体脆性位点区。通过对miRNA功能的探索得知,miRNA通过5’端2~8核苷酸(nt)的“种子”序列与mRNA3’非翻译区(3’-UTR)互补配对,进而在RNA诱导的基因沉默复合物(RNA-inducedsilencingcomplex,RISC)的作用下,导致靶基因的翻译抑制或降解,从而实现miRNA在转录后水平对基因表达的调控。每个miRNA可作用于多个靶基因,而同一个靶基因也可能受到多个miRNA的调节,其在不同肿瘤中的作用不尽相同。下面我们将对目前已经研究的miRNA在肿瘤中的作用进行综述。 张婷婷 陈杰关键词:微小RNA 肿瘤 细胞功能紊乱 染色体脆性位点 非翻译区 RNA分子