裴乐 作品数:10 被引量:18 H指数:3 供职机构: 内蒙古农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 内蒙古自治区科技计划项目 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
健康反刍动物源饲用芽孢杆菌的分离筛选和鉴定 2018年 为筛选到性能良好的芽孢杆菌,笔者在呼和浩特郊区的几个健康牛羊养殖场采集了粪样、水样等28份样品进行芽孢杆菌资源调查。经分离和纯化培养,共分离出疑似芽孢杆菌35株,并通过16S r RNA及17项生化鉴定对其作进一步的确认和属种鉴定。经16S r RNA分析,有15株为芽孢杆菌属;再经染色镜检,生化试验结果与《常见细菌系统鉴定手册》对比,有枯草芽孢杆菌4株(占26.7%)、蜡状芽孢杆菌5株(占33.3%)、泛酸芽孢杆菌3株(占20.0%)、环状芽孢杆菌2株(占13.3%)、球形芽孢杆菌1株(占6.7%)。说明呼和浩特市郊区健康牛羊养殖场芽孢杆菌以枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌为主,占60%。 刘秀丽 成立新 凤英 李锋 裴乐 石晓娜 乔健敏 侯勇跃关键词:反刍动物 饲用芽孢杆菌 微米化蒙兽药“驱虫泻火散”的临床药效试验研究 2016年 为了满足绿色肉食品生产对绿色兽药产品的需求,以及提高蒙兽药药物疗效,对内蒙古农牧业科学院兽医研究所中蒙兽药与微生态制剂课题组前期研制出的用于绵羊寄生虫病防治的蒙兽药"驱虫泻火散"进行了微米化处理,并对其临床药效进行了试验研究。结果表明:通过中草药微米化处理,与常规剂型相比,微米化蒙兽药"驱虫泻火散"的药效有了明显提高,微米处理后20 g的剂量就可达到未处理前常规剂型40 g剂量的药效;在40 g剂量时,可取得与化学药物伊克赛相近的驱虫效果,而且安全无副作用。相对化学药物伊克赛,蒙兽药"驱虫泻火散"还有较好的增重效果。 李锋 裴乐 杨宝龙 卢岩 侯勇跃 王还登 张振铎关键词:蒙兽药 增重效果 蒙兽药饲料添加剂“羊乐乐”对羊的驱虫与增重效果研究 被引量:1 2016年 为达到驱虫、促生长和不产生药物残留的三重效果,参考民间蒙兽药方剂设计生产出一种纯中药、无残留的绿色蒙兽药饲料添加剂产品"羊乐乐";并对其进行了羔羊育肥和淘汰母羊育肥期间不同添加剂量、不同添加时段、不同添加次数的饲喂效果对比试验。结果显示:在育肥羔羊饲料中每日添加15 g/只"羊乐乐",连续饲喂到出栏,有最佳的驱虫和增重效果;而淘汰母羊在寄生虫重度感染的情况下每日添加20 g/只"羊乐乐",连续饲喂21 d仍能发挥很好的驱杀寄生虫效果,同时,使用"羊乐乐"后试验羊的增重效果优于常规驱虫药物伊克赛注射液给药组。 李锋 裴乐 卢岩 杨宝龙 侯勇跃 张振锋 王还登 朝勒孟关键词:蒙兽药 饲料添加剂 驱虫效果 促生长作用 采用特异性探针药物法测定双峰驼CYP3A酶活性 被引量:6 2015年 【目的】探究双峰驼CYP3A酶体外活性及其对外源性药物代谢的影响。【方法】将双峰驼禁食过夜12 h,颈静脉放血处死后,立即于肝门静脉处采集块状肝脏组织,洗去血污称重匀浆后,采用Ca2+沉淀法制备双峰驼肝微粒体,并通过BCA法测定其蛋白含量。同时优化双峰驼肝微粒孵育体系,取不同浓度的双峰驼肝微粒体蛋白悬液(0.016、0.031、0.063、0.125、0.250、0.500、1.000、2.000 mg·m L-1)、不同浓度的探针药物咪达唑仑(MDZ)(7.813、15.625、31.250、62.500、125、250、500、1 000μg·m L-1)分别加入到孵育体系中,37℃预孵育5 min后,加入NADPH溶液后再孵育不同时间(0、2、5、10、15、20、25、30 min)。待反应完全后加入冰冷的甲醇和地西泮(DZP)溶液,涡旋混匀,800μL全部混合液体经14 500 r/min离心20 min后,取20μL上清液进行高效液相色谱紫外检测(HPLC-UV),确定最适底物浓度、最适酶浓度以及最适孵育时间。分别取浓度为7.813、15.625、31.250、62.500、125、250、500、1 000μg·m L-1 MDZ探针药物溶液20μL与双峰驼肝微粒体共同孵育15 min后,以混有内标DZP的冰冷甲醇终止反应,采用高效液相色谱紫外检测法测定反应产物1'-羟基咪达唑仑(1'-OHMDZ)的动态含量,计算出部分药物动力学参数。色谱条件:Sigma-Aldrich/Supelco Discovery C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为V(乙腈)﹕V(0.01 mol·L-1 PBS缓冲液)=40﹕60;等浓度洗脱20 min;检测波长为254 nm;流速为0.8 m L·min-1;柱温为30℃;进样量为20μL。【结果】使用Ca2+沉淀法制备的双峰驼肝微粒体保持了酶的良好活性,能满足后续体外药物代谢试验的基本要求,经BCA法测定其蛋白含量为(1.936±0.052)mg·m L-1。双峰驼肝微粒体蛋白悬液、探针药物MDZ、PBS缓冲液、Mg Cl2溶液以及NADPH溶液构成双峰驼肝微粒体孵育体系,随着孵育时间的延长,酶和底物进一步反应,当MDZ浓度为125μg·m L-1(终浓度为7.073 nmol·m L 裴乐 张文彬 哈斯苏荣关键词:双峰驼 CYP3A酶 高效液相色谱法 探针药物 双峰驼肝脏CYP3A亚酶活性的初步研究 2014年 CYP3A亚酶参与45%~60%常用药物的生物转化,在机体处置外源性物质的过程中发挥着重要作用。为了探讨双峰驼肝脏CYP3A亚酶活性,采用改进的钙离子沉淀法制备肝微粒悬液,并借助生物化学方法对双峰驼CYP3A亚酶活性进行了初步研究。结果表明,钙离子沉淀法制备的双峰驼肝微粒体蛋白含量为(1.541±0.264)mg/mL,CYP总酶含量为(0.412±0.063)nmol/mg,红霉素-N-脱甲基酶的活性为(1.159±0.001)nmol/(mg·min)。以上研究结果为今后借助探针药物检测双峰驼CYP3A亚酶的体外代谢活性的深入研究奠定了基础。 王学恩 裴乐 格日勒图亚 哈斯苏荣关键词:双峰驼 肝微粒体 前列腺素E2介导由金黄色葡萄球菌引起的奶牛子宫内膜组织损伤 被引量:1 2021年 旨在阐明前列腺素E2(PGE2)可诱导金黄色葡萄球菌所致奶牛子宫内膜组织损伤,为临床中合理使用非甾体类化合物治疗细菌性奶牛子宫内膜炎提供防治依据。以体外培养的奶牛子宫内膜组织作为研究对象,使用浓度为1×108 CFU/mL热灭活(heat-killed,HK)金黄色葡萄球菌刺激培养3d的奶牛子宫内膜组织,分别与无菌PBS、环氧合酶-2(COX-2)抑制剂CAY-10404、NS-398共培养,通过ELISA检测奶牛子宫内膜组织培养基中PGE2的分泌量。荧光定量PCR(q-PCR)、Western blot、免疫荧光(immunofluorescence,IF)检测奶牛子宫内膜组织中损伤相关因子:高迁移率蛋白-1(high mobility grope box protein 1,HMGB-1)、透明质酸酶结合蛋白-1(hyaluronidase binding protein 1,HABP-1)mRNA与蛋白的表达水平。不同试验组重复3次,收集不同处理组的奶牛子宫内膜组织,使用HE染色观察奶牛子宫内膜组织损伤程度。结果显示,热灭活金黄色葡萄球菌处理奶牛子宫内膜组织后,与空白对照组相比显著上调了PGE2蓄积量、HMGB-1及HABP-1的mRNA与蛋白表达量(P<0.05)。HE染色结果显示,热灭活金黄色葡萄球菌使奶牛子宫内膜腺上皮细胞发生皱缩。与热灭活金黄色葡萄球菌体外处理组相比较,与CAY-10404与NS-398共孵育后,显著下调了PGE2浓度、HMGB-1和HABP-1的mRNA与蛋白表达量(P<0.05),同时,奶牛子宫内膜组织腺上皮损伤程度下降。结果表明,金黄色葡萄球菌可造成奶牛子宫内膜组织的严重损伤;损伤相关因子HMGB-1、HABP-1与奶牛子宫内膜组织损伤程度呈正相关关系,同时,PGE2在体外诱导了金黄色葡萄球菌造成的奶牛子宫内膜组织损伤。 刘昆 曹金山 刘博 丁玉玲 裴乐 毛伟关键词:前列腺素E2 金黄色葡萄球菌 马β-防御素-1-ELP抑菌作用及其对SA113菌株感染小鼠相关免疫机制的研究 马β-防御素-1(Equineβ-defensin-1,eBD-1)作为防御素的家族的一员,广泛分布于马属动物体内。本课题组前期对eBD-1进行了原核表达,并证明eBD-1对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长具有抑制作用,然... 裴乐关键词:金黄色葡萄球菌 大肠杆菌与金黄色葡萄球菌对奶牛子宫内膜组织细胞因子表达及损伤程度的影响 被引量:9 2019年 本试验旨在研究体外感染金黄色葡萄球菌与大肠杆菌对奶牛子宫内膜组织中细胞因子白介素-6(IL-6)、IL-1β和IL-8的表达及损伤程度的影响。以体外培养的奶牛子宫内膜组织作为研究对象,采用1×10~5~1×10~9 CFU/mL大肠杆菌与金黄色葡萄球菌对奶牛子宫内膜组织进行体外感染,通过实时荧光定量PCR和ELISA方法检测两种细菌刺激后奶牛子宫内膜组织中IL-6、IL-1β及IL-8 mRNA与蛋白的表达量,并用HE染色法观察两种细菌感染后奶牛子宫内膜组织病理学切片。结果显示,1×10~5~1×10~9 CFU/mL大肠杆菌体外感染后,奶牛子宫内膜组织中IL-6、IL-1β和IL-8 mRNA表达量均极显著高于空白对照组(P<0.01);金黄色葡萄球菌感染浓度为1×10~5、1×10~6 CFU/mL时,IL-6、IL-1βmRNA表达量极显著高于空白对照组(P<0.01),感染浓度为1×10~7 CFU/mL时,IL-6、IL-1βmRNA表达量显著高于空白对照组(P<0.05),感染浓度为1×10~6 CFU/mL时,IL-8 mRNA表达量显著高于空白对照组(P<0.05),其他感染浓度均与空白对照组无显著差异(P>0.05)。奶牛子宫内膜组织感染1×10~5~1×10~9 CFU/mL金黄色葡萄球菌和大肠杆菌时,IL-6、IL-1β及IL-8蛋白表达量均极显著高于空白对照组(P<0.01)。相同浓度的大肠杆菌感染奶牛子宫内膜组织后,IL-6、IL-1β及IL-8 mRNA与蛋白表达量均极显著高于金黄色葡萄球菌感染组(P<0.01)。HE切片染色结果显示,大肠杆菌感染后仍有部分上皮细胞保留,而金黄色葡萄球菌感染后上皮细胞全部脱落。本试验结果表明,大肠杆菌与金黄色葡萄球菌感染奶牛子宫内膜组织后,引起的炎症反应不同。大肠杆菌感染后,促炎性细胞因子被显著上调,而金黄色葡萄球菌感染后破坏子宫内膜上皮细胞程度更加严重。 刘昆 毛伟 李婷婷 刘博 关红 裴乐 曹金山关键词:大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 双峰驼CYP3A酶体外活性检测方法的建立 细胞色素P450(CYP450)酶系是降解外来化学物质和药物代谢所必需物质,而CYP3A是CYP家族中最主要的功能形式。本研究将初步建立双峰驼肝微粒体细胞色素CYP3A药物代谢检测平台,对钙离子沉淀法制备的肝微粒体蛋白含... 裴乐 张文彬 巴拉 哈斯苏荣关键词:双峰驼 肝微粒体 CYP3A 体外代谢 文献传递 双峰驼CYP3A酶体外活性及其对探针药物代谢的影响 CYP3A酶参与机体内源性物质和外源性物质的生物转化,在调节机体与外环境的相互作用以及保持机体内环境稳态中发挥着重要作用。双峰驼是国家二级保护动物,但有关它适应恶劣环境的独特生物学特性,以及对外源性药物和毒物的处置能力等... 裴乐关键词:双峰驼 肝微粒体 CYP3A酶 探针药物 文献传递