张薇
- 作品数：9 被引量：28H指数：3
- 供职机构：宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏高等学校科学技术研究项目国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- p53抑制剂PFT-α对犬博卡病毒感染致靶细胞病变的影响
- 2015年
- 目的探讨p53抑制剂(pifithrin alpha,PFT-α)对犬博卡病毒(minute virus of Canine,MVC)感染致WRD细胞(walter reed canine,WRD)病变的影响。方法首先MVC感染WRD细胞72h后,DAPI染色并观察靶细胞的形态学变化;给予不同浓度梯度的PFT-α处理WRD细胞,MTS法检测PFT-α对WRD细胞的毒性作用,以确定PFT-α的安全使用剂量;利用安全剂量的PFT-α分别采取提前(MVC感染前1h)或同时与病毒感染靶细胞,MTS试剂法检测PFT-α加入的不同方式对博卡病毒MVC感染致靶细胞病变的影响;以不同MVC感染复数(multiplicity of infection,MOI)处理WRD细胞,观察PFT-α在安全剂量和最佳处理方式作用下对MVC感染致靶细胞WRD病变的影响。结果 MVC感染致WRD细胞发生明显的凋亡等病理性改变;20μmol·L-1的PFT-α浓度是WRD细胞的安全使用剂量;安全剂量的PFT-α加入能够明显提高受感染细胞的细胞活力,与对应感染组相比差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 PFT-α能够降低犬博卡病毒感染致WRD细胞病变的程度。
- 张薇何丽萍李建宁孙玉宁
- 关键词：博卡病毒细胞病变
- 犬博卡病毒非结构基因NP1多克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的:制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘肽S-转移酶(GST)-NP1蛋白。用亲和层析纯化的融合蛋白免疫大白兔,制备NP1抗血清并用ELISA法测定抗血清效价。采用Western blotting和免疫荧光法检测NP1抗血清的特性。结果:成功构建MVC NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物经亲和层析纯化后得到高纯度的NP1融合蛋白,以其免疫大白兔获得NP1多抗血清,ELISA法检测效价达到1∶400 000。Western blotting法及免疫荧光检测,所得抗血清具有较高的效价及特异性。结论:本研究利用原核表达的MVC GST-NP1融合蛋白制备的NP1抗血清效价高、特异性高,为进一步深入研究NP1在MVC感染及致病分子机制中的作用奠定了基础。
- 闫琰张茜马婧李建宁张薇孙玉宁
- 关键词：多克隆抗体
- 犬转铁蛋白受体基因的沉默及稳定感染细胞系的建立
- 2016年
- 目的通过构建沉默犬转铁蛋白受体(TfR)基因慢病毒载体并感染Walter Reed犬(WRD)细胞,建立稳定感染沉默犬TfR基因的细胞系。方法构建2条针对犬TfR基因的特异性短发夹RNA(shRNA),用慢病毒载体转染HEK293T细胞,包装、收集病毒并测定其滴度。用包装好的慢病毒感染WRD细胞,用实时荧光定量PCR和Western blot法检测TfR的mRNA和蛋白的表达水平以评价干扰效率,筛选沉默效果较好的靶点,并建立稳定沉默TfR基因的WRD/TfR-细胞系。结果成功构建出TfR小干涉RNA慢病毒载体,成功包装2种不同靶点的沉默TfR基因的RNA干扰慢病毒,测定其病毒滴度均达到1×108转导单位(TU)/m L。选用沉默效果较好的p GMLV-TfR A2载体,建立TfR小干涉RNA慢病毒载体稳定感染的WRD/TfR-细胞系。结论成功构建TfR小干涉RNA慢病毒载体并建立了稳定感染WRD/TfR-细胞系。
- 白鲁根李芳张薇闫琰朱燕妮孙玉宁
- 关键词：TFRRNA干扰慢病毒载体
- 稳定表达犬转铁蛋白受体CHO细胞系的建立和鉴定被引量：3
- 2017年
- 目的构建犬转铁蛋白受体(transferrin receptor,TfR)的真核表达载体,转染中国仓鼠卵巢CHO细胞,建立稳定表达犬TfR的CHO-TfR细胞系。方法从犬腺细胞系(WRD)提取总RNA,逆转录合成cDNA,采用PCR方法扩增TfR基因,将其克隆至真核表达载体pCDNA3,酶切和测序鉴定;利用脂质体法转染CHO细胞,通过RT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测TfR的表达。结果构建的pCDNA3-TfR重组质粒经过酶切和测序鉴定,TfR基因序列成功插入到pCDNA3载体,且无突变。转染CHO细胞后,RT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测TfR表达阳性,成功建立了稳定表达犬TfR的CHO-TfR细胞系。结论成功构建了真核表达载体pCDNA3-TfR,并获得了稳定表达TfR的CHO-TfR细胞系。
- 张薇闫琰白鲁根朱燕妮黄菱孙玉宁
- 关键词：转铁蛋白受体CHO细胞真核表达载体
- 增强CT直方图分析鉴别甲状腺良恶性结节被引量：12
- 2020年
- 目的观察基于CT平扫和增强图像直方图特征鉴别诊断甲状腺良恶性结节的价值。方法回顾性分析经手术后病理证实的甲状腺结节患者132例,共140个结节。选取轴位病灶最大层面,采用Mazda软件沿病灶边缘勾画ROI并进行直方图分析,获取9个参数,比较良恶性结节的差异,并以ROC曲线分析差异有显著统计学意义的灰度直方图参数对甲状腺良恶性结节的鉴别诊断效能。结果CT平扫恶性结节均值及第10、50、90百分位数高于良性结节(P均<0.05);增强后恶性结节均值及第1、10、50、90百分位数高于良性结节(P均<0.05),良性结节方差高于恶性结节(P<0.05)。两者偏度、峰度、第99百分位数在CT平扫和增强中差异均无显著统计学意义(P均>0.05)。CT平扫和增强直方图参数中,第10百分位数AUC最高,为0.68,鉴别甲状腺良恶性结节的敏感度和特异度分别为74.32%和62.12%。结论CT直方图分析可作为鉴别甲状腺良恶性结节的重要辅助手段。
- 马俊丽段立娜张薇戈锐王志军
- 关键词：甲状腺结节直方图分析
- 枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1表达并降低MMP-9及HIF-1α表达被引量：7
- 2016年
- 目的监测在缺氧条件下进行枸杞多糖处理后肺血管平滑肌细胞中沉默接合型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达。方法血管平滑肌细胞分为常氧(200 m L/L O2)培养的正常细胞、2μmol/m L枸杞多糖处理的常氧细胞、DMSO处理的常氧细胞、DMSO处理的缺氧(100 m L/L O2)细胞、(0.5、1、2)μmol/m L枸杞多糖处理的缺氧细胞、SIRT1的特异性激动剂10μmol/L白芦藜醇处理的缺氧细胞、非特异性激动剂1μmol/L SRT-1720处理的缺氧细胞、SIRT1抑制剂0.5μmol/L EX-527处理的缺氧细胞,培养于6、12、24 h,实时定量PCR、Western blot法分别检测SIRT1、MMP-9及HIF-1α的mRNA和蛋白表达;在缺氧的血管平滑肌细胞中加入枸杞多糖处理12 h,实时定量PCR、Western blot法分别检测血管平滑肌细胞中SIRT1、MMP-9及HIF-1α的表达。结果缺氧条件下血管平滑肌细胞SIRT1mRNA和蛋白水平降低,MMP-9及HIF-1αmRNA和蛋白水平升高。缺氧条件下用枸杞多糖处理后,SIRT1的含量随枸杞多糖剂量的增加而增加,同时MMP-9、HIF-1α的含量降低。SIRT1的特异性激动剂白藜芦醇可抑制MMP-9的表达。结论枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1水平、降低MMP-9及HIF-1α的水平。
- 朱燕妮孙玉宁关文霞闫琰张薇白鲁根孔海涛李芳
- 关键词：枸杞多糖肺动脉平滑肌细胞
- 犬博卡病毒结构基因VP2多克隆抗体的制备与应用被引量：2
- 2016年
- 目的构建犬博卡病毒(CBV)结构蛋白VP2的兔抗VP2多克隆抗体并进行特异性鉴定。方法应用PCR方法扩增获得CBV结构蛋白VP2 C末端区域300个氨基酸所对应的基因片段。经双酶切和测序分析后,连接到原核表达载体p ET-32a(+),构建重组质粒p ET-32a(+)-VP2,转化至E.coli BL21中,异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物SDS-PAGE分析鉴定;纯化融合蛋白后免疫新西兰家兔,制备多克隆抗体,检测抗体效价及特异性。结果通过酶切和测序证实成功构建原核表达载体p ET-32a(+)-VP2,转化后可以成功诱导并纯化出大小与预期一致的蛋白;制备的多克隆抗体经ELISA检测效价达到1∶6 400 000,Western blot法及免疫荧光染色鉴定抗体的特异性。结论成功制备了抗CBV结构蛋白VP2的多克隆抗体。
- 张茜闫琰马婧李建宁张薇黄菱孙玉宁
- 关键词：多克隆抗体
- CT肺动脉栓塞指数与急性肺栓塞危险分层及病情严重程度的相关性研究
- 目的研究CT肺动脉栓塞指数(PAOI)与急性肺栓塞(APE)危险分层的相关性,评估PAOI对APE患者病情严重程度的指导作用。方法1、纳入263例初次就诊并经CT肺动脉造影确诊的APE患者,根据2019年欧洲心脏病协会(...
- 张薇
- 关键词：急性肺栓塞病情严重程度
- 螺旋CT对乳腺癌辅助治疗后肺损伤的评估
- 目的探讨螺旋CT对乳腺癌辅助治疗后肺损伤的评估分级及相关危险因素。方法回顾性分析2018年1月至2020年12月就诊于XXX医院经病理确诊为乳腺癌并行辅助治疗的患者共119例,所有患者在手术前、后以及辅助治疗前后均行胸部...
- 张薇
- 关键词：乳腺癌肺损伤
- 文献传递
