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刘彪
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重组创伤弧菌溶细胞素诱导THP-1细胞损伤的机制研究
2013年
目的:研究重组创伤弧菌溶细胞素(rVvhA)对人单核细胞白血病细胞(THP-1)的损伤机制及其钙离子通道的研究。方法采用倒置显微镜、CCK-8法、Fluo3/AM法、caspase 活性检测等方法测定rVvhA对THP-1细胞的影响,并研究胞外Ca2+的内流途径。结果 rVvhA作用后细胞形态学变化明显,细胞皱缩、变形甚至裂解,且呈剂量依赖性。12μg/ml rVvhA 作用THP-1细胞1 h后胞外K+浓度升高,作用6 h后胞外LDH浓度显著升高。 Verapamil、Mibefradil和SKF-96365均不能抑制rVvhA引起的Ca2+内流。同时rVvhA可导致THP-1细胞的caspase-3和caspase-9活性升高,并呈时间依赖性。结论 rVvhA对THP-1细胞具有明显的损伤作用,且可能通过caspase-9/3途径诱导细胞凋亡,并能引起细胞内Ca2+浓度升高,升高的Ca2+可能通过细胞膜上形成的孔道被动入胞。
陆晓雅
陈建林
刘彪
谢旦立
楼永良
关键词:
细胞损伤
钙离子通道
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