王珂
- 作品数:33 被引量:239H指数:10
- 供职机构:中国人民解放军第一军医大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- hBMP_7基因转染对兔骨髓间充质干细胞增殖及胶原合成的影响被引量:9
- 2002年
- 使用含hBMP7基因的重组逆转录病毒液感染兔骨髓间充质干细胞 (BMSc) ,MTT法检测细胞增殖能力 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,3 H脯氨酸掺入法检测Ⅰ型胶原合成和表达情况。结果显示 ,经hBMP7基因转染的BMSc与空载体转染及未转染的BMSc在细胞增殖、细胞周期表现方面无显著性差异 ,经转染的BMSc合成胶原显著高于空载体转染和未转染者。提示采用逆转录病毒介导转染BMSc后能促进细胞的胶原合成 ,对BMSc增殖和细胞周期无显著影响 。
- 金丹裴国献齐凤菊胡罢生魏宽海王珂陈滨
- 关键词:骨髓间充质干细胞胶原合成骨形态发生蛋白质类生物医学工程成骨细胞
- 逆转录病毒介导hBMP_7基因转染兔骨髓间充质干细胞的表达被引量:6
- 2002年
- 采用粘 粘端连接方法构建hBMP7逆转录病毒载体 ,重组质粒转染包装细胞PT6 7后 ,制备含目的基因的重组逆转录病毒液感染兔骨髓间充质干细胞。限制性内切酶酶切分析筛选插入方向正确的重组质粒并进行基因测序。结果显示 ,hBMP7逆转录病毒载体中外源基因插入方向正确、无碱基错误和缺失。原位杂交和免疫组织化学检测表明 ,感染后 2天经基因转染的BMSc原位杂交和免疫组化检测结果呈阳性 ,未经转染的细胞检测结果呈阴性。转染的BMSc经G4 18筛选至 4周仍有外源BMP蛋白的表达。提示采用逆转录病毒介导方法转染的BMSc中可有外源性BMP7mRNA和蛋白的表达。
- 金丹曾位森裴国献胡罢生魏宽海王珂陈滨
- 关键词:逆转录病毒骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白质类生物医学工程
- 肌瓣作为BMP载体构建血管化骨组织修复骨缺损的形态学研究被引量:3
- 2002年
- 为探讨肌瓣作为骨形态发生蛋白 (BMP)载体构建血管化骨组织修复骨缺损的可行性及其生物学特征 ,制作兔桡骨下段15mm骨缺损 ,将去神经化的指深屈肌肌瓣转位至缺损区 ,作为BMP载体来修复骨缺损 ,通过大体、X线、组织学、原位末端标记 (TUNEL)等方法观察骨缺损的修复过程及生物学变化。结果发现 ,骨骼肌逐渐发生萎缩 ,2周时肌瓣内可触及串珠状团块 ,有大量软骨细胞生成 ,沿肌间隙分布 ;6周时骨桥与宿主骨紧密结合 ,软骨溶解区有大量编织骨形成 ,出现骨髓腔并与宿主骨髓腔再通 ,肌纤维被增殖的间充质细胞、软骨细胞及结缔组织所分割 ;8周时肌纤维几乎完全消失 ,新生骨组织呈条索状桥接两断端 ;组织学显示骨骼肌萎缩的同时 ,部分细胞核出现崩解 ,并有凋亡小体出现 ;TUNEL染色呈阳性。
- 魏宽海裴国献王珂田雪梅金丹陈滨郑晓勇马忠立
- 关键词:肌瓣形态学新生血管化骨缺损
- 大鼠同种异体肢体移植急性排斥反应动物模型的制作被引量:22
- 2002年
- 目的 建立同种异体肢体移植的动物模式。 方法 Wistar大鼠的肢体移植给SD大鼠 ,术后抗炎 ,显微外科常规护理 ,观察移植后宿主及移植物的变化。 结果 大鼠的异体肢体移植 8例 ,成功 6例 ;移植物的排斥反应再现稳定 ,生存时间为 (14± 2 )d。 结论 Wistar→SD大鼠的同种异体肢体移植模型的建立 。
- 马忠立裴国献张敬良朱立军王珂陈滨魏宽海胡罢生
- 关键词:同种异体肢体移植急性排斥反应动物模型器官移植
- 筋膜瓣促组织工程骨体内再血管化的实验研究被引量:30
- 2002年
- 为探讨筋膜瓣是否具有促组织工程骨修复羊负重骨大段骨缺损及其体内再血管化的作用 ,将 2 7只中国青山羊分为 3组 :单纯材料组 (珊瑚羟基磷灰石 ,CHAP)、组织工程骨组 (CHAP +经诱导分化的骨髓基质干细胞BMSc)、筋膜瓣组 (筋膜包裹CHAP +经诱导分化的BMSc)。制备单侧胫骨中段 2 0mm的骨膜与骨缺损 ,术后 2、4、8周行放射性核素骨显像 (ECT)检查 ,4、8、12周X线检查、组织学检查。结果显示 :术后修复骨缺损的能力和再血管化的程度由高到低依次为筋膜瓣组、组织工程骨组、单纯材料组。说明筋膜瓣对组织工程骨体内的再血管化过程有明显的促进作用。
- 陈滨裴国献王珂金丹魏宽海任高宏
- 关键词:生物医学工程骨缺损珊瑚羟基磷灰石筋膜瓣
- 用组织工程方法修复山羊胫骨骨缺损的实验研究被引量:12
- 2002年
- 制备组织工程用山羊胫骨骨缺损模型 ,研究用组织工程的方法修复山羊胫骨骨缺损的可行性。2 7只中国青山羊制备单侧胫骨中段 2 0mm的骨膜与骨缺损 ,7孔钢板内固定 ,随机分 3组 :空白组不进行植入处理 ;对照组 (CHAP组 )单纯植入羟基磷灰石 (CHAP) ;实验组 (CHAP/BMSc组 )植入CHAP与骨髓基质细胞 (BMSc)的复合物。术后 4、8、12周放射学检查X线片光密度指数比值、组织学方法评价各组骨缺损修复情况 ,12周CHAP/BMSc组与CHAP组做压应变与三点弯曲实验 ,评价骨缺损修复后的生物力学性质。结果显示 ,术后4、8、12周X线片光密度指数比值空白组无明显变化 ,CHAP组低于CHAP/BMSc组 (P <0 0 5 ) ;组织学切片显示CHAP/BMSc组成骨较CHAP组早、多 ;12周三点弯曲实验载荷、弯曲应力CHAP/BMSc组高于C组 (P <0 0 5 )。提示山羊胫骨 2 0mm骨与骨膜缺损不能自行修复 ,可满足骨组织工程大动物实验需要 ;CHAP与BMSc复合修复骨缺损在成骨时间、成骨量与质量上均优于单纯CHAP。
- 王珂裴国献陈滨金丹魏宽海
- 关键词:山羊胫骨骨缺损生物医学工程珊瑚羟基磷灰石骨髓基质细胞
- 复合材料为支架的组织工程骨修复羊胫骨骨缺损的实验研究被引量:7
- 2002年
- 目的探讨复合材料为支架的组织工程骨修复羊胫骨骨缺损的可行性。方法利用聚乳酸与磷酸三钙复合材料复合经培养的骨髓基质细胞形成组织工程化骨来修复羊胫骨3cm的骨缺损,并以X线,组织学切片进行观察。结果组织工程化骨表现出较强的成骨能力,在12周时以基本修复羊胫骨3cm的骨缺损。结论展示出复合材料在修复骨缺损过程中的广阔前景。
- 陈滨裴国献王珂周长忍汤顺清石海涛
- 关键词:复合材料组织工程骨
- 山羊胫骨大段骨缺损的组织工程骨修复及放射性核素显像监测被引量:15
- 2002年
- 目的探讨组织工程骨对山羊大段骨缺损的修复能力及放射性核素骨显像技术在此过程中的监测效果。方法将27只中国青山羊,分为组织工程骨组、人工骨组和对照组(每组9只)并分别造成左侧胫骨2cm骨缺损。对组织工程骨组缺损区植入珊瑚羟基磷灰石(CHAP)和骨髓基质干细胞(BMSc)复合体,人工骨组植入CHAP,对照组则不植入任何填充物。采用放射性核素骨显像于术后2、4、8周监测各组骨修复情况。结果通过放射性核素骨显像测定的感兴趣区(ROI)计数和T/NT比值显示:对照组在各时间点均未见再血管化的表现及明显的成骨活动;人工骨组随着时间的延长其血管再生的数量和成骨的质量呈现出上升的趋势;组织工程骨组上升趋势更为显著。结论组织工程骨较人工骨具有更佳的修复大动物大段骨缺损的能力,放射性核素骨显像在修复过程中有比较准确的预测效果。
- 陈滨裴国献王珂范义湘金丹魏宽海
- 关键词:骨再生组织学技术胫骨缺损骨修复
- 成人成骨细胞与珊瑚羟基磷灰石的体外生物相容性被引量:16
- 2002年
- 目的研究成人骨髓成骨细胞与珊瑚羟基磷灰石(carollinehydroxyapatite,CHA)在体外培养条件下的生物相容性。方法抽取健康成人骨髓组织,置于含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养基中培养,传代后改用含地塞米松β-甘油磷酸钠和维生素C的条件培养基培养,分为CHA复合细胞组和单纯细胞组,不同时间用倒置相差显微镜、HE染色光镜及扫描电镜观察。MTT法进行细胞增殖测定,并进行细胞微量蛋白含量和碱性磷酸酶的定量检测。结果成人骨髓成骨细胞体外培养时复合或不复合CHA均生长良好,表现出典型成骨细胞的形态特征和生物学特性,CHA利于细胞的贴附、生长与增殖,并对细胞的功能无不良影响。结论CHA是较理想的骨组织工程支架材料,成骨细胞复合CHA用于骨缺损的修复,具有广阔的临床应用前景。
- 任高宏裴国献顾立强王珂金丹魏宽海陈滨莫晓红
- 关键词:珊瑚羟基磷灰石细胞培养生物相容性材料成骨细胞
- 骨形成蛋白对骨骼肌卫星细胞增殖与胶原蛋白合成的影响被引量:3
- 2002年
- 目的 探讨骨形成蛋白 (BMP)对骨骼肌卫星细胞增殖与胶原蛋白合成的影响。 方法 体外获取与培养 Wistar大鼠骨骼肌卫星细胞 ,分别用含 BMP浓度为 0、50、1 0 0、50 0和 1 0 0 0 ng/ml的诱导培养基培养 72小时。通过 MTT法测定细胞的增殖 ,光镜观察细胞融合率 ,3 H-脯氨酸掺入法测定细胞胶原蛋白合成量。 结果 BMP可促进骨骼肌卫星细胞的增殖 ,降低其细胞融合率 ,同时增加胶原蛋白的合成量。这种作用在 BMP浓度为 50 0 ng/ml即可表现出来 ,并随着浓度的增加越明显。 结论 BMP可促进骨骼肌卫星细胞的增殖 。
- 魏宽海裴国献金丹王珂陈滨马忠立胡罢生
- 关键词:细胞增殖骨形成蛋白骨骼肌卫星细胞胶原蛋白