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重组人单链白细胞介素12融合基因的构建、真核表达及生物学活性测定: 2000年; 目的　探讨用生物学技术获取具有生物学活性的重组人白细胞介素 12 (rhIL 12 )的方法。方法　从经佛波醇酯 (PDBu)刺激的EB病毒转化的人B淋巴母细胞株NC 37中提取mRNA ,经逆转录聚合酶链反应分别获得hIL 12p40和p35亚单位编码序列的cDNA ,运用重组聚合酶链反应技术 ,将两段基因通过多肽接头 (Gly4Ser) 3 DNA序列连接后进行基因重组 ,构建了重组人单链IL 12融合基因 (rh scIL 12 )。进一步将rhscIL 12融合基因插入pcDNA3 .1(+ )真核表达载体中 ,构建rhscIL 12真核表达载体 [pcDNA3 .1(+ ) rhscIL 12 ],转染COS 7细胞。结果　经G418筛选获COS rhscIL 12融合蛋白稳定表达株。Westernblot显示该融合蛋白相对分子质量为 70× 10 3,可与鼠抗人IL 12p40 p70单克隆抗体特异性结合。生物学活性测定表明 ,rhscIL 12融合蛋白具有促进外周血淋巴细胞增殖、增强NK细胞活性及提高IFN γ产生等功能。结论　用rhscIL 12融合基因构建的表达载体表达的rhscIL 12融合蛋白具有很高的生物学活性 ,为rhscIL 12的基因治疗奠定了基础。; 张梅司履生金莉王一理耿宜苹; 关键词：白细胞介素12 融合基因真核表达生物学

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张梅