黄珊珊
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 电磁场作用下大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化与增殖被引量：5
- 2015年
- 目的研究15Hz 1 mT的正弦波电磁场对大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）的细胞外信号调节激酶（ERK）和丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）p38的激活规律及相互作用特点，探讨ERK和p38MAPK信号通路在电磁场促成骨效应中的作用。方法选取第3代体外分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞，分为对照组、曝磁组、曝磁＋PD98059组和曝磁＋SB202190组四个大组。曝磁组细胞置于带有电磁发生器的培养箱中培养，曝磁＋PD98059组和曝磁＋SB202190组细胞分别加入ERK信号通路阻断剂PD98059和p38MAPK信号通路阻断剂SB202190后再置入带有电磁发生器的培养箱中培养，对照组细胞正常培养。用免疫印迹（Western blot）法检测ERK和p38 MAPK的蛋白表达及磷酸化水平变化。按照细胞碱性磷酸酶（ALP）试剂盒说明书操作步骤对各组细胞ALP活性进行检测，其活性变化可间接反映细胞的分化成骨活性；用噻唑蓝比色法检测各组细胞的增殖活性变化。结果①电磁场作用下，骨髓间充质干细胞内p38 MAPK信号通路可被快速激活，曝磁15min后出现p38磷酸化水平升高（P〈0．05）；加用SB202190后，再行电磁场刺激，细胞内p38磷酸化水平仍然维持在较低水平，与曝磁组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。②与对照组比较，曝磁5d后细胞内ALP活性显著升高（P〈0．05），SB202190可明显阻断该效应（JP〈0．05）。③与对照组比较，曝磁3d后骨髓间充质干细胞的增殖活性明显升高（P〈0．05），SB202190不能阻断该效应（曝磁＋SB202190组与曝磁组比较，P〉0．05）。④SB202190阻断p38 MAPK信号通路并曝磁5min后，ERK MAPK磷酸化水平明显强化（P〈0．05）；PD98059阻断ERK MAPK信号通路并曝磁30min后，p38 MAPK磷酸化水平明显强化（P〈0．05）。结论ERK和p38 MAPK信号通路分别参与了电磁场对骨髓间充质干细胞增殖和分化成骨过程的调节，�
- 朱波吴华黄珊珊赵东明
- 关键词：电磁场间质干细胞丝裂原激活蛋白激酶类P38丝裂原活化蛋白激酶类
- 体外培养大鼠骨髓间充质干细胞成骨基因表达谱的检测被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)成骨相关基因的表达谱,明确体外培养大鼠骨髓MSC的成骨潜能。方法:体外培养SD大鼠骨髓MSC,取第3代细胞提取总核糖核酸(RNA),制备杂交探针,并运用SuperArray公司提供的大鼠Oligo GEArray骨再生基因芯片(每张芯片可测113种基因)进行杂交,化学发光检测,通过X线胶片或台式扫描获得化学发光的芯片图像,使用网上提供的综合型GEArry表达分析配套软件(GEArryExpression Analysis Suite)进行完整的芯片数据分析。结果:检测体外培养大鼠骨髓MSC的113种成骨相关的基因,其中有31种基因表达强度较低,45种基因呈中等强度表达,37种基因表达强度较高。结论:体外培养大鼠骨髓MSC具有部分成骨细胞基因表型特征,但成熟成骨细胞的特征基因表达量较低,提示大鼠MSC是具有较强成骨细胞分化潜能的成纤维样细胞。
- 赵东明吴华杨勇黄飞赵文春黄珊珊
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 一个常染色体显性遗传性Ⅱ型石骨症家系的临床和遗传学分析及文献复习被引量：3
- 2015年
- 石骨症（osteopetrosis）是一种临床少见的先天性骨发育障碍性疾病,通常表现为破骨细胞的功能缺陷以及由此引起的骨重吸收下降、骨密度升高、软骨基质钙化[1],有家族遗传性。据目前报道有10种以上基因的突变可导致石骨症。石骨症的遗传方式有三种形式,常染色体隐性遗传、常染色体显性遗传以及X染色体相关性遗传。其中,X染色体相关性遗传的病例极为罕见,常染色体显性遗传的病例较为常见。
- 黄珊珊赵东明
- 关键词：石骨症遗传学分析发育障碍性疾病软骨基质先证者
- 大鼠少突胶质前体细胞(OPCs)纯化培养及糖氧剥夺(OGD)模型的建立
- 2015年
- 目的建立大鼠脑少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)分离纯化培养及糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型。方法出生3d内的SD大鼠乳鼠取脑,经胰蛋白酶消化法培养混合胶质细胞,混合培养10d后,震摇及差速贴壁法分离纯化OPCs,纯化培养3d后鉴定、诱导分化OPCs为少突胶质细胞(oligodendrocyte,OL)及进一步OGD干预。免疫荧光法鉴定OPCs纯度及分化为OL的能力;MTT法检测OGD(37℃,1%O2,5%CO2)干预0.5h、1h、2h及4h时细胞活力改变,Edu染色检测细胞增殖情况。结果免疫荧光显示纯化培养的OPCs 95%以上表达NG2+A2B5,且可分化为MBP阳性的OL。OGD 2h时,MTT显示细胞活力明显下降,Ed U染色阳性率明显降低。结论震摇及差速贴壁法可获得高纯度的OPCs,且细胞具有分化为OL的能力。2h可作为OPCs OGD模型缺血缺氧损伤合适时间。
- 付佩彩黄珊珊唐荣华赵东明
- 关键词：少突胶质前体细胞EDU
- 电磁场激活细胞外信号调节激酶通路在骨髓间充质干细胞增殖与分化成骨中的作用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨电磁场作用于大鼠骨髓间充质干细胞对细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的影响，并进一步研究电磁场诱导所致ERK信号通路变化在骨髓间充质干细胞增殖与分化成骨中的作用。方法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞，取第3代细胞，分为对照组、暴磁组、PD98059组和PD98059＋暴磁组。采用Westernblotting法检测ERK通路的活性变化，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组细胞的增殖活性，按照碱性磷酸酶（ALP）试剂盒说明书步骤检测各组细胞ALP活性。结果①暴磁后5min，ERK1／2磷酸化水平即明显高于对照组，1h后仍处于较高水平（P〈0．01）；PD98059作用可明显抑制ERK1／2磷酸化水平的升高，提示PD98059可有效阻断ERK通路的激活。②MTT法检测结果提示，暴磁后细胞的增殖活性明显升高，PD98059可明显抑制这种效应。③暴磁组ALP活性明显高于对照组，PD98059＋暴磁组ALP活性较暴磁组高（P〈0．01），差异有统计学意义。结论在15Hz、1mT的正弦波电磁场作用下，骨髓间充质干细胞ERK信号通路很快被激活，引起细胞增殖活性和ALP活性的改变，这为进一步研究磁场对骨髓问充质干细胞的促增殖和分化成骨机制提供了指导意义。
- 赵东明吴华黄珊珊黄飞赵文春杨勇陶超雄
- 关键词：电磁场骨髓间充质干细胞细胞增殖
