林娟
- 作品数：10 被引量：28H指数：3
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- MEK1/2抑制剂U0126逆转伊马替尼耐药细胞株K562R对伊马替尼耐药的研究
- 目的：探讨MEK1/2抑制剂U0126逆转伊马替尼耐药细胞株K562R对伊马替尼(IM)的耐药及可能的机制.方法：MTT法检测IM、U0126单用或联合对K562和K562R细胞的增殖抑制率，计算IC5o值和药物联合作用...
- 林娟龚玉萍
- 关键词：伊马替尼耐药机制增殖抑制率
- 文献传递
- 冬凌草甲素抗Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病效应的实验研究被引量：9
- 2012年
- 目的探讨冬凌草甲素对Ph染色体阳性（Pb＋）急性淋巴细胞白血病（ALL）的抗白血病效应及其机制。方法以Ph＋ALL细胞株SUP—B15为研究对象，应用改良MTT法测定冬凌草甲素对SUP—B15细胞增殖的影响，计算72h的半数抑制浓度（IC50）；光学显微镜下观察冬凌草甲素处理后SUP—B15细胞的形态学变化；用流式细胞术检测药物作用前后SUP—B15细胞的凋亡率；以K562细胞为对照，应用Westernblot法比较药物作用前后SUP—B15细胞Akt／mTOR、Raf／MEK／ERK、STAT5信号转导通路活化水平，以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果①冬凌草甲素呈浓度及时间依赖地抑制SUP—B15细胞增殖，作用72h的IC50值为（7．08±1．21）μmol／L；②冬凌草甲素处理24h后光学显微镜下SUP—B15细胞边界不清晰，部分细胞崩解；③0、5、10μmol／L冬凌草甲素作用24h后，SUP—B15细胞凋亡百分率分别为（6．67±0．83）％、（18．30±1．79）％、（37．63±7．12）％；④冬凌草甲素明显抑制SUP-B15细胞ABL酪氨酸激酶及其下游Akt／mTOR、Raf／MEK／ERK、STAT5多条信号转导通路的活化；下调SUP．B15细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，上调促凋亡蛋白Bax的表达。结论冬凌草甲素通过抑制ABL酪氨酸激酶及其下游Akt／mTOR、Raf／MEK／ERK、STAT5信号转导，以及上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2而发挥抗Ph＋ALL作用。
- 郭勇单卿卿龚玉萍林娟杨曦周睿卿
- 关键词：淋巴细胞急性费城染色体冬凌草素细胞内信号肽和蛋白质类
- 柔红霉素联合雷帕霉素对急性白血病原代细胞增殖作用的影响被引量：1
- 2011年
- 雷帕霉素（Rapamycin，RPM）是一类从吸水性链霉菌中分离的大环内酯类抗生素，是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的特异性抑制剂，因其强效的免疫抑制和抗细胞增殖活性已广泛用于器官移植后急性排异反应的防治。
- 何光翠龚玉萍林娟杨曦周睿卿郭勇
- 关键词：雷帕霉素靶蛋白细胞增殖作用急性白血柔红霉素特异性抑制剂急性排异反应
- 冬凌草甲素抗T细胞急性淋巴细胞白血病效应的实验研究被引量：5
- 2014年
- 目的探讨冬凌草甲素对T细胞急性淋巴细胞白血病的抗白血病效应及其机制。方法以T细胞急性淋巴细胞白血病细胞株CEM为研究对象,应用改良MTT法测定不同浓度及不同时间冬凌草甲素对CEM细胞增殖和生存率的影响,计算72h的半数抑制浓度(IC50);显微镜下观察5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素处理24h后CEM细胞的形态学变化;流式细胞术检测0.5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素作用24h后CEM细胞的凋亡百分率;应用Western blot法检测7.5μmol/L冬凌草甲素作用后细胞mTOR、P70、4EBP1、RAF、ERK、STAT5信号蛋白水平,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果 1冬凌草甲素呈浓度及时间依赖性抑制CEM细胞增殖,作用72h的IC50值为(7.37±1.99)μmol/L;2 5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素作用24h后CEM细胞边界不清晰,部分细胞崩解,且浓度越高,细胞形态改变越明显;3 0、5、7.5、10μmol/L冬凌草甲素作用24h后,细胞凋亡百分率分别为(4.8±2.11)%、(19.03±2.54)%、(40.27±3.31)%;(57.23±6.69)%;4冬凌草甲素明显抑制CEM细胞mTOR、P70、4EBP1、RAF、ERK、STAT5信号蛋白的活化;下调CEM细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达。结论冬凌草甲素可能通过抑制mTOR/P70(4EBP1)、RAF/ERK、STAT5信号蛋白的活化,以及上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2而发挥抗白血病作用。
- 郭勇单卿卿龚玉萍林娟杨曦
- 关键词：抗白血病效应冬凌草甲素AKT/MTORSTAT5
- 冬凌草甲素对急性单核细胞白血病细胞株THP-1的作用研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨冬凌草甲素对急性单核细胞白血病细胞株THP-1的抗白血病效应及其作用机制。方法以急性单核细胞白血病细胞株THP-1为研究对象,应用改良四甲基偶氮唑盐法测定4、6、8μmol/L浓度冬凌草甲素处理72 h后THP-1细胞的增殖抑制率,以及计算2、4、6、8、10μmol/L冬凌草甲素处理24、72、120 h后的细胞生存率并绘制生长曲线;显微镜下观察4、6、8μmol/L冬凌草甲素处理24 h后THP-1细胞的形态学变化;采用流式细胞术检测0、4、6、8μmol/L冬凌草甲素处理24 h后THP-1细胞凋亡率;采用Western blot法检测6μmol/L冬凌草甲素处理THP-1细胞0、12、24 h后Akt/m TOR、Raf/MEK/ERK细胞信号转导通路的变化,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果 14、6、8μmol/L冬凌草甲素处理72 h后细胞增殖抑制率分别为(20.02±11.15)%、(45.99±12.76)%、(86.39±9.18)%,与4μmol/L冬凌草甲素比较,6、8μmol/L冬凌草甲素处理后细胞增殖抑制率均升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);冬凌草甲素处理72 h后细胞半抑制浓度为(6.12±1.48)μmol/L;细胞生长曲线显示,冬凌草甲素对THP-1细胞的生长抑制作用呈时间和浓度依赖性。2冬凌草甲素处理24 h后,THP-1细胞出现凋亡,形成凋亡小体,浓度越高细胞凋亡小体形成越多。30、4、6、8μmol/L冬凌草甲素(分别设为对照组及4、6、8μmol/L组)处理24 h后,THP-1细胞凋亡率分别为(3.7±1.1)%、(16.2±3.3)%、(30.1±4.3)%、(49.5±6.7)%,对照组与各浓度组凋亡率比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与4μmol/L组比较,6、8μmol/L组凋亡率均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。4经Western blot法检测6μmol/L冬凌草甲素处理THP-1细胞24 h后可抑制细胞内Akt/m TOR、Raf/MEK/ERK信号转导通路的活化,并下调Bcl-2、上调Bax的表达。结论冬凌草甲素通过抑制Akt/m TOR、Raf/MEK/ERK信号转导通路的活化,以及调节凋亡调节蛋白Bax和Bcl-2的表达而发挥抗
- 郭勇单卿卿龚玉萍林娟杨曦
- 关键词：冬凌草素白血病抑制因子凋亡调节蛋白质类
- 慢病毒转染脐血CD34^+造血干细胞方法的优化被引量：1
- 2013年
- 目的探讨慢病毒载体系统转染人脐血CD34+造血干细胞优化的转染方法。方法采用第二代、第三代慢病毒载体系统,通过改变病毒浓度、感染体积、感染复数(MOI)值、感染方式、感染时间和感染后培养基等各方面条件,将表达绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒pTRIPdU3-RNAiTALh-EF1a-GFP转染CD34+干细胞,于37℃、5%CO2的孵箱中培养14d后,在光学显微镜下进行集落计数和分类,并与未转染的CD34+干细胞进行比较,从而筛选出优化的转染方法。结果三质粒系统的第二代慢病毒载体转染率高于四质粒系统的第三代慢病毒载体。优化的转染条件为:新鲜分选的CD34+细胞于当日(0d),在含病毒滴度107 TU、Polybrene 2μg/mL的opti-MEM培养液中,细胞和病毒混合液于平底12孔板孔中,200×g离心1h,离心后继续共培养8h,再换新的病毒液200×g离心1h,共培养8h。按照含细胞因子的液体培养基∶半固体培养基=1∶1的比例配置转染后培养基,继续培养,可以获得较高感染率。感染病毒后的CD34+干细胞培养14d后,与未感染的CD34+细胞相似,可以形成各类血细胞集落。结论优化的慢病毒转染方法可以有效感染CD34+造血干细胞,而不影响干细胞的分化功能。
- 周睿卿龚玉萍林娟何茜万永凤
- 关键词：慢病毒载体CD34+造血干细胞基因转染
- 雷帕霉素联合柔红霉素对Ph+急性淋巴细胞白血病细胞株SUP-B15的抗肿瘤效应及机制探讨
- ＜正＞Ph染色体是9号染色体的abl基因与22号染色体的bcr基因相互易位形成的染色体异常,形成的融合基因bcr/abl编码的BCR/ABL蛋白,是导致Ph阳性白血病发生的主要机制。Ph阳性白血病包括95%以上慢性粒细胞...
- 龚玉萍杨曦林娟周睿卿郭勇单卿卿何光翠
- 文献传递
- 从“不通则痛”探讨急性胰腺炎中西医病机认识被引量：2
- 2022年
- 剧烈上腹部疼痛作为急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)的诊断标准之一,与患者的临床结局指标和主观体验密切相关。越来越多的临床和基础研究证实,疼痛作为AP损伤早期事件,可能参与疾病发展。传递疼痛的外周神经在局部促进炎症因子的合成与释放,进而通过介导神经源性炎症加重胰腺损伤,与中医“不通则痛,痛则不通”以及AP “邪郁-热盛-气闭”的病机演变规律不谋而合,从疼痛角度阐述神经系统参与AP发生发展的相关机制、梳理中医病机理论内涵,并总结临床相关治疗证据加以佐证。
- 林娟韩晨霞姜坤黄伟金涛夏庆
- 关键词：急性胰腺炎不通则痛中西医病机
- 多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病伊马替尼耐药细胞株SUP-B15/RI耐药形成中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的研究多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病〔Ph(+)ALL〕伊马替尼(IM)耐药细胞株SUP-B15/RI耐药机制中的作用。方法 RT-PCR技术检测敏感细胞株SUP-B15和IM耐药细胞株SUP-B15/RI MDR1mRNA表达,改良MTT法测定IM、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊甙(VP-16)单药及联合维拉帕米作用于SUP-B15细胞和SUP-B15/RI细胞72h后增殖活性的改变,计算抑制率为50%时的药物浓度(IC50),DNR药物外排实验检测MDR1表达产物P-gp功能。结果 MDR1基因在SUP-B15/RI中的表达是敏感细胞SUP-B15的(2.02±0.04)倍(P<0.05)。IM、DNR、VCR、VP-16单药作用于SUP-B15/RI细胞的IC50值较SUP-B15细胞增高(P<0.05),相对耐药倍数(RF)分别为(20.52±2.34)、(10.33±1.88)、(9.78±1.27)、(3.84±0.69)倍。IM、DNR、VCR、VP-16与维拉帕米联合作用于SUP-B15/RI细胞后IC50值较单药时降低(P<0.05),耐药逆转倍数分别为(1.44±0.43)、(3.20±0.17)、(1.44±0.12)、(1.33±0.14)。P-gp蛋白功能在SUP-B15/RI细胞强于SUP-B15细胞,DNR泵出率分别为10.27%、3.43%。结论 MDR1基因在SUP-B15/RI细胞中表达增加,其表达产物P-gp功能增强,P-gp抑制剂维拉帕米可以部分逆转IM耐药。说明MDR1参与SUP-B15/RI细胞IM耐药机制的形成。
- 林娟邢宏运龚玉萍杨曦郭勇单卿卿周睿卿
- 关键词：伊马替尼耐药MDR1/P-GP
- 六种中药提取物对白血病细胞株的体外抑制作用研究被引量：7
- 2012年
- 目的研究中药有效成分丹参酮ⅡA、粉防己碱、和厚朴酚、姜黄素、冬凌草甲素和丹皮酚对白血病细胞株SUP-B15、K562、CEM、HL-60、NB4的抗增殖作用。方法采用改良MTT法测定6种中药有效成分作用于上述5种白血病细胞株96h后细胞增殖活性的变化,利用线性回归方法计算药物对细胞作用的半数抑制浓度(IC50)值。结果丹参酮ⅡA对SUP-B15、K562、CEM、HL-60、NB4均有一定的增殖抑制作用,但是对HL-60细胞株的抑制作用明显低于其它白血病细胞株。粉防己碱、和厚朴酚、姜黄素、冬凌草甲素对5种细胞株均有增殖抑制作用,且作用相似,抑制作用差异无统计学意义。丹皮酚对5种肿瘤细胞株的增殖有一定的影响,但作用最弱。结论粉防己碱、和厚朴酚、姜黄素、冬凌草甲素对5种白血病细胞株SUP-B15、K562、CEM、HL-60、NB4均有增殖抑制作用,且差异并无统计学意义,证明它们抗白血病作用具有广谱性。丹参酮ⅡA对SUP-B15、K562、CEM、NB4的增殖抑制作用明显优于HL-60细胞株,说明它的抗白血病作用在不同细胞株中有差异性。丹皮酚对5种白血病细胞株的作用最弱。
- 单卿卿龚玉萍郭勇林娟周睿卿杨曦
- 关键词：粉防己碱和厚朴酚冬凌草甲素丹皮酚白血病细胞株
