罗时文
- 作品数：11 被引量：19H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 肾腺苷脱氨酶及其结合蛋白的纯化和性质研究
- 2000年
- 目的 :探讨人肾细胞腺苷脱氨酶 (ADA)分子特性。方法 :用免疫亲和层析法分离纯化ADA ,测氨法测定ADA活性。结果 :获得的ADA全酶分子达电泳纯 ,酶比活力为 2 5 6 1.41U/mg ,得率 2 6 .5 9%。经SDS PAGE分析 ,全酶由 45 .6KD的小分子的ADA亚单位和无ADA活性的结合蛋白 (ADAbp ,其分子量为 6 8.1KD和 10 8.7KD)构成。用腺苷或脱氧腺苷为底物 ,全酶的Km值分别为 89μmol/L和 6 7μmol/L。对氯汞苯甲酸能显著抑制酶活性 ,二硫苏糖醇可使被抑制的活性得到部分恢复 ,当腺苷浓度在 5 0～ 15 0 μmol/L范围内 ,ADAbp对ADA活性的抑制率为 18.4%～ 2 1.5 %。结论 :人肾细胞中ADA为小分子ADA亚单位和无ADA活性的ADAbp构成的大分子ADA ,巯基是该酶活性中心的必需基团 。
- 龚文华万福生黎玉李金生罗时文
- 关键词：腺苷脱氨酶
- Raji细胞腺苷脱氨酶的纯化
- 1998年
- 经硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００凝胶柱层析和羟基磷灰石柱层析从Ｒａｊｉ细胞中纯化ＡＤＡ达电泳纯。酶纯化３３６倍，比活力达３５５１５Ｕ／ｍｇ蛋白，回收率为２２８３％；经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００凝胶过滤法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得ＡＤＡ的分子量分别为３７０ＫＤ和４２８ＫＤ；以腺苷或脱氧腺苷为底物测得Ｋｍ值分别为１６６６７μｍｏｌ／Ｌ和１０１９５μｍｏｌ／Ｌ．
- 熊向阳李金生沈静娴罗时文
- 关键词：腺苷脱氨酶细胞纯化
- 武汉大学学生运动员及中外普通大学生体脂的比较研究被引量：1
- 1988年
- 本文对武汉大学大学生运动员、普通大学生、外国留学生的体脂进行了测量和统计分析。结果如下:女学生的体脂百分比明显地高于男学生。本校男女大生运动员的体脂百分比都低于普通大学生,且有显著差异(P<0.05)。本校大学生男运动员的体脂百分比明显低于日本和欧美留学生,且有很显著差异(P<0.01)女运动员的体脂百分比略低于日本和欧美留学生,无显著差异(P>0.05)。日本男女留学生的体脂百分比与欧美留学生相近。本校男大学生的体脂百分比明显低于日本和欧美留学生,有很显著差异(P<0.01);女大学生的体脂百分比高于日本和政美留学生,但无显著差异(P>0.05)。
- 邹国林罗时文唐必友王巧云
- 关键词：脂肪健康
- 中华硬蜱叮咬免疫接种宿主后中肠病理变化的动态观察被引量：2
- 1998年
- 目的为系统观察中华硬蜱成虫叮咬蜱抗原免疫接种组和佐剂对照组宿主后中肠上皮形态学动态变化。方法选用中华硬蜱叮咬唾液腺抗原免疫接种组0兔和佐剂对照组兔，分别在叮咬后24h、48h、72h以及第5、8天电镜下观察中肠上皮形态学变化。结果中华硬蜱叮咬唾液腺抗原免疫接种宿主后，蜱中肠上皮遭到较严重程度的损伤和破坏，消化细胞表面微绒毛减少、变短、排列不整，细胞内粗面内质网扩张，线粒体嵴减少，高铁血红素颗粒及脂滴较对照组明显减少，基底迷路系统空泡化，基膜变性、松散和断裂等。而对照组蜱中肠消化细胞发育正常。讨论结果提示在蜱抗诱导的宿主抗蜱免疫作用中，蜱中肠是主要损伤部位，中肠的病理损伤是蟀吸血、生殖能力变化的病理学基础。
- 刘志刚叶炳辉朱清仙熊国强吴绮明罗时文崔晓民
- 关键词：中华硬蜱免疫接种中肠
- 胸腺腺苷脱氨酶免疫亲和纯化和性质研究被引量：2
- 1996年
- 用免疫亲和层析结合常规生化方法从人胸腺中纯化腺苷脱氨酶达电泳纯，比活力１４８９８Ｕ／ｍｇ，得率３４．１５％该酶分子质量为４１．３ｋｕ，约由３８０个氨基酸残基构成，等电点为４．９，最适温度３７～４０℃，最适ｐＨ为７．０以腺苷或２－脱氧腺苷为底物，其Ｋｍ分别为８３μｍｏｌ／Ｌ和６１μｍｏｌ／Ｌ．对氯汞苯甲酸能显著抑制酶活性，二硫苏糖醇可使被抑制的活性得到部分恢复．
- 罗时文李金生沈静娴邹国林
- 关键词：腺苷脱氨酶
- 有机溶剂对限制性内切酶Bsp63I和Bsp78I专一性和活力的影响
- 1991年
- 有机溶剂对酶反应的影响近年来引起人们高度重视,因为这既有理论研究价值又有应用前景。而有机溶剂对限制酶活力影响报道甚少。限制酶Bsp63 Ⅰ和Bsp78 Ⅰ是严佩芳等发现的新酶,它们都是Pst Ⅰ的异源同工酶。比较它们的异同是有意义的。本文用5种有机溶剂,对这两种酶专一性和活力的影响进行了研究,并对两种酶切割底物的能力进行了比较。 1 材料与方法 1.1 材料Bsp63 Ⅰ和Bsp78 Ⅰ(自制),pBR322DNA.λDNA,溴化乙啶(中科院生物物理所生化厂产品),琼脂糖(上海东海制药厂产品),其它试剂均为分析纯或生化试剂。
- 邹国林罗时文曾勇裘名宜朱彤
- 关键词：有机溶剂内切酶专一性
- 癌症病人腺苷脱氨酶活性测定被引量：8
- 1995年
- 测定了１０３例癌症病人和１１７例对照血清，外周血淋巴细胞以及２１例组织和癌旁正常组织腺苷脱氦酶（ＡＤＡ）的活性。结果表明：癌症组血清ＡＤＡ活性为２２．９±８．８３Ｕ／ｍｌ，对照组为１５．２１±５．６７Ｕ／ｍｌ，两者比较差异有非常显著性意义（ｔ＝７．５６，Ｐ＜０．０１）；癌症组淋巴细胞ＡＤＡ活性为３．９６±１，７４Ｕ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎ，对照组为７．３７±３．６５Ｕ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎ，两者比较差异有非常显著性意义（ｔ＝８．６５，Ｐ＜０．０１）；２１例癌组织ＡＤＡ活性为０．０９６±０．０５４Ｕ／ｍｇｐｒ－ｏｔｅｉｎ，癌旁正常组织为０．０４３±０．０３３Ｕ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎ，两者比较差异有非常显著性意义（ｔ＝０．８６，Ｐ＜０．０１）。提示：检测腺苷脱氨酶活性对观察癌症病人的疗效和预后有一定价值。
- 罗时文邹国林沈静娴黄宗民
- 关键词：腺苷脱氨酶免疫肿瘤
- 小白菜线粒体锰超氧化物歧化酶的纯化和性质研究被引量：2
- 1991年
- 超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,缩写为SOD)是迄今为止发现的唯一以自由基为底物的酶。它是生物体内一种重要的氧自由基清除剂,对生物体起防护作用,亦是一种疗效广泛的药物。我们已研究过小白菜叶细胞溶质和叶绿体的Cu.Zn-SOD,现在继续研究其线粒体的SOD。材料与方法1.材料:小白菜(Brassica chinensis L.),品种为上海青,取其叶片。2.酶活力测定:采用黄嘌呤氧化酶法。3.蛋白质测定:采用考马斯亮蓝G-250染料法。
- 邹国林罗时文裘名宜朱彤邓用川
- 关键词：SOD小白菜线粒体锰纯化
- 人胃腺苷脱氨酶的分离纯化及性质研究被引量：2
- 1996年
- 用硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析、免疫亲和层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００凝胶柱层析从人胃组织中提取出腺苷脱氨酶，酶纯化１９３２４倍，比活力为５７９７Ｕ／ｍｇ蛋白．提取酶液经ＰＡＧＥ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦只呈现一条区带。测得该酶的分子量为４１．２ｋＤ，等电点为ｐＨ４．８．氨基酸组成分析表明该酶由３８８个氨基酸残基组成，Ｎ端氨基酸为精氨酸。酶的最适ｐＨ为６．５，ｐＨ小于５．０或大于９．０时不稳定；最适温度为３７℃，对热不太稳定，以腺苷及２－脱氧腺苷作为底物，其Ｋｍ分别为８７μｍｏｌ／Ｌ和４１μｍｏｌ／Ｌ。
- 沈静娴罗时文李金生邹国林
- 关键词：腺苷脱氨酶纯化
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳活性染色法检测腺苷脱氨酶被引量：4
- 1996年
- 本文建立了分离、检测腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）酶谱的ＰＡＧＥ活性染色法。用此法检测了２４例正常人血清，７８例胸腔积液患者血清和胸水ＡＤＡ酶谱及其各谱带相对百分活性。结果：正常人血清以及患者血清和胸水ＡＤＡ可分出三个主要谱带；结核性胸膜炎患者血清和胸水ＡＤＡ带Ⅲ相对百分活性升高（Ｐ＜０．０１）。
- 罗时文邹国林沈静娴李金生陈世红
- 关键词：腺苷脱氨酶聚丙烯酰胺凝胶血清检测胸膜结核
