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甲型流感病毒和肺炎链球菌协同感染动物模型的建立: 研究背景：甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)感染所致的严重病例及死亡病例大多数是由于合并或继发了细菌感染,其中肺炎链球菌(Streptococcus Pnuemoniae,SP)是流感后继发性细菌...; 秦臻黄筱钧罗俊游江舟王红仁李明远

流感病毒血凝素疫苗研究进展被引量：1: 2010年; 流感病毒是引起急性呼吸道疾病的重要病原之一,常常与其他病原体混合感染造成更严重的损害。流感在世界各地都有发生,对人类的健康构成严重威胁。由于流感病毒容易变异,血清型别众多,给流感疫苗研究带来极大困难。流感病毒表面有血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)两种主要的膜蛋白,流感病毒的抗原性和致病性很大程度上取决于血凝素,所以HA基因是研究得最多的流感病毒基因。本文对HA疫苗的研究情况进行综述,为进一步研究和开发流感疫苗提供参考。; 罗俊李明远; 关键词：流感病毒血凝素疫苗

流感病毒受体结合表位真核载体的构建及表达: 目的构建甲型流感病毒血凝素(HA)的信号肽(SP)与HA唾液酸受体结合部位(RB)所含T、B表位的基因片段(RBT、RBB)的真核表达质粒,并研究其在真核细胞中的表达与免疫特性。方法通过重叠延伸PCR法(overlap-...; 罗俊王欢戴军左斌裴德翠丰峰李婉宜邝玉王保宁蒋忠华李虹李明远; 文献传递

小鼠β-防御素6与甲型流感病毒M2e基因融合表达及其免疫特性研究: 2010年; 目的构建小鼠β-防御素6(mBD6)与甲型流感病毒M2蛋白胞外功能区(M2e)真核表达质粒,并研究其在真核细胞中的表达与免疫特性。方法通过重叠延伸PCR法(overlap-PCR)将M2e与mBD6通过一段多肽接头Gly4Ser融合成为mBD6-M2e。将其插入载体pcDNA3.1(+),构建成pcDNA3.1(+)/mBD6-M2e。鉴定正确后,转染MDCK细胞,免疫荧光、MTT检测mBD6-M2e表达和分泌。免疫小鼠,半定量PCR检测脾细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α、CCR7表达。结果融合基因mBD6-M2e真核表达载体pcDNA3.1(+)/mBD6-M2e构建成功,在MDCK细胞膜上成功表达融和蛋白,转染细胞的培养上清刺激淋巴细胞增殖。免疫小鼠细胞因子表达改变。结论融合基因mBD6-M2e真核表达载体成功构建,为研究防御素在流感病毒核酸疫苗中的佐剂作用奠定了基础。; 冯伟李婉宜李明远张强巩天祥刘冯欢罗俊邝玉王保宁蒋忠华; 关键词：甲型流感病毒

流感病毒受体结合表位真核载体的构建及表达被引量：1: 2011年; 目的构建甲型流感病毒血凝素(HA)信号肽(SP)与HA唾液酸受体结合部位(RB)所含T、B表位的基因片段(RBT、RBB)真核表达质粒,研究其在真核细胞中的表达与免疫特性。方法通过重叠延伸PCR法(overlap-PCR)将HA的SP分别与RB、RBT、RBB通过一段多肽接头Gly4Ser融合为SP-RB、SP-RBT和SP-RBT,将其分别插入pcD-NA3.1(+)载体,构建质粒,鉴定正确后转染MDCK细胞,RT-PCR、免疫荧光、MTT检测该质粒的表达和分泌。结果融合基因真核表达质粒构建成功,在MDCK细胞中成功表达,转染细胞培养上清能刺激淋巴细胞增殖。结论SP-RB、SP-RBT、SP-RBB真核表达载体成功构建,表达产物能刺激淋巴细胞增值,为流感病毒唾液酸受体结合部位的T、B细胞表位免苗研究提供初步依据,也为流感核酸疫苗的研制奠定了基础。; 罗俊王欢戴军左斌裴德翠丰峰李婉宜邝玉王保宁蒋忠华李虹李明远; 关键词：流感病毒 T细胞表位 B细胞表位免疫荧光技术

黄芪多糖对甲流HA2蛋白真核表达载体免疫效果影响的研究被引量：6: 2016年; 目的:检验不同剂量黄芪多糖对甲流HA2蛋白真核表达质粒免疫大鼠效果的影响。方法:首先,将编码HA2的质粒p HA2/EGFP转染CHO细胞,通过PT-PCR和荧光检验其在真核细胞中的表达效果。然后将60只大鼠随机分为6组,分别注射p EGFP-N1、生理盐水和p HA2/EGFP加不同浓度的黄芪多糖,注射前收集大鼠血清作为对照,据最后一次注射后第36天处死各组大鼠收集各组大鼠的血清,测量血清中细胞因子IFN-γ、IL-4和血清中Ig G对不同流感毒株血凝素的反应情况。结果:p HA2/EGFP+中等剂量APS组的IFN-γ、IL-4和血清中Ig G对血凝素的反应情况均与低剂量组和阴性对照组有显著性差异(P<0.05)。p HA2/EGFP+中等剂量APS组的细胞因子水平和对血凝素反应与高剂量组无显著性差别(P>0.05)。结论:中等剂量的黄芪多糖能增强甲流HA2蛋白真核表达质粒的免疫效果。; 褚兆苹吴淑慧刘文泰马志红徐丙元罗俊曹刚徐华洲石玉娥戴军; 关键词：血凝素 IFN-Γ IL-4

抗感颗粒抗甲型流感病毒的实验观察被引量：5: 2010年; 目的观察抗感颗粒在鸡胚和BALB/c小鼠体内抗甲型流感病毒的作用.方法（1）鸡胚实验：将甲型流感病毒鼠肺适应株FM1接种9日龄鸡胚,再将不同剂量的抗感颗粒注入鸡胚,以血凝效价为指标,观察抗感颗粒对流感病毒的作用,设立流感病毒对照组和利巴韦林片对照组,每组6个鸡胚.（2）小鼠实验：将BALB/c小鼠随机分为病毒感染模型组、正常对照组、利巴韦林片组及抗感颗粒低、中、高剂量组,每组20只小鼠.用流感病毒感染小鼠后灌胃给药,以实验小鼠的生存情况、死亡保护率及延长生命率等指标观察抗感颗粒的抗流感病毒作用.结果在鸡胚实验中,抗感颗粒高、中剂量组均能抑制流感病毒复制并达到显效结果,病毒血凝效价比流感病毒对照组分别低了5个、3个稀释度.在小鼠实验中,抗感颗粒各剂量组均能减轻感染小鼠的发病症状,减少小鼠死亡,死亡保护率为35.0%～55.0%;生存时间延长,延长生命率为73.0%～88.9%、最低有效剂量为3.00g/kg.结论抗感颗粒对甲型H1N1流感病毒的增殖有抑制作用,对流感病毒感染引起的小鼠死亡有保护作用.; 刘冯欢李明远罗俊李婉宜王保宁杨远邝玉左斌马秀英蒋忠华; 关键词：流感病毒A型抗感颗粒 H1N1

自噬和凋亡在甲型流感病毒和肺炎球菌协同感染小鼠模型中作用的初探被引量：2: 2016年; 目的建立甲型流感病毒（Influenza A virus,IAV）和肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae,SP）协同感染小鼠模型,在该模型中初步探索自噬和凋亡的发生情况.方法将IAV和SP以不同顺序感染Balb/c小鼠,观察其体重变化和死亡率,检测其肺部IAV和SP滴度、病理改变情况,建立IAV ～ SP协同感染动物模型.使用免疫组化法检测自噬特征蛋白LC3及凋亡特征蛋白Caspase-3的表达情况.结果 IAV～SP组第二次感染后24 h时小鼠肺部IAV和SP滴度最高,死亡率也明显高于其他各组,48 h病理改变也最为严重.免疫组化结果显示IAV感染早期（24 h～48 h）LC3蛋白表达出现峰值,Caspase-3缓慢上升;晚期（72 h～96 h）Caspase-3蛋白表达出现峰值,而LC3蛋白表达逐渐下降.结论本研究成功建立了1AV～ SP协同感染动物模型,模型鼠中自噬先于凋亡发生,为进一步研究自噬和凋亡在IAV～ SP协同感染中的作用奠定了基础.; 秦臻王红仁黄筱钧罗俊游江舟李婉宜杨远周琳琳李明远; 关键词：甲型流感病毒肺炎链球菌自噬凋亡

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罗俊