杨晓蕾 作品数:10 被引量:45 H指数:4 供职机构: 暨南大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家大学生创新性实验计划 国家大学生创新性实验计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
疏肝健脾方药对NASH大鼠心脏舒张功能及炎症因子的影响 被引量:6 2011年 目的:探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatosis hepatitis,NASH)合并心脏舒张功能不全大鼠干预的作用机制.方法:采用高脂饲料喂养复制NASH大鼠实验模型,各药物组分别灌服疏肝方、健脾方和综合方(疏肝方和健脾方的合方)进行干预,16wk后用Visual Sonics Vevo770TM高分辨率小动物超声诊断仪检测大鼠心脏每搏输出量(SV)、左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)用以评价大鼠心脏收缩功能,检测E/A比值用以评价大鼠心脏舒张功能.然后处死大鼠,腹主动脉采血,用全自动生化分析仪检测血脂及肝脂的含量;常规HE染色观察肝组织病理变化;ELISA法检测血清TNF-α和IL-6的水平.结果:肝组织病理染色提示大鼠NASH造模成功;与正常对照组相比,模型组大鼠心脏舒张功能明显降低(1.59±0.24vs1.03±0.13,P<0.01),血清TNF-α和IL-6含量显著升高(13.57±4.64vs28.26±8.60;59.28±71.53vs132.81±74.22,P<0.01、0.05),血清TC、LDL及肝组织TC、TG含量也明显升高(1.42±0.29vs3.82±0.91;0.30±0.11vs0.81±0.27;0.90±0.14vs11.86±1.29;0.75±0.38vs6.17±1.83,均P<0.01),SV、LVEF、LVFS均比正常组有不同程度的下降;各药物组大鼠心脏舒张功能较模型组有显著改善,以健脾高剂量组、综合方高剂量组的E/A比值升高最为明显(1.26±0.23vs1.03±0.13;1.35±0.15vs1.03±0.13,均P<0.01);各药物组大鼠血清TNF-α及IL-6含量与模型组相比明显下降,以综合方高剂量组的血清下降最为明显(15.07±6.00vs28.26±8.60;67.72±44.24vs132.81±74.22,P<0.01,0.05);脂质代谢检测以合方高剂量组的血清TG及肝组织TC、TG下降最为明显(0.45±0.14vs0.83±0.26;9.17±1.02vs11.86±1.29;2.54±0.74vs6.17±1.83,均P<0.01).结论:NASH大鼠伴有心脏舒张功能不全,疏肝健脾方药抗NASH及改善NASH大鼠心脏舒张功能可能与其降低血清中炎症因子TNF-α和IL-6的水平有关. 王文晶 杨钦河 冯高飞 王彦平 何秀敏 张玉佩 杨雪萍 闫海震 黄进 李光秋 赵亚凤 杨晓蕾 沈灿宏关键词:心脏舒张功能 炎症因子 疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织TNF-α、IL-6及IL-1的影响 被引量:25 2012年 目的:观察疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及白细胞介素1(IL-1)水平的影响,探讨其抗NASH的作用机制。方法:采用高脂饲料喂养复制NASH大鼠实验模型,同时各药物组分别灌服疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(参苓白术散)和综合方(柴胡疏肝散和参苓白术散的合方)的不同剂量进行干预,16周后处死大鼠,用全自动生化分析仪检测血脂及肝脂的浓度;常规HE染色和油红O染色观察肝组织病理变化;用酶联免疫法(ELISA)检测肝组织匀浆中炎症细胞因子TNF-α、IL-6及IL-1的水平。结果:与正常组相比,模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)和肝组织TC、甘油三酯(TG)及肝组织中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1的浓度显著升高(P<0.01);各药物组大鼠肝组织TNF-α、IL-6及IL-1的水平与模型组相比有均有不同程度下降,以综合方高剂量组和健脾方高剂量组下降最为明显(P<0.01、P<0.05),脂质检测以综合方高剂量组的血清TG及肝组织TC、TG下降最为明显(P<0.01)。结论:疏肝健脾方药有抗大鼠NASH的作用,其机制可能与其抑制肝组织炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1的表达及降低脂质浓度有关。 金玲 杨钦河 张玉佩 王文晶 韩莉 陈友鹏 冯高飞 何秀敏 赵亚凤 沈灿宏 杨晓蕾 李光秋 闫海震 黄进关键词:非酒精性脂肪性肝炎 疏肝健脾方药 炎症因子 脐血与成人外周血粒细胞Toll样受体表达的比较 被引量:4 2013年 目的:比较脐血与成人外周血粒细胞Toll样受体(TLRs)的表达情况,为新生儿相关疾病的临床治疗积累实验资料。方法:取脐血和成人外周血,用密度梯度离心结合红细胞裂解法分离、收集粒细胞,流式细胞术鉴定粒细胞纯度,RT-qPCR检测TLRs 10个成员的mRNA表达水平,流式细胞术测定部分TLRs的蛋白荧光强度。结果:(1)流式细胞术检测结果:采用密度梯度离心结合红细胞裂解法分离收集的脐血粒细胞CD19-CD24+为(95.66±1.73)%,CD3+为(4.27±1.22)%,成人外周血粒细胞CD19-CD24+为(95.48±2.13)%,CD3+为(4.82±1.07)%。(2)RT-qPCR结果显示:脐血粒细胞和成人外周血粒细胞TLR1(0.141±0.091 vs 0.691±0.447)、TLR2(0.388±0.337 vs 0.901±0.508)、TLR4(0.093±0.071 vs 0.254±0.147)、TLR6(0.056±0.045 vs 0.202±0.034)、TLR7(0.001±0.001 vs 0.004±0.003)和TLR8(0.046±0.040 vs 0.211±0.146)的表达差异有统计学意义(P<0.01),TLR3、TLR5、TLR9和TLR10的表达差异无统计学意义(P>0.05);其中TLR3、TLR7和TLR9在脐血和成人外周血粒细胞的相对表达水平均较低。(3)流式分析显示脐血与成人外周血粒细胞TLR2平均蛋白荧光强度(21.40±3.09 vs 30.50±5.69)差异有统计学意义(P<0.05);而TLR4平均蛋白荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。结论:脐血粒细胞TLR1、TLR2、TLR4和TLR6 mRNA及TLR2蛋白表达低于成人外周血粒细胞,提示新生儿粒细胞识别细菌性病原微生物感染的能力可能存在缺陷或尚未完全成熟。这是否与新生儿急性细菌性毒血症发病及病死率较高有直接联系,有待进一步研究。 刘俊 吴瑕 陈智聪 廖继东 谷景义 杨晓蕾 柳国胜 吴慧 李扬秋关键词:新生儿 脐血 粒细胞 TOLL样受体 基因表达 尼克酰胺对人脐带间充质干细胞的保护效应 被引量:3 2015年 目的:探讨尼克酰胺(nicotinic acid amide,NAA)减轻人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)输注损伤的效应。方法:空白对照组为0.3 m L生理盐水、MSC组为0.3 m L 1×106CFSE标记的h UC-MSCs,MSC+NAA组为0.3 m L 10 mmol/L NAA处理24 h的1×106CFSE标记的h UC-MSCs,分别与2.7 m L正常人全血混匀,注入改良Chandler Loop内,在37℃下,20 m L/min循环1 h,检测循环前后血小板、白细胞、h UC-MSCs和C3a的变化。结果:血小板消耗率空白对照组为(29.96±10.88)%、MSC组为(77.76±19.29)%、MSC+NAA组为(50.13±18.10)%;白细胞消耗率空白对照组为(37.82±13.81)%、MSC组为(64.57±17.08)%、MSC+NAA组为(41.52±17.26)%,MSC组和MSC+NAA组与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。MSC+NAA组的h UC-MSCs存活率较MSC组高(P<0.05)。空白对照、MSC和MSC+NAA组的C3a含量分别为(206.27±58.10)μg/L、(230.47±39.61)μg/L和(208.37±40.66)μg/L。结论:h UC-MSCs与正常人全血在改良Chandler Loop内共循环1 h可模拟血液介导即刻炎症反应(instant blood-mediated inflammatory reaction,IBMIR),大量损耗MSCs和血液成分,导致C3a上升。NAA可抑制IBMIR、降低血液成分的损耗、提高h UC-MSCs的存活率,提示NAA能减轻MSCs的输注损伤。 杨晓蕾 陈智聪 廖继东 谷景义 于波 刘革修关键词:人脐带间充质干细胞 LOOP 尼克酰胺 62例新生儿败血症的回顾性分析 目的:总结新生儿败血症的临床表现、实验室检查、临床特征、治疗及转归、常见的病原菌及其耐药情况.方法:收集我院新生儿科收治的62例新生儿败血症的临床资料,选取早产儿败血症为研究对象,以足月儿败血症为对照组,采用独立样本T检... 吴瑕 杨晓蕾 廖继东 柳国胜肠道菌裂解物对间充质干细胞及其天然免疫受体的影响 目的:探讨肠道菌裂解物对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells;hUC-MSCs)增殖分化及其天然免疫受体的影响,为针对肠道菌群进行调节... 杨晓蕾关键词:人脐带间充质干细胞 TLRS NLRS 蛋白表达 文献传递 Toll样受体家族在足月新生儿脐血粒细胞表达 目的:Toll样受体(Toll-like receptor,TLRs)是固有免疫模式识别受体家族中重要的一员,启动固有免疫应答和诱发适应性免疫反应,是粒细胞重要功能受体.本研究的主要目的是检测Toll样受体家族在足月新生... 吴瑕 杨晓蕾 廖继东 柳国胜连续传代培养对hUC-MSCs上NLR家族mRNA表达的影响 被引量:1 2014年 目的:探讨连续传代培养对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)表达NOD样受体(NLR)家族所有23个成员mRNA的影响,为改进hUC-MSCs传代培养质量与增加hUC-MSCs在实验和临床应用中的数量及安全性寻找切入途径。方法:取剖宫产无菌新生儿脐带,经胶原酶II消化结合贴壁选择分离纯化hUC-MSCs,并连续传代培养;采用流式细胞术、诱导分化和RT-qPCR对连续培养传代前后的hUC-MSCs(第3和28代)进行鉴定并对23个NLR家族成员mRNA的表达进行定量分析。结果:连续传代培养前后hUC-MSCs的细胞表型均为CD29+/CD44+/CD105+/CD31-/CD34-/CD40-/CD45-/CD106-/HLA-DR-,能被诱导为成骨和脂肪细胞,符合国际细胞治疗协会建议的MSCs基本特征。全部NLR家族成员的mRNA在培养第3代hUC-MSCs上均有表达,且NOD1、NLRC4、NLRC5、NLRP1、NLRP3、NLRP10、NAIP、NLRX1和APAF1高表达,其余成员低表达。培养传代至第28代除NLRP10的mRNA表达上升、NLRC5和NLRX1 mRNA表达基本不变外,其余成员的mRNA表达均有所下降,其中NLRP1 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:体外连续传代培养对hUC-MSCs表达NLR家族成员的影响是多向性的。这些影响与MSCs的增殖、分化及其免疫调节功能的联系有待进一步实验探讨。 陈智聪 刘俊 廖继东 谷景义 杨晓蕾 李扬秋关键词:人脐带间充质干细胞 尼克酰胺对人脐带间充质干细胞的保护效应 目的:探讨尼克酰胺(nicotinic acid amide,NAA)减轻人脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells,hUC-MSCs)输注损伤的效应.方法:... 杨晓蕾 陈智聪 廖继东 谷景义 于波 刘革修关键词:人脐带间充质干细胞 尼克酰胺 非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝细胞和库普弗细胞同时分离及鉴定 被引量:10 2012年 目的建立一种稳定、高效、同时分离非酒精性脂肪性肝炎(nonalcohlic steatohepatitis,NASH)大鼠肝细胞(hepatocytes,HCs)和库普弗细胞(Kupffer cells,KCs)的新方法。方法采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶,低速离心获取HCs;差速离心、密度梯度离心和选择性贴壁获得KCs。用Typan blue染色和流式细胞术(FCM)分别进行活性和纯度鉴定。结果每只大鼠获得纯化的HCs[(4.0~4.5)×108]、KCs[(1.5~2.0)×107],经Typanblue染色活力均在95%以上,FCM检测纯度均在90%以上。结论此实验建立同时分离NASH大鼠HCs和KCs的方法高效、稳定,细胞数量和纯度都符合进一步实验的要求。 冯高飞 杨钦河 王文晶 何秀敏 张玉佩 纪桂元 李光秋 赵亚凤 沈灿宏 杨晓蕾关键词:非酒精性脂肪性肝炎大鼠 肝细胞 库普弗细胞