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骨形态发生蛋白-9对黄素化颗粒细胞增殖的影响被引量：1: 2018年; 目的检测外源性添加骨形态发生蛋白-9(BMP-9)基因重组蛋白对体外培养黄素化颗粒细胞增殖的影响。方法因输卵管因素行体外受精-胚胎移植患者90例的卵泡液,分离提取黄素化颗粒细胞,体外培养添加重组BMP-9的试验组,采用CCK-8,实时定量PCR检测颗粒细胞的增殖情况。结果体外培养24、48、72 h,对照组与试验组颗粒细胞均呈稳定增殖,添加BMP9重组蛋白可显著促进人卵巢黄素化颗粒细胞的体外增殖,CCK-8试剂盒测定吸光度值试验组均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中体外培养48 h与对照组比较颗粒细胞增殖率最高(P<0.05)。BMP-9基因重组蛋白能够显著上调PCNAmRNA的表达水平(P<0.05)。结论外源性添加BMP-9能够促进体外培养人卵巢黄素化颗粒细胞的增殖。; 刘灿汪辉甄秀丽任泽亚张坪江乾郝雅丽; 关键词：体外受精-胚胎移植颗粒细胞

畸形精子症患者中氧化应激与精子DNA损伤的关系探讨被引量：5: 2022年; 目的探讨畸形精子症患者中氧化应激相关指标与精子DNA损伤变化的相关性,以期为男性不育诊治提供理论依据。方法选取2019年1月至2019年8月在河北医科大学第四医院生殖医学科诊治的101例男性不育症患者作为研究对象,按精子形态将患者精液标本分为两组,A组为精子正常形态≥4,B组为精子正常形态<4,即畸形精子症组,按世界卫生组织(WHO)精液分析第5版要求进行精液常规分析,使用伊红-苯胺黑染色方法进行精子膜完整性检测,吖啶橙荧光染色方法检测精子DNA损伤,氧化应激试剂盒检测精浆丙二醛(MDA)水平、总抗氧化能力(TAC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与A组比较,B组的前向运动精子降低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);两组的精液量、精子浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05,表1)。与A组比较,B组的精子膜完整性降低,精子DNA损伤增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与A组比较,B组的TAC和SOD水平明显降低,MDA水平显著增高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。精子正常形态率与精子DNA损伤(r=-0.492)、活性氧水平(r=-0.645)和MDA(r=-0.439)均呈负相关(均P<0.05)。精子正常形态率与TAC(r=0.623)、SOD(r=0.547)水平均呈正相关(均P<0.05)。结论氧化应激水平的改变可导致精子活力降低、精子膜完整性降低和精子DNA损伤增加。对氧化应激的检测和抗氧化的治疗可能会预防氧化应激引起的精子形态异常以及相关指标的改变,对于提高男性生育力有积极作用。; 乜照燕吴海峰李亮江乾陈丽君; 关键词：少精子症氧化应激 DNA损伤

颗粒细胞骨形态发生蛋白9评估IVF卵母细胞成熟及胚胎发育: 2018年; 目的检测骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein-9,BMP-9)在人卵巢颗粒细胞中的表达水平,探讨其与卵母细胞及胚胎质量的关系。方法收集85例因输卵管因素行常规体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)患者的颗粒细胞,采用免疫细胞化学法、逆转录PCR和Western blot检测颗粒细胞中BMP-9的表达。结果 BMP-9表达于颗粒细胞胞浆中,呈棕黄色颗粒。颗粒细胞中BMP-9 m RNA表达与蛋白表达呈正相关(r=0.220,P<0.05)。BMP-9 m RNA及蛋白的表达与患者临床数据及实验室相关数据均无直线相关关系。根据BMP-9 m RNA相对表达量的均数将患者分为低表达组和高表达组,高表达组的优质胚胎率、卵子利用率均高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BMP-9表达于人卵巢颗粒细胞胞浆内,BMP-9高表达可提高优质胚胎率,其表达水平在一定程度上可反映卵母细胞的质量。BMP-9可能作为自分泌/旁分泌因子参与生殖系统调控。; 刘灿汪辉李怡张坪江乾甄秀丽; 关键词：体外受精胚胎移植

Bland-Altman图在男科实验室新进人员考核校验中的应用被引量：3: 2021年; 目的探索Bland-Altman图在男科实验室新进人员考核校验中的应用。方法根据《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》第5版推荐标准化精液分析方法对新进人员进行培训,并与熟练人员进行检验结果比较。采用MedCalc-version 15.8制作精子浓度、前向运动精子百分率(PR)、精子存活率、精子形态的Bland-Altman图,采用GraphPad双因素方差分析进行统计学处理。结果男科实验室新进人员经过标准化培训后先进行精确度的评估分析,新进人员检测精液样本的精子浓度、PR、精子存活率、精子形态的变异系数均小于10%。经过Bland-Altman图分析,与熟练人员比较,新进人员精子浓度检测有5%的点在95%的一致性界限以外,在一致性界限范围内,差值的绝对值最大为8×106/mL;新进人员PR分析中2.9%的点在95%的一致性界限以外,在一致性界限范围内,差值的绝对值最大为8%;新进人员精子存活率检测有2.5%的点在95%的一致性界限以外,在一致性界限范围内,差值的绝对值最大为9%;新进人员精子形态分析中2.6%的点在95%的一致性界限以外,在一致性界限范围内,差值的绝对值最大为2%。用GraphPad做双因素方差分析,两名人员检测得到的精子浓度、PR、精子存活率、精子形态具有较好一致性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论经标准化培训,新进人员对精液浓度、PR、精子存活率、精子形态分析结果精确度好。为临床男科实验室更好地开展室内质量控制,保持实验人员检测水平的一致性提供参考。; 赵世彬张娜王聪敏白小双赵静云江乾; 关键词：精液分析一致性

白藜芦醇通过降低氧化应激改善过氧化氢诱导精子活力和DNA损伤被引量：7: 2021年; 目的探讨白藜芦醇(Resveratrol,RES)通过降低氧化应激改善过氧化氢(Hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))诱导的精子活力和DNA损伤。方法收集我院生殖医学科精液检查正常标本,采用Percoll密度梯度离心法进行处理,处理后调整精子浓度为20×10^(6)/ml放置在5%CO_(2),37℃培养箱。不同浓度(0、25、50、75、100μmol/L)H_(2)O_(2)处理24 h,通过前向运动精子和总活力精子筛选H_(2)O_(2)浓度,建立H_(2)O_(2)精子损伤模型。进一步用不同浓度(0、10、25、50、75、100μmol/L)RES和H_(2)O_(2)共同作用24 h,通过前向运动精子和总活力精子选择RES浓度。根据上述确定RES和H_(2)O_(2)浓度,将实验分为三组:对照组(CON)、H_(2)O_(2)组(H_(2)O_(2))、H_(2)O_(2)+RES组(RES+H_(2)O_(2)),对三组精子处理后用伊红-苯胺黑染色检测精子膜完整性,硫代巴比妥酸法(TBA)测定MDA水平,精子吖啶橙染色检测精子DNA损伤。结果随H_(2)O_(2)浓度增加,前向运动精子和总活力精子降低,呈剂量依赖关系,选定100μmol/L H_(2)O_(2)为后续实验药物浓度。在H_(2)O_(2)精子损伤模型中随RES浓度增加,前向运动精子和总活力精子增加,50μmol/L RES对精子损伤改善效果最佳,确定为后续实验药物浓度。三组结果显示:H_(2)O_(2)组与CON组相比精子膜完整性降低,MDA水平上升,精子DNA损伤增加,而H_(2)O_(2)+RES组与H_(2)O_(2)组相比精子膜完整性提高,MDA水平下降,精子DNA损伤降低。结论RES可降低H_(2)O_(2)导致精子氧化损伤。; 吴海峰李曼李玉静江乾李亮赵世彬乜照燕; 关键词：白藜芦醇精子氧化应激精子DNA损伤

子宫结合带厚度及形态对子宫腺肌病患者行冻胚移植临床结局的影响被引量：7: 2022年; 目的探讨子宫结合带(junctional zone,JZ)厚度及形态对子宫腺肌病患者行冻胚移植(frozen embryo transfer,FET)的影响。方法回顾性分析河北医科大学第四医院生殖医学科行FET助孕的85个周期不孕患者临床资料,子宫内膜准备前应用长效促性腺激素释放激素激动剂(gonadotrophin releasing hormone agonist,GnRH-a)降调节,根据是否妊娠分为妊娠组(45周期)与未妊娠组(40周期)。分析三维阴道超声下患者JZ厚度及形态与临床结局的关系。结果两组患者的年龄、不孕年限、体重指数、原发不孕比例、移植胚胎个数、子宫内膜厚度等参数的差异均无统计学意义(P>0.05),两组月经期、GnRH-a 1次、GnRH-a 2次后JZ厚度的比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但JZ形态相比差异有统计学意义(P<0.05)。与妊娠发生相关因素的多因素Logistic回归分析显示GnRH-a 2次后JZ形态是临床妊娠的独立保护因素,随着JZ形态正常率越高妊娠率越高(P<0.001)。结论三维阴道超声评价JZ的形态是预测子宫腺肌病患者FET妊娠结局良好的指标,且为该患者改善妊娠结局所使用GnRH-a的次数提供参考。; 朱博雅江乾赵静云乜照燕甄秀丽吕翠婷; 关键词：子宫腺肌病妊娠冻胚移植

内皮型一氧化氮合酶表达及微血管密度评估体外受精患者子宫内膜容受性的价值被引量：9: 2017年; 目的:探讨着床窗口期子宫内膜内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达及微血管密度(MVD)评估体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕患者子宫内膜容受性的价值。方法:纳入IVF-ET助孕患者60例,于移植前一周期着床窗口期行子宫内膜取样,采用免疫组织化学SP法检测eNOS蛋白的表达及MVD,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测eNOS mRNA的表达。根据临床妊娠结局分为妊娠组(30例)和未妊娠组(30例),比较两组eNOS mRNA、蛋白表达及MVD的差异。结果:妊娠组eNOS mRNA(0.72±0.21)明显高于未妊娠组(0.29±0.12),差异有统计学意义(P<0.05);妊娠组子宫内膜eNOS蛋白阳性表达率(80.0%)明显高于未妊娠组(13.3%),差异有统计学意义(P<0.05);妊娠组MVD(14.53±3.28)明显高于未妊娠组(12.20±3.83),差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜eNOS蛋白表达水平与MVD呈正相关(r=0.814,P<0.01)。结论:着床窗口期子宫内膜eNOS mRNA及蛋白的高表达和MVD增加均能够改善子宫内膜容受性,有利于IVF妊娠结局。; 王楠张坪赵永玲江乾甄秀丽; 关键词：内皮型一氧化氮合酶子宫内膜容受性体外受精-胚胎移植微血管密度

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江乾

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