谢丽霞
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江西省自然科学基金江西省科学技术厅社会发展攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- GPx1对肺癌A549微球体细胞增殖、凋亡的调控作用及可能的作用机制被引量：3
- 2017年
- 目的:研究谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1,GPx1)在调控肺腺癌A549微球体细胞增殖和凋亡中的作用,并探讨其可能的机制。方法:采用无血清悬浮法培养A549微球体细胞,应用FCM法检测A549微球体细胞中CD133^+CD44^+细胞所占的比例,蛋白质印迹法检测A549微球体细胞中干细胞标志物Sox2和Nanog蛋白的表达情况,以及GPx1蛋白的表达水平。采用质量浓度为5 mg/m L的顺铂(cisplatin,DDP)分别处理A549微球体细胞和亲本A549细胞,CCK-8法检测48 h内细胞的存活率;利用比色法检测A549微球体细胞和亲本A549细胞中谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量和GPx1的活性,蛋白质印迹法检测GPx1蛋白的表达情况;FCM法检测A549微球体细胞和亲本A549细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平。将特异性针对GPx1基因的GPx1-si RNA转入A549微球体细胞中,分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测GPx1 m RNA及蛋白的表达水平;FCM法、蛋白质印迹法和细胞成球实验分别检测沉默GPx1基因表达后对A549微球体细胞中ROS水平、Sox2和Nanog蛋白表达水平以及A549微球体细胞成球能力的影响。应用FCM法、CCK-8法以及蛋白质印迹法检测转入GPx1-si RNA并联合DDP(5mg/m L)干预后,对细胞的生存率和凋亡水平以及磷酸化p38(phospho-p38,p-p38)、磷酸化激活转录因子2(phospho-activating transcription factor 2,p-ATF2)、p53和Bax蛋白表达水平的影响。结果:培养获得A549微球体细胞,A549微球体细胞中CD133+CD44+细胞所占比例为(11.7±0.6)%,明显高于亲本A549细胞的(2.2±0.3)%。Sox2和Nanog蛋白在A549微球体细胞中的表达水平明显高于在亲本A549细胞中的表达水平(P值均<0.05);DDP(5 mg/mL)处理48 h后,对A549微球体细胞的生存率无明显影响(P>0.05)。A549微球体细胞中GSH含量、GPx1的活性和蛋白的表达水平均明显高于亲本A549细胞(P值均<0.05),而ROS含量在A549微球体细胞中明显低于亲本A549细�
- 邱钰超谢丽霞黄玲萍叶小群
- 关键词：肺肿瘤肿瘤干细胞谷胱甘肽过氧化酶
- 依他尼酸联合顺铂化疗促肺癌A549细胞凋亡的作用及机制研究被引量：2
- 2017年
- 目的探讨依他尼酸(ethacrynic acid,EA)杀伤肺癌A549细胞球的作用及机制研究。方法无血清培养基中培养A549细胞球,应用Western blot检测CD133、SOX2、Ep CAM和ABCG2的蛋白表达水平。应用1、2、5、10、20 mg/m L的浓度顺铂(cisplatin,DDP)分别处理A549及细胞球48 h,用MTT检测48 h内细胞的存活率。应用比色法检测10、50、100、200μmol/L EA对A549细胞球中谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性的抑制作用。应用流式细胞术、Western blot、Real-timePCR、相差显微镜观察检测200μmol/L EA处理A549细胞球前后ROS水平、细胞成球能力、β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白以及β-catenin启动子活性的变化情况。应用β-catenin腺病毒感染A549细胞球后,再用200μmol/L EA的处理A549细胞球,利用Real-time PCR和Western blot检测β-catenin S、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的变化,并用MTT检测A549细胞球增殖的抑制作用。结果成功培养出悬浮的A549细胞球,其高表达肿瘤干细胞标志物CD133、SOX2、Ep CAM以及耐药相关蛋白ABCG2,并可耐受不同浓度DDP的杀伤作用。200μmol/L EA处理A549细胞球后ROS水平明显升高,而GST活性、β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的表达、β-catenin的启动子活性、A549细胞球的成球能力显著下降,并且200μmol/L EA联合5 mg/m L DDP可增强对抑制A549细胞球增殖的作用和增加细胞凋亡的水平(P<0.05)。过表达β-catenin后,200μmol/L EA对β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的抑制作用较空载体组显著减弱。此外,过表达β-catenin可显著缓解200μmol/L EA联合5 mg/m L DDP对A549细胞球的增殖抑制作用。结论 EA通过抑制GST活性和β-catenin水平,发挥抑制A549细胞球增殖和干性,促进其凋亡的作用。EA可望成为治疗肺癌及肺癌干细胞的药物。
- 黄玲萍谢丽霞邱钰超胡萍叶小群
- 关键词：肺癌干细胞依他尼酸GSTΒ-CATENIN
- 线粒体活性氧与肿瘤的研究进展被引量：3
- 2017年
- 线粒体活性氧（mitochondrial reactive oxygen species,mROS）是线粒体电子传输链的有毒副产品,同时mROS可作为一种信号分子促进细胞生长。肿瘤细胞内某些致癌基因激活,抑癌基因受抑制及缺氧可诱导mROS升高,从而激活与肿瘤细胞生存转移、代谢转变和血管形成相关的信号通路。
- 谢丽霞叶小群
- 关键词：肿瘤信号通路抗氧化剂
