金卫
- 作品数：2 被引量：26H指数：2
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- 百草枯体外诱导人外周血中性粒细胞胞外诱捕网形成的实验研究被引量：5
- 2017年
- 目的探讨百草枯（PQ）能否诱导人外周血中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的形成。方法分离健康者外周血中性粒细胞，苏木素-伊红（HE）染色后进行细胞鉴定；分别采用浓度为O（对照）、200、400、600、800、1000、1200μmol／L的PQ溶液处理细胞，建立PQ中毒的体外模型，应用CCK-8细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒检测细胞存活率，选择半数致死量的PQ浓度作为实验干预点。根据细胞活性检测结果进行细胞染毒（PQ染毒组），以未染毒细胞作为对照。采用免疫荧光染色显微成像定性鉴定NETs形成情况；采用PicoGreen核酸定量分析试剂盒检测细胞上清中游离DNA含量；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测细胞上清中瓜氨酸化组蛋白3（H3Cit）、髓过氧化物酶（MPO）的蛋白表达。结果HE染色鉴定中性粒细胞纯度约95％；经不同浓度PQ建立中毒体外模型后发现，PQ浓度为800μmol／L时细胞存活率为（58±2）％，以该半数致死量作为实验干预点。免疫荧光定性观察显示，对照组中性粒细胞仅有少量H3Cit及MPO表达，无NETs形成；而800μmol／LPQ可以刺激中性粒细胞产生由DNA、H3Cit和MPO形成的NETs。定量结果显示，与对照组比较，PQ染毒组细胞上清中游离DNA含量显著升高（μg/L：2235±462比561±87，P〈0．01）；且PQ染毒组细胞上清中H3Cit和MPO蛋白表达量均较对照组明显升高[H3Cit蛋白表达（灰度值）：0．23±0．03比0．11±0．01，MPO蛋白表达（灰度值）：0．47±0．05比0．21±0．04，均P〈0．05]。结论800μmol／L的PQ可以诱导人外周血中性粒细胞形成NETs。
- 金卫陆健谢晖蒋逸群孟潇潇朱勇王瑞兰
- 关键词：百草枯游离DNA中毒
- 早期免疫功能麻痹在重症甲型H1N1流感中的临床意义被引量：21
- 2017年
- 目的 分析重症甲型H1N1流感（甲流）患者的早期免疫学特征,为预测该病的预后提供理论依据.方法 采用回顾性分析方法,收集2015年10月至2016年12月在南京医科大学附属上海一院临床医学院就诊并确诊为重症甲流的15例患者临床资料,根据28 d预后分为存活组和死亡组;比较两组间早期临床特征、治疗方案、器官功能、炎症反应和免疫功能状态,通过Cox多因素回归法分析免疫功能是否为重症甲流患者28 d死亡的独立危险因素.结果 15例重症甲流患者均纳入最终分析.患者早期主要表现为咳嗽（93.3%）、发热（86.7%）、咳痰（80.0%）、气短（73.3%）、肌肉酸痛（40.0%）及乏力（40.0%）等;均给予抗病毒、抗感染、机械通气及抗凝治疗,部分患者使用俯卧位通气、肌松剂或体外膜肺氧合（ECMO）等;患者心、肾功能明显损害;急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）和序贯器官衰竭评分（SOFA）分别为（14.1±6.1）分和（9.6±4.1）分,提示患者病情危重.15例患者28 d死亡4例,11例痊愈出院.与存活组比较,死亡组患者APACHEⅡ评分明显升高（分：22.7±3.8比11.8±3.8）,肌钙蛋白〔cTn（μg/L）：0.52（0.07,2.02）比0.15（0.10,0.45）〕和尿素氮〔BUN（mmol/L）：11.9（6.7,29.1）比3.9（2.7,6.8）〕亦明显升高,而血小板计数（PLT）明显降低（×109/L：76±33比146±49,均P〈0.05）.与存活组相比,死亡组患者入院24 h内C-反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）水平显著升高〔CRP（mg/L）：172.2±88.5比74.8±33.1,IL-6（ng/L）：283.3（140.1,711.0）比18.5（12.7,71.4）,均P〈0.01〕;CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞及自然杀伤细胞（NK细胞）比例均显著降低（CD3＋T细胞：0.348±0.119比0.573±0.106,CD4＋T细胞：0.135±0.046比0.344±0.098,CD8＋T细胞：0.089±0.057比0.208±0.054,NK细胞：0.124±0.057比0.252±0.182,均P〈0.05）,但CD4＋/CD8＋比值、人白细胞DR�
- 钱永兵谢晖田锐陆健金卫王瑞兰
- 关键词：甲型H1N1免疫功能炎症反应重症
