孙文静
- 作品数:4 被引量:19H指数:2
- 供职机构:安徽医科大学公共卫生学院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 二甲基甲酰胺诱导H9c2心肌细胞凋亡机制研究被引量:2
- 2017年
- 目的 观察二甲基甲酰胺(DMF)致H9c2心肌细胞凋亡过程中核因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白胞质p65蛋白、核内p65蛋白、磷酸化核因子-κB抑制(p-IκB)蛋白以及线粒体通路相关蛋白胞质细胞色素C(Cyt-c)、 活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)水平的变化,探讨DMF引起H9c2心肌细胞凋亡的可能机制.方法 给予体外培养的H9c2心肌细胞200 mmol/L DMF染毒,蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测染毒0、2、4、6、8、12 h后胞质p65、核内p65、p-IκB的蛋白表达水平以及染毒0、2、4、8、12、24 h后胞质Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2的蛋白表达水平,免疫荧光细胞化学(IFC)法对染毒不同时间后的细胞内Cyt-c进行定位.结果 各组胞质p65、核内p65、p-IκB蛋白表达水平组间差异均有统计学意义(F=7.79、33.11、90.25,均P〈0.01);与对照组比较,2、4、6 h染毒组胞质p65蛋白表达水平均降低,2、4、6、8 h染毒组核内p65蛋白表达水平均升高,2、4、6 h染毒组p-IκB蛋白表达水平均升高,差异均有统计学意义(均P〈0.01).各组胞质Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2蛋白表达水平组间差异均有统计学意义(F=51.42、503.68、73.37,均P〈0.01);与对照组比较,8、12 h染毒组Cyt-c蛋白表达水平均升高,2、4、8、12、24 h染毒组Cleaved caspase-3蛋白表达水平均升高、Bcl-2蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(均P〈0.01).IFC法对细胞内Cyt-c检测显示,随着DMF染毒时间的延长,Cyt-c逐渐从线粒体释放到胞质内.结论 NF-κB信号通路与线粒体通路可能参与了DMF诱导的H9c2心肌细胞凋亡.
- 荣青秀杨永坚张婉婉王娟马晓丽向梅王璐璐孙文静
- 关键词:二甲基甲酰胺H9C2心肌细胞细胞凋亡线粒体
- 二甲基甲酰胺致H9c2心肌细胞炎性损伤研究被引量:6
- 2017年
- 目的探讨二甲基甲酰胺(DMF)对H9c2心肌细胞炎性损伤的影响及其可能的机制。方法取离体培养H9c2心肌细胞,设对照组和50、100、200 mmol/L组,分别予浓度为0、50、100、200 mmol/L DMF处理12 h;设对照组和2、4、6、8、12 h组,分别予浓度为200 mmol/L DMF处理0、2、4、6、8、12 h。以比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活力,紫外分光光度法检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活力,酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8水平,荧光探针法检测活性氧水平,免疫荧光细胞化学(IFC)法检测核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白定位。结果与对照组比较,50、100、200 mmol/L组细胞LDH、CK和CK-MB活力均升高(P<0.05),均呈剂量-效应关系(P<0.01);6、8、12 h组细胞LDH、CK和CK-MB活力均升高(P<0.01),呈时间-效应关系(P<0.01)。与对照组比较,200 mmol/L组细胞TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平均升高(P<0.05),4和12 h组细胞TNF-α水平均升高(P<0.05),2、4、6、8和12 h组细胞IL-1β水平均升高(P<0.05),2和4 h组细胞IL-6水平均升高(P<0.05),2 h组细胞IL-8水平升高(P<0.05);且TNF-α、IL-1β和IL-6水平在4 h组达到高峰,IL-8水平在2 h组达到高峰。2、4和6 h组细胞内活性氧水平均高于对照组(P<0.05);活性氧水平在2 h组达到高峰。IFC法对细胞内NF-κB p65蛋白定位显示,染毒后2、4 h组细胞核内p65蛋白荧光强度较对照组增强。结论 DMF对H9c2心肌细胞造成炎性损伤,且活性氧和NF-κB可能参与炎性损伤过程。
- 荣青秀杨永坚张婉婉马晓丽向梅王璐璐孙文静
- 关键词:二甲基甲酰胺H9C2心肌细胞炎性损伤活性氧核转录因子-ΚB
- 2008—2017年淮北矿业集团新发尘肺病流行病学特征被引量:10
- 2019年
- 目的为了解2008-2017年淮北市矿业集团煤矿企业新发尘肺病发病特征和流行趋势,为淮北市尘肺病防治提供科学依据。方法根据尘肺病报告系统中尘肺病例卡数据,导出2008-2017年新发尘肺病资料,从煤矿通风科和职业病防治院检测评价中心获得现场检测粉尘数据,录入Excel整理数据,SPSS 17.0统计分析。结果2008-2017年间新发病例894例,以煤工尘肺壹期580例(64.9%)为主;死亡35例(3.9%),壹期结核19例,贰期结核1例,叁期结核2例,合并结核占新发病例构成比2.5%。总体发病呈先上升后下降趋势,2010、2012年发病出现高峰;不同煤矿工种尘肺病分布差异有统计学意义(P<0.01),采煤工、掘进工接尘工龄差异无统计学意义(P>0.05),其他各组间差异均有统计学意义(均P<0.01);发病潜伏期煤矿混合工>掘进工>采煤工;煤矿混合工发病296例(33.1%),比重有所上升;不同接尘年代接尘工龄、发病年龄、发病潜伏期差异均有统计学意义(均P<0.01)。随着年代推移、接尘工龄缩短,发病潜伏期提前,发病年龄趋向年轻化。死因首位为肺癌/气管癌(11例),其次是肺心病(8例)和消化道癌(4例),死于单纯尘肺病仅3例;现场调查数据显示不同采样点,总粉尘浓度和呼吸性粉尘浓度差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论2008-2017年淮北矿业集团尘肺发病率呈下降趋势,作业场所粉尘浓度得到有效控制,但粉尘污染依旧严重。
- 孙文静许希海丁新平焦广良高伟杨永坚
- 关键词:流行病学煤矿粉尘综合防尘
- 二甲基甲酰胺通过活性氧介导线粒体通路诱导H9c2心肌细胞凋亡研究被引量:1
- 2017年
- 目的初步探讨二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)是否通过线粒体通路致H9c2心肌细胞凋亡及可能机制。方法 H9c2心肌细胞体外培养,分组给予不同处理:正常对照组,N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)(4 mmol/L)组,DMF(200 mmol/L)组,NAC(4 mmol/L)+DMF(200 mmol/L)组,24 h后使用免疫荧光细胞化学法(immune-fluorescence cytochemistry,IFC)检测细胞内细胞色素C(cytochrome C,Cyt-c)定位,蛋白免疫印迹法检测胞浆Cyt-c、Bcl-2、Cleaved caspse-3水平。结果 IFC观察发现,正常对照及NAC组Cyt-c呈点状或斑块状分布于胞浆,DMF作用24 h导致Cyt-c弥散分布于胞浆,而NAC可抑制DMF的这种作用;蛋白免疫印迹结果表明,Cyt-c蛋白水平组间差异具有统计学意义(F=26.14,P<0.001),与对照组相比,DMF组Cyt-c水平升高,NAC+DMF组较DMF组Cyt-c水平降低,差异均有统计学意义(均有P<0.001);Bcl-2蛋白水平组间差异具有统计学意义(F=28.92,P<0.001),与对照组相比,DMF组Bcl-2蛋白水平降低,与DMF组相比,NAC+DMF组Bcl-2蛋白水平升高,差异均有统计学意义(均有P<0.001);Cleaved caspase-3蛋白水平组间差异具有统计学意义(F=28.98,P<0.001)),与对照组相比,DMF组Cleaved caspase-3水平上升,NAC+DMF组较DMF组Cleaved caspase-3水平降低,差异均具有统计学意义(均有P<0.001)。结论 DMF可以通过线粒体通路诱导H9c2心肌细胞凋亡,氧化应激可能参与该通路的发生。
- 马晓丽杨永坚王娟荣青秀王璐璐孙文静向梅
- 关键词:二甲基甲酰胺