王璐璐
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：安徽医科大学公共卫生学院更多>>
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- 二甲基甲酰胺诱导H9c2心肌细胞凋亡机制研究被引量：2
- 2017年
- 目的 观察二甲基甲酰胺（DMF）致H9c2心肌细胞凋亡过程中核因子-κB（NF-κB）信号通路相关蛋白胞质p65蛋白、核内p65蛋白、磷酸化核因子-κB抑制（p-IκB）蛋白以及线粒体通路相关蛋白胞质细胞色素C（Cyt-c）、 活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）水平的变化,探讨DMF引起H9c2心肌细胞凋亡的可能机制.方法 给予体外培养的H9c2心肌细胞200 mmol/L DMF染毒,蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测染毒0、2、4、6、8、12 h后胞质p65、核内p65、p-IκB的蛋白表达水平以及染毒0、2、4、8、12、24 h后胞质Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2的蛋白表达水平,免疫荧光细胞化学（IFC）法对染毒不同时间后的细胞内Cyt-c进行定位.结果 各组胞质p65、核内p65、p-IκB蛋白表达水平组间差异均有统计学意义（F=7.79、33.11、90.25,均P〈0.01）;与对照组比较,2、4、6 h染毒组胞质p65蛋白表达水平均降低,2、4、6、8 h染毒组核内p65蛋白表达水平均升高,2、4、6 h染毒组p-IκB蛋白表达水平均升高,差异均有统计学意义（均P〈0.01）.各组胞质Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2蛋白表达水平组间差异均有统计学意义（F=51.42、503.68、73.37,均P〈0.01）;与对照组比较,8、12 h染毒组Cyt-c蛋白表达水平均升高,2、4、8、12、24 h染毒组Cleaved caspase-3蛋白表达水平均升高、Bcl-2蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义（均P〈0.01）.IFC法对细胞内Cyt-c检测显示,随着DMF染毒时间的延长,Cyt-c逐渐从线粒体释放到胞质内.结论 NF-κB信号通路与线粒体通路可能参与了DMF诱导的H9c2心肌细胞凋亡.
- 荣青秀杨永坚张婉婉王娟马晓丽向梅王璐璐孙文静
- 关键词：二甲基甲酰胺H9C2心肌细胞细胞凋亡线粒体
- 二甲基甲酰胺致H9c2心肌细胞炎性损伤研究被引量：6
- 2017年
- 目的探讨二甲基甲酰胺(DMF)对H9c2心肌细胞炎性损伤的影响及其可能的机制。方法取离体培养H9c2心肌细胞,设对照组和50、100、200 mmol/L组,分别予浓度为0、50、100、200 mmol/L DMF处理12 h;设对照组和2、4、6、8、12 h组,分别予浓度为200 mmol/L DMF处理0、2、4、6、8、12 h。以比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活力,紫外分光光度法检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活力,酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8水平,荧光探针法检测活性氧水平,免疫荧光细胞化学(IFC)法检测核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白定位。结果与对照组比较,50、100、200 mmol/L组细胞LDH、CK和CK-MB活力均升高(P<0.05),均呈剂量-效应关系(P<0.01);6、8、12 h组细胞LDH、CK和CK-MB活力均升高(P<0.01),呈时间-效应关系(P<0.01)。与对照组比较,200 mmol/L组细胞TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平均升高(P<0.05),4和12 h组细胞TNF-α水平均升高(P<0.05),2、4、6、8和12 h组细胞IL-1β水平均升高(P<0.05),2和4 h组细胞IL-6水平均升高(P<0.05),2 h组细胞IL-8水平升高(P<0.05);且TNF-α、IL-1β和IL-6水平在4 h组达到高峰,IL-8水平在2 h组达到高峰。2、4和6 h组细胞内活性氧水平均高于对照组(P<0.05);活性氧水平在2 h组达到高峰。IFC法对细胞内NF-κB p65蛋白定位显示,染毒后2、4 h组细胞核内p65蛋白荧光强度较对照组增强。结论 DMF对H9c2心肌细胞造成炎性损伤,且活性氧和NF-κB可能参与炎性损伤过程。
- 荣青秀杨永坚张婉婉马晓丽向梅王璐璐孙文静
- 关键词：二甲基甲酰胺H9C2心肌细胞炎性损伤活性氧核转录因子-ΚB
- IL-17A和骨桥蛋白在老年肺结核患者中的表达及意义
- 2021年
- 目的探究白细胞介素(interleukin,IL)-17A骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、在老年肺结核患者中的表达及意义。方法选取2018年7月至2019年7月合肥市第三人民医院收治的87例肺结核患者为肺结核组,同期选取50例健康体检者为对照组,比较两组人群血清IL-17A、OPN、IL-6、IL-23、IL-10、IL-12、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、干扰素诱导蛋白-10(interferon inducible protein-10,IP-10)水平,采用Pearson相关分析肺结核患者血清IL-17A与IL-6、IL-23、IL-10相关性及血清OPN与IL-12、IFN-γ、IP-10相关性。结果肺结核组血清IL-17A、OPN水平显著高于对照组[IL-17A:(112.15±10.96)pg/mL比(21.66±1.53)pg/mL,OPN:(570.18±122.34)ng/mL比(40.13±11.16)ng/mL,t值分别为-75.737和-40.122,P值均<0.05];肺结核组血清IL-6、IL-23水平显著高于对照组[IL-6:(58.47±6.34)pg/mL比(16.56±2.83)pg/mL;IL-23:(28.88±3.57)ng/mL比(9.46±1.28)ng/mL,t值分别为-53.132、-45.868,P值均<0.05);肺结核组血清IL-10水平显著低于对照组[(21.27±5.68)pg/mL比40.87±11.76,t=11.067,P<0.05];肺结核组血清IL-12、IFN-γ、IP-10水平显著高于对照组[IL-12:(168.42±58.28)pg/mL比(40.17±17.93)pg/mL;IFN-γ:(977.45±13.09)pg/mL比(108.91±9.66)pg/mL,IP-10:(1997.41±956.63)pg/mL比(893.30±259.36)pg/mL,t值分别为-19.019、-443.466和-10.137,P值均<0.05];肺结核患者血清IL-17A与IL-6、IL-23呈正相关(r值分别为0.549和0.602,P<0.05);肺结核患者血清IL-17A与IL-10呈负相关(r=-0.487,P<0.05);肺结核患者血清OPN与IL-12、IFN-γ、IP-10呈正相关(r值分别为0.532、0.519和0.497,P值均<0.05)。结论结核杆菌感染引起外周血中IL-6、IL-23水平升高并诱导Th17细胞分泌IL-17A,抑制Treg细胞分泌IL-10,同时结核杆菌感染引起OPN在外周血中的水平升高并增加IL-12、IFN-γ分泌,促进IP-10表达,导致肺部免疫损伤。
- 王璐璐马晓丽杨永坚
- 关键词：骨桥蛋白白细胞介素-17A肺结核免疫损伤
- 二甲基甲酰胺通过活性氧介导线粒体通路诱导H9c2心肌细胞凋亡研究被引量：1
- 2017年
- 目的初步探讨二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)是否通过线粒体通路致H9c2心肌细胞凋亡及可能机制。方法 H9c2心肌细胞体外培养,分组给予不同处理:正常对照组,N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)(4 mmol/L)组,DMF(200 mmol/L)组,NAC(4 mmol/L)+DMF(200 mmol/L)组,24 h后使用免疫荧光细胞化学法(immune-fluorescence cytochemistry,IFC)检测细胞内细胞色素C(cytochrome C,Cyt-c)定位,蛋白免疫印迹法检测胞浆Cyt-c、Bcl-2、Cleaved caspse-3水平。结果 IFC观察发现,正常对照及NAC组Cyt-c呈点状或斑块状分布于胞浆,DMF作用24 h导致Cyt-c弥散分布于胞浆,而NAC可抑制DMF的这种作用;蛋白免疫印迹结果表明,Cyt-c蛋白水平组间差异具有统计学意义(F=26.14,P<0.001),与对照组相比,DMF组Cyt-c水平升高,NAC+DMF组较DMF组Cyt-c水平降低,差异均有统计学意义(均有P<0.001);Bcl-2蛋白水平组间差异具有统计学意义(F=28.92,P<0.001),与对照组相比,DMF组Bcl-2蛋白水平降低,与DMF组相比,NAC+DMF组Bcl-2蛋白水平升高,差异均有统计学意义(均有P<0.001);Cleaved caspase-3蛋白水平组间差异具有统计学意义(F=28.98,P<0.001)),与对照组相比,DMF组Cleaved caspase-3水平上升,NAC+DMF组较DMF组Cleaved caspase-3水平降低,差异均具有统计学意义(均有P<0.001)。结论 DMF可以通过线粒体通路诱导H9c2心肌细胞凋亡,氧化应激可能参与该通路的发生。
- 马晓丽杨永坚王娟荣青秀王璐璐孙文静向梅
- 关键词：二甲基甲酰胺
