何赏
- 作品数：21 被引量：100H指数：6
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家重大科学仪器设备开发专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱研究细菌性血流感染的血清多肽指纹图谱被引量：5
- 2017年
- 目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)分析金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌引起的血流感染血清多肽指纹图谱,寻找差异多肽峰并建立相应的诊断模型。方法建立ICR小鼠金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌血流感染模型,收集血清标本,经弱阳离子交换磁珠纯化,MALDI-TOF MS检测及BioExplorer生物软件分析研究金葡菌感染组与正常对照组、大肠埃希菌感染组与正常对照组间血清多肽指纹图谱。结果比较金葡菌感染组与正常对照组发现,表达上调的多肽有6个,表达下调的多肽有7个,表达呈先上调后下调的多肽有8个。比较大肠埃希感染组与正常对照组发现,表达下调的多肽有5个,表达呈先下调后上调的多肽有4个,表达呈先上调后下调的多肽有8个。结论利用MALDI-TOF MS技术和Bio Explorer软件研究大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌血流感染的血清多肽,可以发现感染组与正常对照组间的差异多肽并有效地建立这两种细菌感染的诊断模型,对于细菌性血流感染的诊断具有一定的价值。
- 麻雅婷杨明何赏陈琛张可昕王成彬
- 关键词：大肠埃希菌
- 2015至2017年解放军总医院沙门菌分子分型和耐药基因特征分析被引量：8
- 2019年
- 目的了解解放军总医院沙门菌流行情况及耐药基因特征,为沙门菌的感染防治提供依据。方法回顾性研究,收集78株2015至2017年沙门菌临床分离株,患者年龄(49±21)岁,以中青年为主,临床样本主要来自粪便和静脉血,分别占44.87%(35/78)和33.33%(26/78)。对其进行血清型鉴定、体外药敏试验和全基因组测序后,进行多位点序列分型(MLST)和携带耐药基因分型,对耐头孢噻肟或环丙沙星沙门菌聚类分析。结果沙门菌血清型以D群沙门菌(53.85%)和C群沙门菌(21.79%)为主;ST分型以ST11型为主。体外药敏试验显示沙门菌多药耐药率为64.11%(50/78),全部敏感率为25.64%(20/78)。对萘啶酸耐药率最高,为65.38%(51/78)。沙门菌最常携带的耐药基因为β内酰胺类药物耐药基因,占78.21%(61/78)。结论本院分离的沙门菌ST型与携带耐药基因呈多样性,多数沙门菌对抗菌药物呈现多药耐药。对沙门菌进行分子分型、耐药基因分析及构建耐药菌进化树对确定耐药沙门菌间的亲缘关系,具有一定的临床意义。
- 荆颖罗燕萍叶坤李鑫叶丽艳张樱何赏王成彬
- 关键词：沙门菌属
- 经小鼠尾静脉注射诱导肺炎克雷伯菌血流感染模型的建立及评价被引量：5
- 2017年
- 目的建立可靠的肺炎克雷伯菌血流感染模型,为细菌性血流感染早期诊断相关研究提供可靠的依据。方法选择肺炎克雷伯菌标准株ATCC 700603为实验菌株,将不同浓度的细菌悬液通过尾静脉注入小鼠体内,按Karber法计算LD50,以1/2LD50浓度注射小鼠,通过其体征变化、体重变化、血培养、分子生物学试验、H·E染色等指标综合评价模型,验证造模效果。结果小鼠LD50为1.11×109 CFU/ml,菌液感染小鼠1h后开始出现立毛,活动减少;感染前体重为(33.60±1.21)g,注射菌液后1天内体重下降至(28.86±1.42)g,跟对照组比较有明显差别(P<0.05),7天后恢复正常水平(33.17±1.72)g;正常小鼠白细胞为(1.42±0.66)×109/L,注射菌液3h后升至(2.52±1.01)×109/L,6h升至(3.08±0.85)×109/L,跟对照组比较有明显差别(P<0.05),2天后白细胞进一步升至(6.88±3.11)×109/L,7天后仍无明显下降;小鼠全血培养结果表明前2天任意时间血培养结果为阳性;毒力因子引物扩增疑似菌DNA,结果表明小鼠血流感染病原菌均为肺炎克雷伯菌;注射菌液1天后小鼠肺泡明显渗出、水肿、白细胞浸润;2天后肺结构逐渐恢复,肝恢复速度较肺慢。结论建立了小鼠肺炎克雷伯菌血流感染模型,能够为血流感染的早期诊断和不同病原菌感染的鉴别诊断等研究提供了可靠的动物模型。
- 杨明麻雅婷何赏陈琛杨继勇向代军张可昕王成彬
- 关键词：肺炎克雷伯菌毒力因子聚合酶链反应
- 一种用于检测血培养瓶中临床常见病原菌的产品和方法
- 本发明公开了一种用于检测临床血培养瓶中常见病原菌的方法。该方法基于多重聚合酶链式反应技术，包括血培养瓶中细菌基因组DNA提取、PCR扩增、电泳凝胶紫外成像等步骤。基于该方法所制备的产品，可以实现十种细菌同时检测，较测序、...
- 王成彬陈琛何赏胡翀
- 文献传递
- 一种用于检测10种临床感染常见病原菌的核酸质谱方法
- 本发明公开了一种检测10种临床感染常见病原菌的引物系统。使用该检测体系，对病原菌感染患者的血液或体液(胸水，腹水，引流液，关节液，脑脊液)感染样本进行检测，检测结果结合其他临床指标，可为临床医师早期诊断，合理使用抗生素提...
- 王成彬何赏陈琛张可昕
- 文献传递
- 两种尿液干化学分析仪的稳定性和检测结果的一致性评价被引量：13
- 2018年
- 目的对两种尿液干化学分析仪的稳定性和检测结果一致性比较。方法使用AX-4280和Hipee S2两台尿检仪分别测定625例尿液常规标本,比较检测结果的阳性率和符合率。随机选取200例样本,通过尿沉渣显微镜复核潜血红细胞(RBC)和白细胞(WBC)两项检测结果。结果两台仪器室内质控符合率均达100%。临床样本测试结果显示pH值差异百分率均值<10%,比重(SG)差异百分率均值<1%,其余8项指标一般符合率都大于90%。AX-4280和Hipee S2的RBC测试结果与尿沉渣显微镜计数结果的符合率分别达81.0%、84.0%,WBC结果符合率分别达72.0%和77.5%。结论 AX-4280和Hipee S2检测结果一致性良好,但尿液干化学分析仪在RBC和WBC两项检测时,还应结合显微镜尿沉渣计数的结果进行临床判断。
- 孙京花陈昊邸平徐菡何赏马骏龙王成彬
- 关键词：尿液干化学分析稳定性一致性
- 干化学法和湿化学法对24h尿蛋白定量检测的比较及样本保存条件研究被引量：10
- 2020年
- 目的比较罗氏Cobas 501和天津果实Hipee M1生化分析仪24h尿蛋白定量检测结果的一致性,探讨样本保存条件对检测结果的影响。方法使用Cobas 501和Hipee M1两台生化分析仪分别对119例尿液常规标本进行24h尿蛋白定量检测,比较检测结果的相关性和一致性。通过混合尿液样本进行不同保存环境以及添加不同防腐剂测试,研究24h尿蛋白样本保存方法对测试结果的影响。结果两台生化分析仪的质控检测结果的变异系数分别为2.31%~5.61%和3.25%~5.22%,具有很好的重复性。两台生化分析仪尿液样本检测结果经回归分析,检测结果的一致性符合要求,差异无统计学意义(r=0.991,P>0.05)。尿液样本(2~8)℃冷藏保存、使用防腐剂二甲苯和硼酸在常温条件下保存,24h尿蛋白在各个时间点的检测结果,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论Cobas 501和Hipee M1两台仪器之间无明显差异,均具有较高的稳定性,使用硼酸作为防腐剂可用于尿液样本的常温保存。
- 孙京花陈昊邸平徐菡何赏马骏龙王成彬
- 实时荧光定量PCR非特异性分析被引量：5
- 2017年
- 聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)因灵敏度高、操作简便在各个领域得到了广泛的应用。然而,伴随其高灵敏度存在的非特异性问题在一定程度上限制了其应用。不同于普通检测方法,该技术的非特异性问题主要由可以指数扩增的引物二聚体(primer dimer,PD)引起。对此,引物设计时使用的中部同序引物对可以从根本上避免PD的产生,从而解决由其引起的非特异性问题。该文从PCR的发展和本质、PCR非特异性产生的原因和应对策略等方面作一总结及分析。
- 姜文灿岳素文何赏陈琛孙慧珍江洪王成彬
- 关键词：实时荧光定量PCR非特异性
- 基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统的血流感染致病菌早期检测被引量：2
- 2018年
- 目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)建立早期血流感染致病菌检测体系。方法选取大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、肺炎链球菌等10种临床最常见的病原菌作为检测对象,结合多重PCR技术和Mass ARRAY iPLEX单碱基延伸技术、MALDI-TOF MS技术,模拟细菌感染血液样本建立MALDI-TOF MS细菌核酸检测体系,测定其灵敏度;选取2017年3-5月在解放军总医院急诊科收集的疑似脓毒症患者血液样本33例对该体系进行验证,并将检测结果与微生物科血培养结果进行比较。结果本研究所建立的MALDI-TOF质谱血液致病菌检测系统可同时检测分属两组的10种细菌,所有细菌样本均可见延伸峰;灵敏度为100CFU/ml;与33例临床血培养鉴定结果的阴性符合率为100%(27/27),6例血培养阳性样品中有2例为摩氏摩根菌和人葡萄球菌感染,因这两种细菌不包含在10种检测对象之内而未能通过质谱检出,其余4例血培养阳性样品与质谱检测结果的符合率为100%。结论本研究建立的MALDI-TOF质谱检测体系可从全血样本中直接检测10种临床常见血流感染致病菌,无需进行培养,与传统血培养及生化鉴定相比具有耗时短、灵敏度高、准确度高等优势,可在一定程度上满足临床早期、快速诊断血流感染致病菌的需求。
- 张可昕胡翀陈琛何赏杨明王成彬
- 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱研究白色念珠菌血流感染的血清多肽指纹图谱被引量：6
- 2018年
- 目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析白色念珠菌所致血流感染的血清多肽指纹图谱,寻找差异多肽峰并建立相应的诊断模型。方法建立ICR小鼠白色念珠菌血流感染模型,收集血清标本,经弱阳离子磁珠纯化,MALDI-TOF MS检测及BioExplorer软件分析白色念珠菌感染与正常对照组的血清多肽指纹图谱,同时分析大肠埃希菌感染组、金黄色葡萄球菌感染组和白色念珠菌感染组的血清多肽指纹图谱。结果比较白色念珠菌感染组和正常对照组共得到135个多肽峰,其中表达上调的多肽有5个,表达下调的多肽有6个,表达呈先上调后下调的多肽有7个,组合m/z 1610.9、1742.3、2666.4、2778.0、3345.1、4528.8这6个峰建立诊断模型,该模型区分白色念珠菌感染的正确率为80.0%。综合比较大肠埃希菌感染组、金葡菌感染组和白色念珠菌感染组的血清多肽指纹图谱发现,有5个多肽峰在感染组中共同出现,分别为m/z 1513.8、2910.8、3538.1、3884.9和5007.3。结论利用MALDI-TOF MS可有效区分白色念珠菌感染和正常血清的多肽峰,同时感染中共同出现的多肽峰有望成为辅助诊断血流感染的标志物,通过建立相应的诊断模型能早期辅助诊断真菌性血流感染,为临床合理用药及标志物寻找提供依据。
- 麻雅婷杨明何赏陈琛王成彬
- 关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱血流感染白色念珠菌
