洪丰
- 作品数：18 被引量：28H指数：3
- 供职机构：济宁医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 成体人肝源性干细胞外泌体对刀豆蛋白A诱导的小鼠急性肝损伤的作用
- 2022年
- 目的探讨成体人肝源性干细胞外泌体(HLSC-exo)不同时间静脉注射对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法差速离心法提取HLSC-exo,Western blot检测其标志蛋白CD9、CD63的表达,纳米颗粒跟踪分析粒径分布。将56只C57BL/6雄性小鼠随机分为3组,空白对照组、ConA模型组和HLSC-exo治疗组。根据给予磷酸盐缓冲液或HLSC-exo后再注射ConA间隔时间不同,分为3 h、6 h、12 h亚组;检测血清中ALT、AST、TNFα、IL-10水平;比较各组小鼠肝脏大体形态及病理组织变化。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果HLSC-exo是直径为90~110 nm的囊泡体,电镜下可见清晰的“茶托样”结构,其特异性标志蛋白CD9和CD63均有明显的表达;空白对照组小鼠ALT、AST水平分别为(31.81±6.74)U/L、(69.75±8.30)U/L。相较于空白对照组,ConA 3 h、6 h、12 h模型组小鼠ALT、AST水平明显升高(P值均<0.001);HLSC-exo 3 h、6 h治疗组ALT、AST水平较ConA 3 h、6 h模型组明显下降[(225.58±115.59)U/L vs(1989.32±347.67)U/L、(1174.71±203.30)U/L vs(2208.33±349.96)U/L,(303.53±126.68)U/L vs(2534.27±644.72)U/L、(1340.70±262.56)U/L vs(2437.13±288.13)U/L,P值均<0.001];与HLSC-exo 6 h治疗组相比,HLSC-exo 3 h治疗组下降更明显(P<0.001)。空白对照组小鼠IL-10、TNFα水平分别为(313.51±10.97)pg/mL,(476.05±7.31)pg/mL。相较于空白对照组,ConA3 h、6 h、12 h模型组IL-10水平均明显下降(P值均<0.001);HLSC-exo 3 h、6 h治疗组IL-10水平相较于ConA 3 h、6 h模型组明显升高[(331.61±10.46)pg/mL vs(266.20±8.15)pg/mL、(288.13±10.74)pg/mL vs(264.41±9.12)pg/mL,P值均<0.001];且与HLSC-exo 6 h治疗组相比,HLSC-exo 3 h治疗组升高更明显(P<0.001)。相较于空白对照组,ConA 3 h、6 h、12 h模型组TNFα水平较正常组明显升高(P值均<0.001);HLSC-exo 3 h、6 h治疗组TNFα水平相较于ConA 3 h、6 h模型组明显下降[(478.26±12.99)pg/mL vs(551
- 韩鲁祥唐慧昕赵振峰李珊珊王全义孔令斌毕慧莹舒振峰段钟平陈煜洪丰
- 关键词：外泌体伴刀豆球蛋白A
- 干细胞治疗肝脏疾病：进展与挑战
- 晚期肝病是全球范围内的重大公共卫生负担,占全球死亡率的3.5%。当肝脏疾病发展至肝衰竭时,唯一有效的治疗方法是肝移植,但肝移植受肝源紧缺、高昂费用及术后排斥反应限制,迫切需要寻找新的有效治疗方法。随着再生医学的发展,干细...
- 李珊珊毕研贞洪丰陈煜
- 人肝源性干细胞腹腔移植不同时间对刀豆蛋白A诱导小鼠急性肝损伤的保护作用被引量：7
- 2017年
- 目的探讨人肝源性干细胞腹腔移植不同时间在刀豆蛋白A（ConA）诱导小鼠急性肝损伤中的保护作用。方法将88只雄性C57BL／6小鼠随机分成3组，正常小鼠对照组（C组），ConA模型组（M组），人肝源性干细胞（HYX1）＋ConA组（E组），M组和E组根据注射磷酸盐缓冲液或HYX1后再注射ConA间隔时间不同，又分为3h（M1、E1）、6h（M2、E2）、12h（M3、E3）、24h（M4、E4）、48h（M5、E5）组。检测外周血丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBil）水平；小鼠肝组织切片观察各组病理变化，并进行肝脏炎症活动度Ishak评分。采用独立样本t检验进行组间比较，P〈0．05为差异有统计学意义。结果C组的ALT、AST及TBil分别为（36．25±1．16）U／L、（120．20±5．77）U／L、（2．20±0．23）μmol／L；M1～M5组的ALT、AST、TBil及肝脏Ishak评分分别为（8721．23±837．39）U／L、（8110．31±290．10）U／L、（8．41±0．10）μmol／L、13．32±1．30，（8334．31±666．50）U／L、（7560．20士760．34）U／L、（10．40±0．80）μmol／L、12．67±0．81，（8960．75±551．93）U／L、（8535．62±675．14）U／L、（10．95±1．43）μmol／L、14．57±0．65，（8618．57±886．40）U／L、（11440．54±1327．86）U／L、（13．30±1．86）μmol／L、13．21±1．06，（10170．13±1112．37）U／L、（11470．56±1108．40）U／L、（12．75±1．55）μmol／L、15．07±1．58；E1～E5组的ALT、AST、TBil及肝脏Ishak评分分别为（1016．35±163．47）U／L、（952．30±103．91）U／L、（7．77±0．62）μmol／L，3．50±0．21，（42．10±6．20）U／L、（126．72±13．33）U／L、（3．41±0．53）μmol／L、2．01±0．40，（44．21±4．30）U／L、（216．71±35．88）U／L、（3．47±0．44）μmol／L、2．13±0．25，（2909．69±212．14）U／L、（2988．43士333．70）U／L、（7．03±0．93）μmol
- 毕研贞樊增陈东风李珊珊王全义高鹏飞王全全段钟平陈煜孔今斌王一波洪丰
- 关键词：小鼠急性肝损伤刀豆蛋白A
- 肝源性干细胞及其应用研究
- 2019年
- 1项目介绍肝干细胞(Hepatic Stem Cells,HSCs)是指具有干细胞特点,并能增殖、分化成为肝细胞和胆管细胞参与肝脏结构和功能重的一类细胞。1956年,Farber等将肝内可能具有分化潜力的细胞描述为卵圆细胞。1958年,Wilson和Leduc提出肝干细胞概念。肝干细胞根据其起源不同,可分为肝源性HSC和非肝源性HSC。肝源性干细胞起源于肝脏胆小管树的小胆管和赫令管,包括肝卵圆细胞和小肝细胞等。
- YE HONG毕研贞舒振锋洪丰
- 关键词：肝干细胞肝源性肝卵圆细胞WILSONSTEM细胞起源
- 正常免疫鼠人原代卵巢癌模型的建立被引量：6
- 2018年
- 目的:正常免疫小鼠皮下接种人原代卵巢癌细胞与微载体(microcarrier 6)复合体,建立正常免疫鼠人原代卵巢癌模型。方法:将36只C57BL/6雌鼠按是否将人原代卵巢癌细胞与微载体共同培养随机分为原代卵巢癌细胞组、空载体组和三维原代卵巢癌细胞组。将人原代卵巢癌细胞与microcarrier 6共同培养,于小鼠皮下注射,观察小鼠的成瘤时间、成瘤率和病理学特点。结果:原代卵巢癌细胞组和空载体组均未成瘤,三维原代卵巢细胞组总成瘤率达58%,成瘤快,镜下观察符合人卵巢癌特点。结论:本实验成功建立了正常免疫小鼠人原代卵巢癌模型,该模型能更好地模拟卵巢癌在人体内的发生发展情况,可用于更多抗肿瘤药物研究。
- 黄蓉洪丰毕研贞王云飞舒振锋石秀玲杨飞王卫彭存旭
- 关键词：卵巢癌MICROCARRIER动物模型皮下移植瘤
- IPI-926对人结肠癌HT-29细胞增殖的影响及其机制被引量：1
- 2018年
- 目的观察IPI-926对人结肠癌HT-29细胞增殖的影响,并探讨在人结肠癌HT-29细胞增殖过程中IPI-926对Hedgehog(刺猬,Hh)信号通路因子表达的影响。方法常规体外培养人结肠癌HT-29细胞,随机分为对照组(空白培养基)和不同浓度IPI-926(10 nM、20 nM、30 nM)的实验组,培养HT-29细胞72 h后倒置显微镜观察各组细胞形态变化;MTT法测定各组培养72 h后HT-29细胞抑制率;RT-PCR和Western blot分别检测各组培养72 h后HT-29细胞Shh、Ptch、Smo和Gli-1 mRNA及其相关蛋白的表达;采用独立样本t检验进行组间比较,P<0.05为差异有统计学意义。结果对照组细胞生长状态良好;而用不同浓度IPI-926(10 nM、20 nM、30 nM)处理的HT-29细胞细胞凋亡增加,并随着IPI-926浓度的增加,凋亡率明显升高;10 nM、20 nM、30 nM浓度的IPI-926对人结肠癌细胞HT-29抑制率分别为(17.23±1.32)%、(38.34±1.82)%和(75.81±3.43)%,随着浓度的增加而升高,抑制率呈量效关系。空白对照组和IPI-926浓度为10 nM时Shh、Ptch、Smo和Gli-1的mRNA及其蛋白表达差异均无统计学意义,但在IPI-926浓度为20 nM和30 nM时,Shh、Ptch、Smo和Gli-1的mRNA及其蛋白表达均比空白对照组明显下调,并且IPI-926浓度为30 nM时的Shh、Ptch、Smo和Gli-1的表达明显高于20 nM时的mRNA表达。结论小剂量IPI-926不能有效抑制HT-29细胞的增殖,但当超过20 nM时则可以有效抑制HT-29细胞的增殖;其抑制的机制可能与Hh通路相关成员Shh、Ptch、Smo和Gli-1的表达有关。
- 左赛毕研贞孔令斌王一波张秋生洪丰张帆邱悦
- 关键词：结肠癌HT-29细胞
- 通过对比NSG小鼠探讨正常免疫小鼠人结肠癌移植瘤模型的特点和意义
- 2020年
- 目的比较NSG小鼠和正常免疫小鼠两种人结肠癌移植瘤模型的特点,为研究结肠癌发病机制和研制抗结肠癌新药提供更合适的模型。方法将C57BL/6、NSG小鼠分别按移植物的不同分为细胞对照组、细胞-微载体复合物实验组。首先将人结肠癌HCT116细胞与新型微载体共培养,建立细胞-微载体复合物,然后采用皮下注射方式将其接种于小鼠背部,记录肿瘤生长曲线,成瘤率及镜下病理学等特点。结果C57BL/6小鼠实验组均成瘤,成瘤率达80%,对照组均未成瘤;NSG小鼠实验组与对照组均成瘤,成瘤率达90%。C57BL/6小鼠与NSG小鼠相比,虽然成瘤速度慢,但镜下病理组织、免疫组化表现一致,均证实异型细胞为人源性结肠癌细胞。结论相比NSG小鼠,借助新型微载体构建正常免疫小鼠人结肠癌移植瘤模型,更确切,真实地反映肿瘤发生、发展与患者免疫功能变化之间的内在联系,同时也为人结肠癌的精准治疗提供了新的动物模型。
- 程姝敏张凯谌通毕研贞刘铜军孔令斌唐慧昕王全义洪丰舒振锋
- 关键词：结肠癌动物模型微载体
- Cenicriviroc治疗肝纤维化的实验研究被引量：2
- 2016年
- 探讨Cenicriviroc(CVC)对硫代乙酰胺(TAA)所致大鼠肝纤维化的治疗作用。SD雄性大鼠66只被随机分为模型对照组和CVC治疗组。各组大鼠于同日开始腹腔注射TAA 30mg/Kg,3次/周,连续8周;另设空白对照组。治疗组分别在TAA诱导肝纤维化不同时间,按30mg·kg-1·d-1灌胃给药,包括:与TAA同日开始给CVC,连续8周(1B组);TAA腹腔注射4周后,给予CVC,连续4周(2B组)和TAA腹腔注射8周停用后,再给予CVC,4周(3B组)。治疗结束后,检测血清中生化指标,留取肝组织,行HE和苦味酸天狼星红溶液染色,观察肝脏病理学改变,并进行肝纤维化定量分析。同时,以qRT-PCR检测CVC对培养肝星状细胞(HSC)表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和胶原蛋白I(collagen I)的直接作用。与模型组比,早、中期CVC治疗(1B组和2B组)显著降低肝纤维化大鼠增高的肝脏系数(P<0.05)和血清中异常升高的天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)(P<0.01),病理组织学检查结果表明,1B组和2B组大鼠肝纤维组织增生和肝组织炎症活动度较模型组均有显著的改善(P<0.05),其肝组织中胶原纤维面积显著降低(P<0.01),但是CVC对已形成的肝硬化(3B组)无显著改善作用。体外实验显示,CVC可以直接抑制HSC胶原蛋白I mRNA表达(P<0.05),但α-SMA mRNA表达与对照组无明显差异。CVC具有明显抑制肝纤维化形成作用,但对已形成的肝硬化缺乏逆转作用。
- 司传平高鹏飞王全义张秋生张惠王一波孙富强张耀文鲁园园Ye Hong李灿委洪丰
- 关键词：肝纤维化肝星状细胞硫代乙酰胺
- 人源化食管癌移植瘤模型的建立
- 2021年
- 目的将人原代食管鳞状细胞癌细胞与新型3D微载体——microcarrier 6复合,皮下接种于正常免疫功能小鼠,建立患者来源的食管癌移植瘤动物模型,并分析移植瘤病理学特点。方法将40只C57BL/6雄性小鼠按是否接种微载体或微载体与人源性食管鳞状细胞癌细胞复合物分为对照组和实验组,分4次实验进行,每次用10只小鼠,每组各5只,将上述载体及复合物分别接种于小鼠腋下。观察小鼠成瘤时间、成瘤大小、成瘤率,后期行移植瘤病理学苏木素-伊红(HE)染色及免疫组化分析。结果基于microcarrier 6皮下种植人原代食管鳞状细胞癌细胞可在正常免疫功能小鼠成功长出移植瘤,成瘤率为80%,成瘤时间为10~12天,成瘤直径0.8~1.2 cm。病理学HE染色和免疫组化检测结果均符合人食管癌病理学特点。结论应用新型3D微载体复合人食管鳞状细胞癌细胞可成功构建正常免疫功能小鼠人食管癌移植瘤模型。
- 胡瑞瑞秦玉芬张红梅王全义洪丰
- 关键词：食管鳞状细胞癌
- 基于microcarrier 6正常免疫鼠人源宫颈癌移植瘤模型的构建及其临床应用意义被引量：1
- 2022年
- 目的 基于新型3D微载体(microcarrier 6),复合人原代宫颈癌细胞,皮下接种于具有正常免疫功能的小鼠,以期建立新型宫颈癌人源肿瘤移植瘤动物模型(PDX),并分析正常免疫鼠移植瘤病理学特点。方法 将75只雌性C57BL/6小鼠按移植物不同随机分为三组:细胞对照组、空白对照组和实验组。从新鲜手术标本宫颈癌组织中分离提取原代宫颈癌细胞,并与microcarrier 6共孵育,在体外构建3D微肿瘤模型。将构建的宫颈癌细胞-微载体植入小鼠皮下构建正常免疫小鼠患者来源的宫颈癌移植瘤模型。观察成瘤时间、成瘤率;观察对比肿瘤患者与其对应的移植瘤病理HE染色及应用免疫组化检测P16、CK5/6在各组移植瘤中的表达情况。结果 细胞对照组均没有小鼠成瘤,实验组5次实验,总成瘤率高达88%,成瘤时间10天左右,移植瘤生长速度快,HE染色和免疫组化均符合人宫颈癌特点。结论 本实验基于microcarrier 6复合患者来源的原代宫颈癌细胞在正常免疫小鼠体内成功建立了新型人宫颈癌PDX模型,该模型能更好地揭示宫颈癌的发生发展及转归与机体免疫之间的内在关系,更好地研究宫颈癌在机体中发生、发展机制,为免疫治疗提供了新的更有价值的动物模型。
- 刘昆燕张秋实张凯洪丰王全义彭一晴赵影段亚楠周润生彭存旭
- 关键词：子宫颈肿瘤MICROCARRIER免疫异种移植动物模型
