卢毅
- 作品数:5 被引量:5H指数:1
- 供职机构:江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金镇江市科技支撑计划(社会发展)项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- PDGF-BB通过SIRT3影响糖酵解途径调控肺动脉平滑肌细胞的表型转化被引量:2
- 2019年
- 目的探讨血小板衍生生长因子(PDGF)-BB是否通过去乙酰化酶沉默信息调节因子3(SIRT3)影响糖酵解途径进而调控肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的表型转化。方法采用组织贴块法培养大鼠原代PASMC。分组实验中以PDGF-BB作为刺激因子,以2-脱氧葡萄糖(2-DG)作为糖酵解途径抑制剂,将PASMC分为空白对照组、PDGF-BB(30 ng/ml)组、PDGF-BB(30 ng/ml)+2-DG(10 mmol/L)组;在慢病毒过表达实验中,将PASMC分为空白对照组、PDGF-BB(30 ng/ml)组,PDGF-BB(30 ng/ml)+SIRT3过表达组,PDGF-BB(30 ng/ml)+空载体组。分别采用实时定量PCR(RT-qPCR)及Western blot法检测PASMC中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)、钙调蛋白(calponin)、波形蛋白(vimentin)等表型指标的表达。同时采用细胞免疫荧光染色检测α-SMA表达水平。采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)检测PASMC增殖情况。采用Western blot法检测PDGF-BB刺激后SIRT3的蛋白表达。在慢病毒过表达实验中,分别采用RT-qPCR、Western blot法检测葡萄糖转运蛋白1(Glut1)及有氧糖酵解酶mRNA和蛋白的表达水平。结果(1)PDGF-BB通过糖酵解途径影响PASMC表型转化:PDGF-BB组细胞收缩表型指标SM-MHC、calponin、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平均低于空白对照组(P均<0.05),合成表型指标vimentin的mRNA和蛋白表达水平则均高于空白对照组(P均<0.05)。PDGF-BB+2-DG组细胞收缩表型指标SM-MHC、calponin、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平均高于PDGF-BB组(P均<0.05),合成表型指标vimentin的mRNA和蛋白表达水平则均低于PDGF-BB组(P均<0.05)。免疫荧光结果显示,PDGF-BB组α-SMA阳性细胞数少于空白对照组,而PDGF-BB+2-DG组则多于PDGF-BB组。(2)PDGF-BB通过糖酵解促进细胞增殖:PDGF-BB组细胞增殖数多于空白对照组,而PDGF-BB+2-DG组则少于PDGF-BB组。(3)PDGF-BB抑制PASMC的SIRT3蛋白表达:PDGF-BB组细胞SIRT3蛋白表达水平低于空白对照组(P<0.05)。(4)PDGF-BB通过SIRT3影响糖酵解:RT
- 卢毅陈蕊马金玉王伦平仇苓苓王翠平严金川刘培晶
- 关键词:肺动脉糖酵解血小板衍生生长因子
- 主动脉瓣重度狭窄伴多脏器功能衰竭接受经导管主动脉瓣置换1例被引量:1
- 2019年
- 1病例资料患者,女,77岁,身高155 cm,体重35 kg,2017年5月因“反复胸闷、气急1年”就诊于复旦大学附属中山医院,心脏彩超示主动脉瓣增厚、钙化伴重度狭窄及中度反流,左室壁节段收缩异常,中度二、三尖瓣反流,重度肺动脉高压,肺动脉收缩压(pulmonary artery systolic pressure,PASP)91 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa).患者及家属拒绝行主动脉瓣置换术,此后不规律服用托拉塞米、螺内酯、美托洛尔等治疗,胸闷、气急的症状反复发作。
- 马金玉王伦平卢毅刘培晶严金川李璇梁仪
- 关键词:多脏器功能衰竭肺高压
- 二十二碳六烯酸通过活化T细胞核因子1调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化被引量:1
- 2017年
- 目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)表型转化的分子机制。方法采用组织贴块法培养大鼠PASMC。将PASMC分为常氧组、低氧组(1%O2、94%N2、5%CO2,低氧刺激12 h)、低氧(1%O2、94%N2、5%CO2)+DHA(10 μmol/L)组(给予DHA处理后低氧孵育12 h),低氧(1%O2、94%N2、5%CO2)+DHA(10 μmol/L)+过表达NFATc1组(细胞转染过表达NFATc1载体24 h,然后再给予DHA及低氧刺激12 h)及低氧(1%O2、94%N2、5%CO2)+DHA(10 μmol/L)+敲低NFATc1组(细胞转染NFATc1小干扰RNA 24 h,然后再给予DHA及低氧刺激12 h)。使用三气培养箱制造低氧环境加以干预。分别采用实时定量PCR和Western blot法检测各组细胞的NFATc1mRNA和蛋白表达水平,分别采用免疫荧光染色、Western blot和实时定量PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平,采用实时定量PCR法检测平滑肌肌动蛋白相关蛋白22(SM22)mRNA表达水平,采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)法检测PASMC增殖情况。
结果低氧刺激12 h,低氧组大鼠PASMC NFATc1的mRNA及蛋白表达水平均明显高于常氧组(P均〈0.05),而低氧+DHA组则均明显低于低氧组(P〈0.05)。转染NFATc1过表达病毒及小干扰RNA 24 h后,低氧刺激大鼠PASMC 12 h,低氧组大鼠PASMC α-SMA阳性的细胞数、α-SMA蛋白及mRNA以及SM22 mRNA表达水平均明显低于常氧组(P均〈0.05),低氧+DHA组则高于低氧组(P〈0.05),低氧+DHA+过表达NFATc1组则明显低于低氧+DHA组(P〈0.05),而低氧+DHA+敲低NFATc1组又明显高于低氧+DHA+过表达NFATc1组(P〈0.05)。低氧组大鼠PASMC增殖率明显高于常氧组(P〈0.05),低氧+DHA组则明显低于低氧组(P〈0.05),低氧+DHA+过表达NFATc1组则明显高于低氧+DHA组(P〈0.05),而低氧+DHA+敲低NFATc1组又明显低于低氧+DHA+过表达NFATc1组�
- 谢其非陈蕊卢毅严金川刘朔李梅宋娟邵晨王中群刘培晶
- 关键词:肺动脉肌细胞平滑肌
- 二十二碳六烯酸通过NFATc1调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化
- 谢其非陈蕊卢毅严金川刘朔李梅宋娟王中群刘培晶
- 冠状动脉严重三支病变合并顽固性室性心律失常1例被引量:1
- 2018年
- 1病例资料患者,男,56岁,因"反复右上腹胀痛2年"于2015年4月21日拟诊为"胆囊结石伴胆囊炎"收入我院普外科。入院后全胸片示心影增大;心脏超声示左房内径42mm,左室舒张末期内径65mm,收缩末期内径53mm,右房、右室大小均正常,左室射血分数(LVEF)36%;经会诊后转入心内科。追溯病史:患者近1年活动时有胸闷、气短,无胸痛、晕厥,可完成日常活动。
- 卢毅马金玉刘培晶严金川孙涛李卫东梁仪金鸣锋
- 关键词:顽固性心律失常心室电风暴