您的位置： 专家智库 > >

王影

作品数：3 被引量：0H指数：0
供职机构：教育部更多>>
发文基金：国家自然科学基金天津市科技攻关项目更多>>
相关领域：生物学医药卫生理学更多>>

合作作者

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇生物检测
  • 1篇受体
  • 1篇受体系统
  • 1篇菌素
  • 1篇克隆
  • 1篇克隆表达
  • 1篇环孢菌素
  • 1篇环孢菌素A
  • 1篇基因
  • 1篇基因克隆
  • 1篇二噁[口英]
  • 1篇芳香烃
  • 1篇杆菌
  • 1篇PCR
  • 1篇RNA
  • 1篇大肠杆菌

机构

  • 2篇南开大学
  • 1篇天津市疾病预...
  • 1篇天津医科大学

作者

  • 2篇宓怀风
  • 2篇王影
  • 1篇汤乃军
  • 1篇沈钧
  • 1篇王卓
  • 1篇马慧
  • 1篇吴蕴棠
  • 1篇张万起
  • 1篇赵娜
  • 1篇陈琛

传媒

  • 1篇中华预防医学...
  • 1篇南开大学学报...

年份

  • 1篇2009
  • 1篇2007
共 3 条 记 录，以下是 1-2
全选 清除 导出
排序方式：
基于克隆表达的芳香烃受体系统的二噁[口英]生物检测方法研究
2009年
目的研究人工克隆表达的芳香烃受体核转位蛋白（ARNT）与天然芳香烃受体（AhR）特异性结合及其对制备的多克隆抗体识别的情况，通过两者结合与二噁[口英]（TCDD）的剂量反应关系，探索TCDD生物检测方法。方法（1）以小鼠肝组织总RNA为模板，通过RT—PCR扩增目的基因AhR—PAS[periodicity （Per）／Aryl hydrocarbon nuclear translocator（ARNT）／single—minded（Sim）]端、AhR羧基末端（AhR—C端）、ARNT—PAS端，构建含有目的基因的pGEX-5XI重组表达质粒，并采用大肠杆菌原核系统进行克隆表达。（2）用上述克隆表达的AhR片段蛋白（AhR—PAS、AhR—C）作为抗原免疫家兔，制备多克隆抗体。（3）从C57BL／6J纯系小鼠肝组织中提取具有结合活性的天然AhR复合物，将天然AhR复合物与结合在谷胱甘肽硫转移酶（GST）上面的融合蛋白GST—ARNT—PAS，分别在0．25、0．50、1．00、2．00pmol TCDD存在的条件下进行结合，通过亲和吸附和免疫印迹观察所形成的蛋白复合物的量。结果（1）成功构建含有目的基因AhR—PAS、AhR—C和ARNT—PAS的重组质粒，并通过大肠杆菌原核系统表达出具有结合活性的目的蛋白；（2）免疫家兔制得的多克隆抗体AhR—PAS、AhR-C的检测下限分别为5、1ng；（3）测得该法制备的小鼠肝脏匀浆中总蛋白质的浓度为60．5mg／ml；在TCDD存在的条件下，克隆得到的融合蛋白GST—ARNT—PAS能够与天然AhR复合物特异性地结合，并测得检测下限为0．25pmol，约80pg TCDD。结论成功地建立了基于克隆表达的芳香烃受体系统的TCDD生物检测方法，且检测下限达到pg级别。
王卓赵娜沈钧王影汤乃军吴蕴棠张万起宓怀风
关键词：受体芳香烃
猪亲环素18的基因克隆与融合蛋白的表达
2007年
亲环素18(CyP18)具有肽脯氨酰顺/反异构酶活性,广泛存在于不同物种中,是一种高度保守的蛋白质.它能和免疫抑制性药物环孢菌素 A 结合,参与免疫抑制;此外,作为分子伴侣,它还加速蛋白质的折叠、组装和分解.从猪肝中提取总 RNA,首次通过 RT-PCR 扩增出 pCyP18,对其基因进行克隆和序列测定,并转入大肠杆菌中进行高效表达,得到纯化的 pCyP18蛋白.
马慧陈琛王影宓怀风
关键词：环孢菌素ARNA大肠杆菌
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0