陈放 作品数:369 被引量:3,215 H指数:32 供职机构: 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 经济管理 更多>>
麻疯树核糖体失活蛋白(curcin)的化学修饰与其活性的关系 被引量:7 2006年 通过无细胞体系蛋白合成抑制活性的测定,结合荧光光谱和圆二色谱技术,对麻疯树核糖体失活蛋白(cur-c in)部分氨基酸残基进行特异性化学修饰,探讨维持curc in活性的必需氨基酸基团及修饰对curc in结构的影响.结果表明,组氨酸和半胱氨酸的修饰对活性没有影响.色氨酸和赖氨酸的修饰使curc in的活性分别下降了50%和100%,表明色氨酸和赖氨酸是维持curc in活性的重要残基.精氨酸修饰导致curc in的抑制活性完全丧失,内源荧光强度下降,最大发射波长发生红移,CD谱发生显著变化;表明精氨酸也是维持curc in活性的必需残基,并且对空间结构影响较大,推测对精氨酸的修饰破坏了精氨酸与其它基团的连接,导致curc in分子结构发生改变,失去和底物结合的能力,因而活性丧失. 崔维科 赵琦 陈兴春 王克秀 徐莺 唐琳 王胜华 白洁 陈放关键词:化学修饰 荧光光谱 圆二色谱 干旱胁迫下外源钙对麻疯树相关生理指标的影响 被引量:21 2008年 以0.01,0.05,0.1 mol/L CaCl2溶液浸泡麻疯树种子及以0.01 mol/L Ca(NO3)2喷施麻疯树幼苗叶片.测定了不同条件和处理时间下种子萌发率、叶片相对含水量、脯氨酸(Pro)含量、丙二醛(MDA)含量等指标,考察麻疯树在干旱胁迫下相关生理指标的影响.实验结果表明,CaCl2溶液浸种提高了干旱条件下叶片相对含水量和Pro含量,降低了叶片的MDA含量;低浓度CaCl2溶液浸种(≤0.05 mol/L)能促进麻疯树种子的萌发势和萌发率,其中以0.01mol/LCaCl2溶液浸种效果最好.叶片喷施Ca(NO3)2显著提高了PEG胁迫下麻疯树幼苗叶片的相对含水量和Pro含量,降低了MDA含量.因此,外源钙能提高麻疯树幼苗的抗旱性,增强干旱胁迫下的渗透调节作用,保护细胞质膜的结构,调节干旱胁迫导致的生理反应. 毛俊娟 倪婷 王胜华 陈放关键词:麻疯树 钙 干旱胁迫 麻疯树叶片高效再生体系与不定芽起源 被引量:5 2010年 建立了培养周期短、再生效率高的麻疯树叶片再生体系.6-BA是诱导麻疯树叶片产生愈伤组织的关键外源激素,添加低浓度的2,4-D能增强6-BA的诱导效果.最佳愈伤组织诱导培养基是MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L 2,4-D,瘤状愈伤组织的诱导率高达91.98%±2.1%.光培养下产生的愈伤组织质地紧密,瘤状结构丰富,再生能力强.随着继代次数的增加,愈伤组织褐化加重,逐渐失去再生能力.不定芽再生培养基中,比较了3种细胞分裂素6-BA、KT和TDZ对诱导愈伤组织分化不定芽的影响.6-BA诱导不定芽的能力最优,其次是TDZ,KT最差.KT与BA的组合诱导不定芽再生的能力最强,最适的不定芽再生培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L IBA+0.1 mg/L GA3,再生率mg/L)中均能产生根系,平均根系5.2个.对麻疯树叶片再生的各阶段进行了石蜡切片,揭示了不定芽的起源及发育的全过程,明确了不定芽起源于叶片的表皮细胞层. 宗桦 王盛华 邓新林 欧阳超 陈放关键词:麻疯树 叶片 植物生长调节剂 不定芽 愈伤组织 麻疯树叶中过氧化物酶JCP-1的分离纯化和几种特性的检测 2010年 麻疯树叶片蛋白粗提液经硫酸铵分级沉淀,强阴离子琼脂糖、强阳离子琼脂糖和交联葡聚糖层析,得到一个比活为4499U·mg-1(蛋白)过氧化物酶,命名为JCP-1。其分子量为49kDa,等电点为pH3.3,最适pH为5.0 ̄6.0。以H2O2为底物的Km为2.14mmol·L-1。JCP-1具有宽泛的最适保存pH(7.0 ̄11.0)和较高的耐热性(80℃高温处理15min,活性保持在90%以上)。30%PEG6000处理模拟干旱胁迫及50℃高温胁迫麻疯树苗,其叶片中JCP-1活性分别提高121%和155%。 叶生亮 蔡峰 朱勋路 秦晓波 徐莺 陈放关键词:麻疯树 过氧化物酶 纯化 酶学性质 抗逆性 苦瓜(Momordica CharantiaL.)MADS-box基因BAG启动子的克隆分析及表达载体的构建 被引量:7 2003年 作者提取苦瓜基因组总DNA,构建了DNA步移文库,并根据已克隆并公布的苦瓜MADS box基因BAG的基因序列设计引物,通过染色体步移技术克隆出BAG基因起始密码子上游调控序列BAGP.对BAGP的鉴定和分析表明其具备大多数高等植物启动子的保守元件,预测它对BAG基因的表达具有一定的作用.为鉴定BAG基因的基本启动子元件,将基因5′侧翼序列做缺失片段分析,利用PCR方法从BAGP中得到3个大小不等两端带有HindⅢ,BamHⅠ酶切位点的片段BAGP1,BAGP2和BAGP3,定向插入载体pMGFP4(pBI221改建,报告基因为GFP)中,取代原有的CaMV35S启动子,构建了由驱动报告基因GFP的植物表达载体BAGPV1,BAGPV2和BAGPV3. 杨满业 赵茂俊 唐琳 徐莺 王胜华 邢杰 陈放关键词:苦瓜 启动子 MADS-BOX基因 PCR扩增 麻疯树新基因JcPIP的分子克隆与功能研究 被引量:5 2007年 从大戟科耐旱植物麻疯树cDNA中克隆得到了一个麻疯树质膜内膜蛋白(PIP)新基因(JcPIP)。其cRNA在非洲爪蟾卵母细胞(Xenopus oocytes)中异源表达后发现细胞膨胀率扩大了10倍。聚类分析表明,麻疯树PIP蛋白与蓖麻、葡萄和菠菜PIP蛋白在进化上有最近的亲缘关系。半定量RT-PCR研究表明该基因在植株的整个生长发育期都有表达。但干旱胁迫下JcPIP基因表达量没有显著变化。 张颖 江璐玎 王云霄 牛蓓 陈放关键词:水通道蛋白 功能分析 干旱胁迫 中国石漠化的综合治理技术与效果 本文对中国石漠化的综合治理技术与效果进行了阐述。中国岩溶地貌发育,面积达344万km<'2>,其中严重石漠化的面积4.63万km<'2>,短期内有潜在石漠化趋势的土地8.76万km<'2>,并呈逐年扩大趋势。石漠化的扩展... 温远光 陈放 吴庆标 刘京涛关键词:石漠化治理 生态模式 水土保持 生物技术 文献传递 液相杂交快速检测特异DNA 2013年 检测特异DNA片段的方法中,传统Southern blot技术由于其高度可重复性及能够显示条带大小的特性,一直是DNA检测的"黄金标准"。但是杂交时间长,步骤复杂,放射性污染等问题亟待解决。为了简化Southern blot,研究使用了一种液相杂交快速检测DNA的方法,即使用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的dUTP掺入探针后,在溶液中与待检测DNA样本42℃下杂交,然后琼脂糖凝胶电泳检测荧光杂交信号。利用质粒为模板,优化了探针制作、杂交液组成、杂交时间和温度等参数。在FITC-dUTP:dTTP比例为1∶3、模板质粒浓度为50μg、1×杂交缓冲液(25mmol/LTris,10mmol/L EDTA,8mmol/L Nacl,PH=8.0)中95℃变性5~9 min和42℃杂交3h的实验条件下,可检出1.2μg的质粒,探针灵敏度为7.3ng/μl。这种方法不需要转膜,曝光,大大节约了时间,简化了操作,荧光检测也为该方法同时检测多色样本提供了可能,可广泛应用于核酸检测。 詹诚 毛强 王胜华 陈放关键词:SOUTHERN BLOT DNA检测 麻疯树AFLP体系的建立与优化 被引量:8 2009年 为了建立麻疯树AFLP(Amplified fragment length polymorphism)反应体系及筛选出扩增条带丰富的引物,以17份来自不同地方的麻疯树的幼嫩叶片为试材,对影响AFLP分析的关键因素包括DNA的提取质量和浓度、MseⅠ/EcoRⅠ酶切反应时间和浓度、银染方法等进行了研究,从64对引物组合中筛选出适合麻疯树的引物.结果表明,改良的CTAB方法提取的DNA质量比较好.建立了一种适于麻疯树AFLP的优化体系:模板DNA的用量为400ng,酶切反应时间为3h,筛选出了8对适合麻疯树扩增条带多、多态性强的引物.最终建立了适用于麻疯树的AFLP反应体系,并筛选出适合麻疯树的引物,为今后利用AFLP标记技术进行麻疯树的遗传多样性分析提供了标准化程序. 张正银 刘波洋 陈放 唐琳关键词:AFLP 麻疯树 DNA提取 一种提取富含油脂植物组织总RNA的改良SDS酸酚法 被引量:6 2009年 采用常规的方法提取富含油脂的植物组织总RNA常难以取得满意的结果.对林莎两次裂解法进行了改良,即将SDS的浓度降低至1%,所用酸酚的pH值降低至4.0,去掉提取液II处理步骤,获得的总RNA效果较好:得率高,RNA产量可达74.7μg(100mg)-1;没有DNA污染,A260nm/A280nm值为2.026,A260nm/A230nm值为2.082,说明蛋白质及其它污染非常低,通过RT-PCR成功地扩增出了麻疯树curcin基因长为927bp的特异条带.相比林莎的方法,改良SDS酸酚法具有经济、简便、适用性广的特点. 罗绍银 高继海 叶生亮 徐莺 陈放关键词:总RNA 麻疯树 油脂 胚乳