张苗苗
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:天津医科大学基础医学院遗传学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 缺氧环境下雷公藤甲素对人脐静脉内皮细胞HIF1α和VEGF表达的影响
- 2017年
- 目的探讨缺氧环境下雷公藤甲素(TP)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中缺氧诱导因子1α(HIF1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 (1)HUVECs加入0、40、80、160、320 nmol/L的TP(分别为缺氧组,TP40组、TP80组、TP160组、TP320组)在缺氧条件下(37℃、5%CO2、1%O2、94%N2)培养12 h,同时设常氧组(不加TP)作为对照,Western blot检测各组HIF1α蛋白表达。(2)细胞设TP80组、缺氧组和常氧组,免疫荧光法检测HIF1α在细胞中的表达定位。(3)设TP80组和缺氧组,处理结束后Western blot检测VEGF蛋白表达水平。(4)设缺氧组、TP80组,TP80+KF20组(80 nmol/L TP和20μmol/L KC7F2)、TP80+KF30组(80 nmol/L TP和30μmol/L KC7F2),处理12 h后Western blot检测各组HIF1α、VEGF蛋白表达。结果 (1)常氧条件下HUVECs不表达HIF1α;缺氧条件下,TP80组HIF1α表达水平较缺氧组明显升高(P<0.05),TP160组和TP320组HIF1α表达水平与缺氧组相比无明显变化。(2)细胞免疫荧光结果显示HIF1α主要表达于细胞核。(3)TP80组VEGF表达水平较缺氧组升高(P<0.05)。(4)经KC7F2干预后,TP80+KF20组和TP80+KF30组HIF1α、VEGF表达水平较TP80组明显降低(P<0.05)。结论缺氧环境下TP可通过提高HIF1α和VEGF表达来促进内皮细胞的增殖。
- 田园张苗苗时文涛李申王玉川何玉坤李卫东
- 关键词:雷公藤甲素内皮细胞缺氧诱导因子1,Α亚基血管内皮生长因子类
- 哺乳动物细胞DNA高级结构G-四链体检测方法的建立被引量:1
- 2017年
- G-四链体(G-quadruplex,G4)结构是由富含鸟嘌呤(G)的寡核苷酸折叠堆积形成的四链螺旋结构,在维持基因组稳定性和调控基因表达上有重要意义。然而,目前细胞内检测G-四链体方法有限,该文利用G-四链体特异性抗体(BG4)对经细胞质抽提和RNase处理的贴壁培养细胞基因组G-四链体进行免疫荧光–荧光原位杂交检测,直接观察DNA高级结构G-四链体,实现了细胞水平G-四链体的可视化,这将有助于今后更准确、直观地在细胞水平研究DNA G-四链体,明确G-四链体与小分子配体相互作用,巩固G-四链体在遗传学、表观遗传学和病理学等领域研究中的地位。
- 肖英男袁晶华张苗苗王峰
- 关键词:端粒