李睿
- 作品数：8 被引量：22H指数：3
- 供职机构：山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 苹果多肽激素及其编码基因MdCEP1调控拟南芥根系发育被引量：2
- 2017年
- 植物多肽激素是一类经剪切后形成具有特殊功能的成熟的多肽。以‘嘎拉’苹果(Malus×domestica‘Royal Gala’)为研究试材,初步探讨多肽激素C-TERMINALLY ENCODED PEPTIDE1(CEP1)调控根系生长发育的机理,为苹果多肽激素的研究奠定基础。扩增获得多肽激素基因MdCEP1(MDP0000886459),其开放阅读框为366 bp,编码121个氨基酸。进化树分析表明,苹果MdCEP1与白梨的PbCEP1亲缘关系最近。表达分析显示MdCEP1在苹果根和茎中表达量最高,在叶和果实中相对较低;基因表达响应显示MdCEP1表达受到生长素的调控,低浓度生长素明显上调,而高浓度生长素显著抑制MdCEP1表达。外施人工合成小肽MdCEP1p^(Hyp)对拟南芥根系发育起到明显抑制作用,主根变短,侧根数减少。在拟南芥中异位表达MdCEP1,同样表现出主根变短,侧根数减少。qRT-PCR分析结果显示,外源MdCEP1p^(Hyp)处理和过表达MdCEP1均明显抑制了拟南芥根系生长素合成与转运相关基因的表达。研究结果表明MdCEP1在根系生长发育过程中起到了负调控作用。
- 李睿李浩浩安建平由春香王小非郝玉金
- 关键词：苹果多肽激素根系生长发育
- 苹果异三聚体G蛋白α亚基基因MdGPA1的克隆及功能鉴定被引量：3
- 2017年
- 【目的】异三聚体G蛋白(Heterotrimeric G protein)作为植物生物体内重要的信号转导分子,在感受外界环境刺激、参与植物抗逆反应和跨膜信号转导等方面发挥着重要作用。克隆异三聚体G蛋白α亚基基因MdGPA1,并在烟草中过量表达MdGPA1,对其进行生物学功能鉴定和生理指标分析,为多年生木本植物响应环境因子信号转导过程中的分子机理研究提供参考。【方法】本研究以‘嘎拉’苹果(Malus×domestica‘Royal Gala’)为研究试材,利用同源序列比对和PCR技术,克隆获得MdGPA1。使用MEGA5.0构建GPA1物种间系统进化树;利用qRT-PCR方法检测该基因在苹果受非生物胁迫诱导表达及组织特异性表达情况。构建MdGPA1植物过表达载体,通过农杆菌介导法转化烟草叶片,比较干旱胁迫条件下野生型和转基因株系的表型与生理指标,验证MdGPA1在植物干旱胁迫条件下的生物学功能。【结果】克隆得到苹果异三聚体G蛋白α亚基基因MdGPA1(基因序列号:MDP0000881842),该基因长为1 173 bp,编码390个氨基酸。进化树分析表明MdGPA1与白梨Pb GPA1亲缘关系最近,同源性最高。基因表达分析显示MdGPA1主要在叶片中表达,在根系中的表达量次之,在茎和果实中的表达量较低。定量分析表明,该基因参与干旱、低温和盐等非生物逆境胁迫响应,在150 mmol·L^(-1)Na Cl、150 mmol·L^(-1)甘露醇、10%PEG和4℃胁迫条件下表达量明显下调,在5%H_2O_2胁迫处理下表达量明显上调。在烟草中过量表达MdGPA1,发现MdGPA1转基因烟草表现出对干旱敏感的表型特征,其叶片鲜重、叶绿素含量以及脯氨酸含量明显低于野生型烟草。在地下部,MdGPA1转基因烟草同样表现出对干旱敏感的表型特征;其根系形态相比于野生型较小,干重也明显低于野生型。【结论】MdGPA1参与了植物感受外界环境刺激的过程,对干旱、低温和盐等非生物逆境胁迫都存在着不同程度的�
- 李睿安建平由春香王小非郝玉金
- 关键词：苹果异三聚体G蛋白
- 苹果BTB蛋白MdBT2通过降解MdMYB9抑制花青苷和原花青苷积累
- MdMYB9能够促进苹果中花青苷和原花青苷的合成.目前,对其转录后调节缺乏了解.本文中.我们发现苹果BTB蛋白MdBT2抑制花青苷和原花青苷生物合成.进一步研究表明,MdBT2能够与MdMYB9互作,并且可以通过26S-...
- 安建平李睿曲丰佳由春香王小非郝玉金
- 关键词：泛素化苹果
- 喷施矿质元素对金丝小枣营养状况及生长品质的影响被引量：2
- 2018年
- 以乐陵金丝小枣为试材,设置硼、锌、铁、磷酸二氢钾4种营养液处理,以清水为对照,在金丝小枣不同生育期进行叶面喷施。通过对金丝小枣发育不同时期的果实、叶片进行生理指标和养分含量的测定,探究不同矿质元素对金丝小枣果实发育、养分含量及品质的影响。结果表明:硼、锌、铁、磷酸二氢钾处理均使得金丝小枣果径增长,果形指数增大,一级枣果比例提高;喷施硼、磷酸二氢钾使得果实单果质量、可溶性糖含量显著提高;喷硼使得叶片磷、硼以及果实磷、钾、硼含量显著提高;喷锌使得叶片锌、钾含量提高;喷施铁使得叶片、果实中铁含量增加;喷施磷酸二氢钾提高了叶片磷、钾以及果实硼含量。以上结果表明,叶面喷施矿质元素可以有效的促进金丝小枣的生长发育,提高果实的品质。
- 牛晓琳马文凤陈桂敏李睿李睿
- 关键词：金丝小枣喷施矿质元素
- 山东乐陵‘金丝小枣’生产现状调查及发展建议被引量：10
- 2017年
- 近年来,‘金丝小枣’产量下降、裂果严重,给枣农造成了较大经济损失,影响了‘金丝小枣’产业的发展。对山东省乐陵市‘金丝小枣’生产现状进行调查,分析了纯枣园区与枣粮间作区‘金丝小枣’的产量以及裂果、落果情况,对其经济效益、栽培管理现状进行了调研和统计分析,并提出相应建议和措施,以期为‘金丝小枣’的栽培生产和产业发展提供借鉴。
- 牛晓琳陈桂敏李建丽李睿张宏彦
- 苹果MdRCD1基因的表达分析以及功能的初步鉴定
- 2017年
- 【目的】分离克隆苹果MdRCD1基因,分析其蛋白结构和逆境响应,并初步鉴定MdRCD1在苹果愈伤中的功能。【方法】同源克隆MdRCD1并测序,用DNAman和MEGA5相关软件分析MdRCD1氨基酸序列以及进化关系,不同逆境处理‘嘎拉’苹果组培苗,qRT-PCR分析MdRCD1在逆境条件下的表达量。农杆菌介导的遗传转化方法获得过量表达MdRCD1的转基因愈伤,不同盐浓度处理野生型和转基因愈伤,观察愈伤的长势,检测愈伤的鲜质量、脯氨酸和丙二醛含量,鉴定MdRCD1的初步功能。【结果】从‘嘎拉’苹果中克隆了MdRCD1(MDP0000234325)基因。该基因ORF为1 803 bp。通过进化树和蛋白同源性分析,表明苹果MdRCD1和中国白梨PbRCD1进化亲缘关系最近。在MdRCD1的N端有1个保守的WWE结构域,1个PARP催化中心,在C端有1个RST结构域。qRT-PCR实验表明MdRCD1在苹果各个组织器官中都有表达,在茎中的表达量高于其他组织;同时MdRCD1的表达受Na Cl、ABA、渗透胁迫等逆境胁迫的诱导。通过农杆菌侵染获得过量表达MdRCD1转基因苹果愈伤。盐胁迫处理条件下,过量表达MdRCD1的抗性明显提高。【结论】MdRCD1在进化过程中比较保守,苹果不同组织中都有表达,过量表达MdRCD1苹果愈伤的抗盐性得到提高。
- 李浩浩曲丰佳安建平李睿郝玉金王小非由春香
- 关键词：苹果基因克隆盐胁迫
- 过表达苹果多肽激素基因MdCEP1促进花青苷积累被引量：4
- 2018年
- 以‘王林’苹果(Malus×domestica‘Orin’)愈伤组织为试材,初步探讨苹果多肽激素Md CEP1(C-TERMINALLY ENCODED PEPTIDE1)在调控花青苷合成方面的作用。分析显示Md CEP1位于苹果第15号染色体,只有1个外显子。蛋白序列比对显示不同物种中CEP结构域非常保守。启动子分析表明,Md CEP1启动子序列包含多个顺式作用元件,包括与分生组织有关的CAT-box元件、赤霉素响应元件(P-box)、光响应元件(MNF1)和与类黄酮合成相关的MYB类蛋白结合位点(MBSI)。通过农杆菌介导的遗传转化获得Md CEP1转基因苹果愈伤组织,进一步分析发现过表达Md CEP1能够明显促进愈伤组织花青苷积累,并且促进花青苷合成相关基因的表达。Md CEP1在拟南芥中异位表达,同样能够促进拟南芥中花青苷的积累,并且促进拟南芥花青苷合成相关基因的表达。研究结果表明,Md CEP1能够正调控苹果花青苷的合成。
- 李睿安建平由春香王小非郝玉金
- 关键词：苹果多肽激素花青苷
- 苹果紫色酸性磷酸酶相关基因MdPAP10的克隆及功能鉴定被引量：1
- 2018年
- 【目的】克隆苹果紫色酸性磷酸酶相关基因Md PAP10,研究其组织表达模式和低磷响应,并进一步研究Md PAP10在低磷条件下的功能,为深入研究Md PAP10在果树中参与紫色酸性磷酸酶分泌和影响磷吸收的分子机理奠定基础。【方法】本研究以‘嘎啦’苹果(Malus×domestica‘Royal Gala’)为试材,利用同源序列比对和PCR技术,克隆苹果紫色酸性磷酸酶相关基因Md PAP10。通过NCBI分析Md PAP10的蛋白质结构并获得白梨、桃和草莓等10个物种的PAP10氨基酸序列,利用MEGA5.0构建系统进化树。利用q RT-PCR检测Md PAP10在苹果不同组织的表达情况和对低磷胁迫的响应特性。将Md PAP10连接到植物过表达载体p BI121,转化LBA4404农杆菌,用于侵染苹果愈伤组织。通过在抗性培养基上筛选和PCR鉴定,获得Md PAP10转基因愈伤组织。在低磷培养基上培养Md PAP10转基因愈伤组织检测其酸性磷酸酶积累情况以及对低磷胁迫的耐受性和磷含量。最后利用q RT-PCR检测Md PAP10转基因愈伤组织中磷相关基因的表达量。【结果】克隆获得苹果紫色酸性磷酸酶基因Md PAP10(基因序列号:MDP0000272096),开放阅读框为1 332 bp,编码含有443个氨基酸的蛋白。蛋白质结构分析显示,Md PAP10包含一个信号肽和一个磷酸酶结构域。基因结构分析显示,Md PAP10含有5个外显子和4个内含子。进化树分析显示,苹果Md PAP10与白梨Pb PAP10同源性最高,亲缘关系最近。表达分析显示,Md PAP10在根、茎、叶、花、果中均有表达,并且在根中的表达量最高。Md PAP10对低磷条件有明显响应,在根中表达量逐渐升高,在6 h达到最大后逐渐下降;在叶中的表达量始终低于对照组。Md PAP10转基因愈伤组织在低磷条件下能够明显促进酸性磷酸酶的分泌。在低磷条件下培养转基因愈伤组织20 d发现过表达Md PAP10提高了愈伤组织对低磷胁迫的耐受性,并且提高了对磷的吸收。q RT-PCR结
- 李睿安建平由春香王小非郝玉金
- 关键词：苹果MD
