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miR-34a调控Notch-1／NF-κB信号通路对脓毒症小鼠脑功能的保护作用被引量：3: 2017年; 目的观察脓毒症小鼠脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10及其Notch-1、NF-κB mRNA及其蛋白表达的动态变化，通过构建miR-34a过表达慢病毒载体及包装，并进行鞘内注射，研究其调控Notch-1／NF-κB信号通路对脓毒症小鼠脑组织各指标的影响。方法将清洁级小鼠54只随机（随机数字法）分为假手术组（sham组，n=9，仅行腹腔开关术），模型组（CLP组，n=15，采用盲肠结扎穿孔模型），阴性对照组[NC组，n=15，鞘内注射阴性对照慢病毒（滴度为5×10^8TU／mL）5μL／d，共3d，第7天行CLP术]，干预组[n=15，鞘内注射miR-34a慢病毒（滴度为5×10^8TU／mL）5μL共3d，第7天行CLP术]，各组小鼠均于术后24h，麻醉后处死，留取脑组织标本。观察小鼠行为学变化，术后24h进行神经功能评分；用ELISA法分别测定脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的水平；用实时荧光定量-PCR（real-time fluorogenic quantitative-PCR）法测定脑组织Notch-1、NF-κB mRNA表达；用Western Blot法测定脑组织Notch-1、NF-κB蛋白表达；并观察脑组织病理学改变。结果与sham组比较，CLP组在术后24h点神经功能评分、TNF-α、IL-6水平、NF-κB mRNA及其蛋白表达（P〈0．01）、IL-1β显著升高（P〈0．05），IL-10水平、Notch-1 mRNA及其蛋白表达显著下降（P〈0．01），NC组在术后24h点神经功能评分、TNF-α、IL-1β水平、NF-κB蛋白表达（P〈0．01）、IL-6水平显著升高（P〈0．05），IL-10水平、Notch-1 mRNA及其蛋白表达显著下降（P〈0．01），NF-κB mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05）；与CLP组比较，干预组在术后24h点TNF-α水平（P〈0．01）、NF-κB mRNA（P〈0．05）及其蛋白表达（P〈0．01）显著下降，神经功能评分、IL-1β、IL-6水平差异无统计学意义（P〉0．05），IL-10、Notch-1 mRNA（P〈0．05）及其蛋白表达（P〈0．01）显著升高，NC组各指标差异均无统计学意义（P〉0．05; 葛赟黄曼颜成敏陈芬马岳峰; 关键词：MIR-34A NOTCH-1 NF-ΚB 慢病毒载体

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陈芬

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