刘玲伶
- 作品数：13 被引量：39H指数：4
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技厅工业攻关项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖尿病大鼠肾组织中miR-21和SnoN表达的变化被引量：5
- 2017年
- 目的探讨糖尿病(DM)大鼠肾组织中微小核糖核酸-21(miR-21)和核转录共抑制因子(SnoN)在肾纤维化过程中的表达变化及其可能机制。方法用链脲佐菌素复制DM大鼠模型,并设对照组(NC),每组n=8。10周后处死大鼠,观察肾组织形态变化;免疫组织化学染色、Western blot及RT-q PCR检测miR-21、SnoN、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、p-Smad3(Ser423/425)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ)和胶原蛋白Ⅲ(collagenⅢ)的表达。结果与对照组相比,DM组肾组织p-Smad3(Ser423/425)、TGF-β1和α-SMA蛋白表达增加(P<0.05),SnoN、E-cadherin蛋白表达减少(P<0.05),但SnoN mRNA和miR-21表达明显上调(P<0.05),并伴有collagenⅠ、collagenⅢ和FN在间质沉积增多。结论 TGF-β1可能上调miR-21表达,抑制SnoN翻译水平的表达,促进DN的纤维化病变。
- 刘玲伶刘丽荣王圆圆石明隽肖瑛张莹莹张小欢郭兵
- 关键词：糖尿病肾病MIR-21
- 阿托伐他汀促进糖尿病大鼠肾组织BMP-7和SnoN的表达被引量：1
- 2018年
- 目的观察阿托伐他汀(AT)治疗对糖尿病大鼠肾组织骨形态发生蛋白-7(BMP-7)和核转录共抑制因子SnoN表达的影响。方法将大鼠分为对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)(用链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型)和糖尿病+阿托伐他汀灌胃治疗组(AT组),每组n=8。16周后处死大鼠,检测生化指标,观察肾组织病理学改变,免疫组化检测肾组织胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)和胶原蛋白Ⅲ(ColⅢ)的表达,Western blot检测肾组织BMP-7、SnoN、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、骨架蛋白(Desmin)和胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)的表达。结果与对照组相比,DM组大鼠的血糖、三酰甘油、肾脏指数、尿微量白蛋白/尿肌酐(MA/CR)均增多(P<0.05);AT组大鼠上述指标回降(P<0.05)。DM组出现了肾小球萎缩、肾小管炎性浸润等典型纤维化病变,AT组病变有所减轻。DM组ColⅠ和ColⅢ增多,AT组回降。与对照组相比,DM组BMP-7、SnoN、E-cadherin表达显著减少,而Desmin和ColⅣ表达增多;AT组BMP-7、SnoN、E-cadherin表达回升(P<0.05),而Desmin和ColⅣ表达回降(P<0.05)。结论阿托伐他汀可以通过上调BMP-7和SnoN的蛋白表达来治疗或延缓糖尿病肾病。
- 彭伟张小欢张小欢王圆圆刘玲伶石明隽王圆圆
- 关键词：糖尿病肾病骨形态发生蛋白-7SNON
- α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏miR-21和Smad7表达及纤维化的影响被引量：8
- 2018年
- 目的:观察α-硫辛酸(ALA)对糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用,并探讨其作用机制。方法:将SD大鼠分为正常对照(NC)组、DM组和ALA组,给药6周后处死大鼠测定相应生化指标和肾脏指数。HE和Masson染色观察肾组织的形态结构变化; Western blot检测大鼠肾组织中转化生长因子β1 (TGF-β1)、p-Smad2/3、Smad7、collagen I和collagen III的蛋白表达水平; RT-qPCR检测肾组织微小RNA-21 (miR-21)的表达。结果:与NC组相比,DM组大鼠肾重/体重、血葡萄糖(BG)、血总胆固醇、血甘油三酯和24 h尿蛋白均显著增高,肾脏病理学检查显示出现肾纤维化改变,Smad7蛋白水平显著降低,TGF-β1、p-Smad2/3、collagen I和collagen III显著增高,miR-21水平亦显著升高(P <0. 05); ALA治疗后,DM大鼠除了BG无明显变化外,其余生化指标和肾脏指数均明显低于DM组,肾脏病理学检查显示肾纤维化病变明显得到改善,Smad7蛋白较DM组显著升高,TGF-β1、p-Smad2/3、collagen I和collagen III较DM组显著降低,miR-21水平较DM组显著降低(P <0. 05)。结论:ALA可抑制DM大鼠肾脏纤维化的发生发展,其机制可能是通过抑制TGF-β1和miR-21表达而上调Smad7蛋白的表达水平,使细胞外基质沉积减少。
- 毛彦稳张小欢彭伟刘慧铭刘玲伶王圆圆刘丽荣张莹莹张帆石明隽肖瑛汤磊郭兵
- 关键词：Α-硫辛酸微小RNA-21
- 蛋白酶体抑制剂MG132抑制糖尿病肾脏疾病机制的研究被引量：4
- 2018年
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG132是否抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)的发展及其可能的机制。方法 STZ复制糖尿病大鼠,随机分为糖尿病组(DM组,n=9)、MG132治疗组(MG132组,n=9),MG132组从第9周起予MG 132[0.1mg/(kg·d)]腹腔注射治疗糖尿病大鼠。同时设对照(Con组,n=9)组,检测生化指标,观察肾组织病理改变;Western blot检测肾组织SnoN、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)、钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与Con组比较,DM组血糖[(5.85±0.86)vs(17.49±1.21)mmol/L,P=0.00]、尿微量白蛋白/尿肌酐比值(UACR)[(1.11±0.29)vs(16.36±3.06)mg/mmol,P=0.00]、肾脏指数(KW/BW)[(6.32±0.49)vs(14.54±1.49)mg/g,P=0.00]明显增加,且肾小管间质纤维化病变明显,α-SMA[(0.18±0.03)vs(0.33±0.02),P=0.002)增多,而SnoN[(0.87±0.10)vs(0.32±0.11),P=0.007)、PTEN[(2.06±0.09)vs(1.26±0.06),P=0.00]、E-cadherin[(1.32±0.06)vs(0.50±0.03),P=0.00]减少;MG132治疗后,UACR[(6.74±3.47)mg/mmol,P=0.003]、KW/BW[(12.43±1.11)mg/g,P=0.01]降低,纤维化病变减轻,α-SMA[(0.19±0.05),P=0.003]减少,SnoN[(0.55±0.09),P=0.033]、PTEN[(1.73±0.15),P=0.002]、E-cadherin[(1.11±0.10),P=0.00]蛋白的表达增加。结论 MG132可能通过恢复SnoN、PTEN蛋白水平抑制DKD的发展。
- 王圆圆张小欢毛彦稳刘玲伶彭伟刘慧铭石明隽肖瑛张莹莹郭兵
- 关键词：糖尿病肾脏疾病肾脏纤维化蛋白酶体抑制剂MG132SNON
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对糖尿病大鼠肾间质纤维化的影响及机制被引量：2
- 2017年
- 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他（suberoylanilide hydroxamic acid，SAHA）对糖尿病大鼠肾小管间质纤维化的作用及其可能机制。方法SD大鼠分为3组：对照组（Con）、糖尿病（diabetes mellitus，DM）组及SAHA治疗组，每组9只。以链脲菌素（streptozotocin，STZ）诱导糖尿病，于成模第9周治疗组给予剂量为25mg·kg-1·d-1的SAHA灌胃。16周末处死大鼠，检测相应生化指标，观察肾组织病理改变，免疫组化及Western印迹检测肾组织转化生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）、Smad2、Smad3、Smad7、胶原蛋白I（collagen Ⅰ，Col—Ⅰ）和胶原蛋白Ⅲ（collagen Ⅲ，Col-Ⅲ）的定位及蛋白表达。结果与Con组相比，DM组大鼠血糖、尿微量白蛋白／尿肌酐之比值（urinary trace albumin／urinary creatinine，ACR）、三酰甘油（triglyceride，TG）、总胆固醇（total cholesterol，TC）增加，肾小管间质纤维化病变增加，肾组织中Smad7蛋白减少，TGF-β1、磷酸化（p）-Smad2和p-Smad3蛋白增多，Col-Ⅰ和Col-Ⅲ蛋白在间质沉积增多，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。与DM组比较，SAHA治疗组ACR降低，肾小管间质的纤维化病变减轻，Smad7蛋白表达增加，TGF-β1、P-Smad2和p-Smad3蛋白表达减少，Col-Ⅰ和Col-Ⅲ蛋白在间质的沉积减少，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论SAHA可能通过提高Smad7蛋白水平，恢复TGF-β1信号通路的适度转导，进而减轻糖尿病大鼠肾小管间质纤维化病变。
- 王圆圆毛彦稳张小欢彭伟刘玲伶刘慧铭石明隽肖瑛张莹莹郭兵
- 关键词：纤维化SMAD7
- 吡格列酮改善糖尿病肾脏疾病肾小管间质纤维化病变的动物实验研究被引量：6
- 2019年
- 目的探讨吡格列酮通过影响AMPK/PI3K/mTOR通路抑制糖尿病肾脏纤维化发生发展的分子机制。方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组(NC)、糖尿病组(DM)及吡格列酮治疗组(BG),每组各8只。DM组和BG组STZ腹腔注射复制T1DM模型,成模后第9周BG组予吡格列酮10mg/(kg·d)连续灌胃8周。16周末处死大鼠,取血清和处死前24 h尿液检测生化指标,观察肾脏组织病理改变,免疫组织化学法和Western blot检测目的蛋白的表达。结果与NC组比较,DM组FBG、UACR、TG、TC均升高(P<0. 05),与DM组比较,BG组UACR、TG和TC降低(P<0. 05)。与NC组比较,BG组肾小管间质纤维化增加,胶原阳性染色加重,胶原容积分数(CVF)[(17. 48±0. 59)%vs(36. 16±2. 09)%,P<0. 05],肾间质Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)[(0. 08±0. 02)vs(0. 26±0. 02),P<0. 05]沉积增加而上皮钙黏附蛋白(E-cadherin)减少[(0. 44±0. 01)vs(0. 19±0. 01),P<0. 05],肾组织活化的AMPKα减少[(3. 42±0. 57)vs(0. 93±0. 05),P<0. 05],活化的Akt[(0. 27±0. 04)vs(0. 49±0. 06),P<0. 05]、m TOR[(0. 63±0. 15)vs(5. 28±0. 89),P<0. 05]及P70S6K[(0. 63±0. 09)vs(0. 97±0. 13),P<0. 05]增加,E-cadherin减少[(0. 45±0. 09)vs(0. 27±0. 06),P<0. 05],α-SMA表达增加[(0. 21±0. 04)vs(0. 51±0. 12),P<0. 05];与BG组比较,DM组肾脏纤维化病理改变减轻,胶原阳性染色减轻,CVF[(36. 16±2. 09)%vs(25. 24±2. 34)%,P<0. 05],肾间质Col-Ⅲ沉积减少[(0. 26±0. 02)vs(0. 18±0. 03),P=0. 005],E-cadherin增加[(0. 19±0. 01)vs(0. 31±0. 02),P<0. 05],肾组织活化的AMPKα增加[(0. 93±0. 05)vs(2. 64±0. 76),P<0. 05],活化的Akt[(0. 49±0. 06)vs(0. 29±0. 08),P<0. 05]、m TOR[(5. 28±0. 89)vs(1. 63±0. 71),P<0. 05]和P70S6K[(0. 97±0. 13)vs(0. 71±0. 09),P<0. 05]减少,肾组织E-cadherin蛋白表达增加[(0. 27±0. 06)vs(0. 42±0. 03),P<0. 05],α-SMA表达减少[(0. 51±0. 12)vs(0. 24±0. 05),P<0. 05]。结论吡格列酮可能通过增加AMPKα的活化,抑制PI3K/mTOR信号通路,缓解糖尿病大鼠肾脏纤维化病变。
- 刘慧铭刘玲伶周星丞彭伟张小欢毛彦稳任飞燕王圆圆张帆张莹莹石明隽肖瑛桂华珍汤磊郭兵
- 关键词：糖尿病肾脏疾病吡格列酮腺苷酸活化蛋白激酶MTOR信号通路
- 糖尿病小鼠肾组织中PPARγ和PTEN的表达被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨糖尿病(DM)小鼠肾组织中过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)和第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)在肾纤维化过程中的表达变化及可能机制。方法:用链脲佐菌素(STZ)复制DM小鼠模型,并设正常对照组(NC组),每组8只,饲养16周后处死小鼠取肾组织,采用HE和Masson染色观察肾组织形态变化,SP法检测肾组织中E钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,Western blot检测肾组织中PPARγ、PTEN、蛋白激酶B1(protein kinase B1,PKB1/Akt1)、磷酸化蛋白激酶B1[p-Akt1(Ser^(450))]蛋白的表达,qRT-PCR检测肾组织中PPARγ和PTEN mRNA的变化。结果:与NC组比较,DM组小鼠E-cadherin表达减少,α-SMA表达增多;DM组肾组织p-Akt1(Ser^(450))蛋白表达增加,PPARγ、PTEN蛋白及mRNA表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PPARγ可能通过调节PTEN转录水平减少PTEN的表达。
- 刘玲伶严瑞王圆圆石明隽郭兵
- 关键词：蛋白激酶类PTEN蛋白
- α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能的机制被引量：4
- 2018年
- 目的观察α-硫辛酸(ALA)对糖尿病大鼠肾脏的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法复制糖尿病大鼠模型,分为糖尿病组(DM组)、糖尿病硫辛酸组(ALA组),并设置正常对照组(NC组)。实验6周后处死全部大鼠,测定相应生化指标和相关氧化应激指标;HE、Masson染色观察肾组织的形态变化;免疫组织化学和Western blot检测大鼠肾组织中核转录共抑制因子(SnoN)、转化生长因子(TGF-β_1)、Collagen I、Collagen IV表达水平。结果 (1)DM组大鼠肾重/体重、血糖、血总胆固醇、三酰甘油、24 h尿蛋白均高于NC组,ALA组除了血糖外以上其余指标均低于DM组。(2)DM组总抗氧化物酶活性(T-AOC)、总超氧化物歧化酶活性(T-SOD)、过氧化氢酶活性(CAT)低于NC组,丙二醛含量(MDA)增多;ALA组T-AOC、T-SOD、CAT活性高于DM组,MDA含量降低。(3)病理检查显示,DM组大鼠出现肾纤维化改变,ALA组肾纤维化病变明显改善。(4)免疫组织化学和Western blot结果显示:与NC组相比,DM组大鼠SnoN蛋白水平降低,TGF-β_1、Collagen I和Collagen IV增高;与DM组相比,ALA组SnoN蛋白水平升高,TGF-β_1、Collagen I和Collagen IV降低。结论α-硫辛酸可以增强DM大鼠肾脏的抗氧化能力,上调SnoN蛋白的表达,从而抑制TGF-β_1信号通路而减少细胞外基质沉积,对糖尿病大鼠肾脏起到保护作用。
- 张小欢毛彦稳彭伟王圆圆刘丽荣刘玲伶石明隽肖瑛汤磊郭兵
- 关键词：糖尿病肾病SNON氧化应激Α-硫辛酸
- PPARγ通过PTEN调控AKT/FAK通路影响高糖条件下肾小管上皮细胞转分化
- 2020年
- 目的:探讨在高糖培养的肾小管上皮细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)对PTEN/AKT/FAK通路的调控机制及对肾小管上皮细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法:以高糖培养的肾小管上皮细胞NRK52E为研究对象,采用过表达及shRNA干扰技术分别上调和下调肾小管上皮细胞中PPARγ的表达,并培养48 h,应用细胞免疫荧光、Western blot和RT-qPCR方法检测PTEN及EMT相关蛋白的表达变化;然后,在过表达及敲减PTEN的情况下,分别给予PPARγ抑制剂GW9662及激动剂罗格列酮干预,进一步观察PPARγ对AKT/FAK通路的调节是否通过PTEN实现的。结果:过表达PPARγ组PPARγ和PTEN的mRNA及蛋白表达增加,E-cad⁃herin的表达明显上调,而vimentin和α-SMA蛋白表达显著下调(P<0.05);PPARγ敲减组PPARγ及PTEN的mRNA及蛋白表达水平明显降低,E-cadherin的表达也明显下调,而vimentin和α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.05)。GW9662干预组PTEN的表达减少,而p-AKT(Thr308)、FAK及p-FAK(Tyr397)蛋白水平均明显升高(P<0.05);与GW9662组相比,GW9662+过表达PTEN组PTEN表达明显增加,并伴随p-AKT(Thr308)、FAK及p-FAK(Tyr397)蛋白水平的降低(P<0.05);罗格列酮干预组PTEN的表达增多,而p-AKT(Thr308)、FAK和p-FAK(Tyr397)蛋白水平降低(P<0.05);与罗格列酮组相比,罗格列酮+PTEN shRNA组PTEN的表达减少,相应的p-AKT(Thr308)、FAK和p-FAK(Tyr397)蛋白水平升高(P<0.05)。结论:PPARγ能调节肾小管上皮细胞PTEN的mRNA及蛋白表达水平,并影响肾小管上皮细胞的EMT;PPARγ对AKT及FAK通路的调节及对细胞EMT的影响主要是通过PTEN实现的。
- 严瑞杨雨星刘玲伶王圆圆陈烨郭兵
- 关键词：高糖过氧化物酶体增殖物激活受体ΓPTEN蛋白肾小管上皮细胞上皮-间充质转化
- 控制血糖对糖尿病大鼠肾组织Ski表达的影响被引量：1
- 2019年
- 目的:观察控制血糖前后Ski蛋白在糖尿病(DM)大鼠肾组织的表达变化,探讨其在糖尿病肾病(DN)发病过程中的作用。方法:24只SD大鼠随机分为正常组(NC)、DM组和胰岛素治疗(INS)组,DM组和INS组采用链脲佐菌素复制DM大鼠模型,INS组于造模成功4周后给予胰岛素22 U/(kg·d)治疗6周,于造模后第10周,采用生化法测定糖化血红蛋白(HbA1c)、血糖及24 h尿蛋白量,观察肾组织病理变化,免疫组织化学染色检测肾组织Ski、Collagen-Ⅲ及E-cadherin表达,Western Blot检测SD大鼠肾组织中Ski、转化生长因子β1(TGF-β1)、Collagen-Ⅲ、Smad3及p-Smad3(Ser432/425)蛋白的表达水平。结果:与NC组大鼠相比,DM组大鼠体质量减轻、血糖及Hb A1c增高,肾小管和肾小球纤维化改变明显,INS组上述改变有所改善;免疫组织化学染色显示,肾组织Ski、Collagen-Ⅲ表达从高到低依次为DM组>INS组>NC组(P<0.05),E-cadherin表达从高到低依次为NC组>INS组>DM组(P<0.05); Western Blot检测结果显示,肾组织TGF-β1、Collagen-Ⅲ、p-Smad3(Ser 432/425)和Ski蛋白的表达从高到低依次为DM组>INS组>NC组(P<0.05)。结论:DM大鼠肾组织Ski蛋白表达增高、TGF-β1/Smad3通路活化导致肾脏纤维化;而控制血糖后,Ski蛋白表达下调,TGF-β1/Smad3信号活化减弱,纤维化病变减轻。
- 梁露群任飞燕刘玲伶刘玲伶张小欢毛彦稳张小欢王圆圆石明隽郭兵
- 关键词：血糖肾纤维化转化生长因子Β1
